【摘要】：兒童矮小癥是指在相似環(huán)境下,兒童的身高較正常的同種族、同年齡、同性別的人群身高均值低于2個標準差(-2SD)以下或處于第3百分位以下。生長激素缺乏癥(GHD)是臨床常見的矮小癥,其發(fā)病率約為1/5000～1/4000,該病若不能及時診斷和治療,將會導致成年后身材顯著矮小、心血管疾病發(fā)生率升高,而且有相當多病例伴有性腺發(fā)育不良、中樞性甲狀腺功能低下和促腎上腺皮質激素(ACTH)缺乏癥。GHD大多為散發(fā)發(fā)病,屬常染色體隱性或顯性遺傳病,按遺傳方式不同可分為3型IGHDⅠ型為常染色體隱性遺傳,IGHDⅡ型為常染色體顯性遺傳,IGHDⅢ型為X連鎖隱性遺傳。 [研究目的]：通過對一個生長激素缺乏癥家系進行家系調查、分子生物學技術檢測,以期發(fā)現(xiàn)該家系生長激素缺乏癥的候選致病基因關鍵區(qū)域,甚或發(fā)現(xiàn)致病基因。 [研究內容和方法]：1、家系調查及臨床治療：對一家系祖孫三代進行家系調查,對家族中矮小癥患者進行生長激素藥物激發(fā)試驗及相關臨床資料收集。2、SOX3基因檢測：家系16位成員抽提外周血DNA,設計引物,對5位GHD患者進行SOX3基因外顯子及SOX3基因拷貝數(shù)變異檢測。3、微衛(wèi)星DNA多態(tài)性標記定位研究：抽提外周血基因組DNA,利用熒光標記擴增產物長度多態(tài)分析方法(微衛(wèi)星DNA多態(tài)性標記,STR)對家系運用STR位點進行分型；并采用軟件MERLIN對家系的染色體候選區(qū)域進行矮小癥連鎖分析(linkage程序)以及單倍型推斷(Haplotyping程序)。4、人基因組全外顯子測序及候選基因驗證：應用全基因組外顯子測序技術對該生長激素缺乏癥家系3位成員(2位患者及1位正常表型的患者舅舅)進行全基因組外顯子區(qū)域的DNA序列捕獲,結合生物信息分析技術,找到該家系特有的SNP,從而發(fā)現(xiàn)候選基因；再根據候選基因設計引物,在家系成員中進行驗證。 [研究結果]：1、家系調查分析該家系譜有以下特點：1.1該家系中只有男性發(fā)病,而女性不發(fā)病。1.2雙親無病、兒子發(fā)病、女兒不發(fā)病,表明患兒的致病基因是從攜帶者母親遺傳而來。1.3患者的兄弟、舅父、姨表兄弟均患病。據此,臨床上推斷其遺傳模式符合X性染色隱性遺傳。3位患者給予人重組生長激素治療后生長速率改善顯著,終身高將得到改善。2、該家系16位成員SOX3啟動子500bp及外顯子篩查未見突變；樣本3(Ⅱ4)中的SOX3基因表達量約為其他樣本表達量的2倍,未發(fā)現(xiàn)SOX3基因拷貝數(shù)異常。3、家系STR連鎖分析結果顯示位點DXS987和位點DXS1226表現(xiàn)出了很強的致病基因連鎖信號(LOD值=2.408)。4、全基因組外顯子測序及驗證發(fā)現(xiàn)EGFL6(c.1603GA; p.Asp535Asn)及FTHL17(c.442GT, c.443AT; p.Glu148Leu)5位患者均為純合突變,家系女性攜帶者均為雜合突變,而其他正常男性均為野生型純合子。 [研究結論]：該家系生長激素缺乏癥為X染色體隱性遺傳,其致病基因高度提示位于Xp22.3-Xp11區(qū)域,EGFL6及FTHL17是候選致病基因。 本課題研究明確該家族性生長激素缺乏癥致病關鍵候選基因區(qū)域,EGFL6及FTHL17可能是其候選致病基因,這是國內首次對生長激素缺乏癥家系X染色體隱性遺傳病的遺傳基因研究。Xp22.3-Xp11區(qū)域致病基因是新發(fā)現(xiàn)的國際上未曾報導的生長激素缺乏癥致病基因區(qū)段,是對生長激素缺乏癥病因、基因診斷的重要補充,為今后候選致病基因的功能鑒定以及進一步開展家族性生長激素缺乏癥遺傳篩查、基因治療提供指導,有利于GHD兒童改善成年終身高。
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【學位授予單位】：浙江大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R725.8

【參考文獻】

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1 陳翠敏;府偉靈;張曉莉;;應用微衛(wèi)星多態(tài)位點對X連鎖型視網膜色素變性疾病進行遺傳連鎖分析的研究[J];重慶醫(yī)學;2006年06期

2 朱靜;張曉莉;府偉靈;趙紅霞;張峰;賈若愚;李新;;1例X連鎖型視網膜色素變性家系的分子遺傳學研究[J];第三軍醫(yī)大學學報;2008年10期

3 曹君;霍雅鵬;杜楊;張宇婷;萬冬梅;;微衛(wèi)星DNA在親權關系鑒定中的應用[J];遼寧大學學報(自然科學版);2010年02期

4 董治亞,王偉,陸國強,倪繼紅,陳鳳生,王德芬;家族性矮小癥GH1基因突變的檢測[J];上海第二醫(yī)科大學學報;2002年06期

5 蔣志戎,聶慧玲,徐麗慧,高雁翎,曾畿生,王德芬;單純性生長激素缺乏癥I_A型患者GH_1基因缺失位點的研究[J];中華醫(yī)學遺傳學雜志;1997年04期

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本文編號：2442193