【摘要】： 目的 高濃度氧(簡(jiǎn)稱高氧)指氧含量高于常壓下空氣的氣體，在新生兒救治中具有重要作用，但長(zhǎng)時(shí)間吸入高氧可造成肺損傷而引起呼吸衰竭甚至死亡，亦可發(fā)展為支氣管肺發(fā)育不良(bronchopulmonary dysplasia，，BPD)。目前，新生兒高氧肺損傷的發(fā)病機(jī)制尚未完全清楚，臨床上使用高氧救治患兒時(shí)，既無(wú)明確的吸氧濃度和時(shí)間安全臨界值作為參考，也無(wú)好的措施來(lái)防治高氧肺損傷。本課題旨在通過(guò)研究新生鼠不同時(shí)間內(nèi)吸入不同濃度氧肺組織的病理改變、丙二醛(malondiadehyde，MDA)含量、總抗氧化能力(total anti-oxygen capability，TAOC)、一氧化氮(nitric oxide，NO)含量，以及內(nèi)皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase，eNOS)和誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase，iNOS)的表達(dá)，試圖：①探索新生鼠高氧肺損傷與肺組織脂質(zhì)過(guò)氧化程度、TAOC、NO含量，以及eNOS和iNOS表達(dá)的關(guān)系，為防治高氧肺損傷提供依據(jù)。②探索新生鼠吸氧濃度和吸氧時(shí)間的安全臨界值，為選擇合適的氧療濃度和時(shí)間提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法 1．160只出生12小時(shí)內(nèi)的清潔級(jí)Sprague-Dawley(SD)大鼠(簡(jiǎn)稱新生鼠)作為研究對(duì)象。 2．按吸入氧濃度不同隨機(jī)分成4組，Ⅰ. 95%O2組，Ⅱ.60%O2組，Ⅲ.40%O2組，Ⅳ.正�？諝鈱�(duì)照組，將Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組新生鼠置于密閉氧艙內(nèi)，分別通入對(duì)應(yīng)的已知濃度的氧氣，Ⅳ組置于正�？諝庵小Ｈ〔煌瑫r(shí)相點(diǎn)(12、24、48、72小時(shí))的肺組織用于實(shí)驗(yàn)研究。 3．采用硫代巴比妥酸法測(cè)肺組織勻漿中MDA含量。 4．采用硝酸還原酶法測(cè)肺組織勻漿中NO含量。 5．采用化學(xué)比色法測(cè)肺組織勻漿中TAOC。 6．采用免疫組織化學(xué)染色法研究肺組織eNOS和iNOS的表達(dá)，然后采用MIG2000圖像分析測(cè)量系統(tǒng)進(jìn)行半定量分析。 7．在光鏡和透射電鏡下觀察肺組織病理改變。 結(jié)果 1．肺組織MDA含量：Ⅰ組各時(shí)相點(diǎn)MDA含量均顯著高于其余三組(P0.01)； WP=8 Ⅱ組48和72小時(shí)的MDA含量顯著高于Ⅲ組和Ⅳ組(P0.01)；Ⅲ組48和72小時(shí)的MDA含量顯著高于Ⅳ組(P0.01，P0.05)。隨著吸氧濃度的升高和時(shí)間的延長(zhǎng)，MDA含量逐漸增高，而且各時(shí)相點(diǎn)MDA含量與吸氧濃度呈顯著正相關(guān)(P0.01)。 2．肺組織NO含量：Ⅰ組各時(shí)相點(diǎn)的NO含量均顯著高于其余三組(P0.05，P0.01)；Ⅱ組24、48、72小時(shí)的NO含量顯著高于Ⅳ組(P0.05，P0.01)，72小時(shí)的NO含量顯著高于Ⅲ組(P0.05)；Ⅲ組72小時(shí)的NO含量顯著高于Ⅳ組(P0.01)。各時(shí)相點(diǎn)NO含量與吸氧濃度呈顯著正相關(guān)(P0.01)。 3．肺組織TAOC：Ⅰ組各時(shí)相點(diǎn)TAOC均顯著低于其余三組(P0.05，P0.01)；Ⅱ組24、48和72小時(shí)的TAOC顯著低于Ⅳ組(P0.05，P0.01)，48和72小時(shí)的TAOC顯著低于Ⅲ組(P0.01)；Ⅲ組48和72小時(shí)的TAOC又顯著低于Ⅳ組(P0.01)。吸氧濃度越高，時(shí)間越長(zhǎng)，TAOC越低，各時(shí)相點(diǎn)TAOC與吸氧濃度呈顯著負(fù)相關(guān)(P0.01)。 4．肺組織eNOS表達(dá)：Ⅰ組各時(shí)相點(diǎn)eNOS的表達(dá)均顯著強(qiáng)于Ⅲ組和Ⅳ組(P0.05，P0.01)，24和48小時(shí)顯著強(qiáng)于Ⅱ組(P0.05，P0.01)；Ⅱ組各時(shí)相點(diǎn)eNOS的表達(dá)顯著強(qiáng)于Ⅳ組(P0.05，P0.01)，48和72小時(shí)顯著強(qiáng)于Ⅲ組；Ⅲ組48和72小時(shí)eNOS的表達(dá)顯著強(qiáng)于Ⅳ組(P0.05，P0.01)。各時(shí)相點(diǎn)eNOS的表達(dá)與吸氧濃度呈顯著正相關(guān)(P0.01)。 5．肺組織iNOS表達(dá)：Ⅰ組各時(shí)相點(diǎn)iNOS的表達(dá)均顯著強(qiáng)于其余三組(P0.05，P0.01)；Ⅱ組各時(shí)相點(diǎn)iNOS的表達(dá)顯著強(qiáng)于Ⅳ組(P0.05，P0.01)；Ⅲ組48和72小時(shí)iNOS的表達(dá)顯著強(qiáng)于Ⅳ組(P0.05，P0.01)。各時(shí)相點(diǎn)iNOS的表達(dá)與吸氧濃度呈顯著正相關(guān)(P0.01)。 6．肺組織病理改變：新生鼠吸入95% O212小時(shí)、60% O248小時(shí)、40%O272小時(shí)后出現(xiàn)不同程度的肺組織病理改變，如光鏡下可見微血管擴(kuò)張、充血，肺間隔增寬，肺泡內(nèi)有蛋白滲出，炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，出血，肺組織結(jié)構(gòu)紊亂，肺大泡數(shù)量增多等；透射電鏡下可見內(nèi)皮細(xì)胞線粒體腫脹，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腫脹、破壞，吞飲小泡增多，Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞脫落等。隨著吸氧濃度的增高和時(shí)間的延長(zhǎng)，肺損傷程度加重。 結(jié)論 1．新生鼠吸入高氧后肺組織過(guò)量的內(nèi)源性NO和氧自由基的生成可能導(dǎo)致肺損傷；肺組織脂質(zhì)過(guò)氧化程度、NO含量，以及iNOS和eNOS的表達(dá)與吸氧濃度顯著正相關(guān)，而TAOC與吸氧濃度顯著負(fù)相關(guān)。 2．新生鼠吸入95%O212小時(shí)，60%O248小時(shí)，40%O272小時(shí)均可引起肺損傷，隨著吸氧濃度的增高和時(shí)間的延長(zhǎng)，肺損傷加重。這提示適當(dāng)控制吸氧濃度和時(shí)間，有助于減少肺損傷的發(fā)生，減輕肺損傷的程度。
【學(xué)位授予單位】：第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2003
【分類號(hào)】：R722.1

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 許峰,霍泰輝,殷愛珍;Hyperoxia-induced lung injury in premature rat:description of a suitable model for the study of lung diseases in newborns[J];Chinese Medical Journal;1998年07期

本文編號(hào)：2620067