【摘要】：目的通過研究不同劑量重組人促紅細胞生成素(RhEPO)對新生大鼠缺氧缺血性腦損傷(HIBD)后腦組織中水通道蛋白4(AQP-4)的影響,以探討EPO的神經(jīng)保護作用。 方法選取7日齡SD大鼠100例,隨機分為假手術(shù)組(20例)、對照組(20例)、RhEPO治療組[低劑量組(20例)、中劑量組(20例)、高劑量組(20例)]。假手術(shù)組僅分離右頸總動脈,不予結(jié)扎,不缺氧缺血不給予藥物。RhEPO治療組和對照組分離右頸總動脈結(jié)扎,后置8%氧氣2h制備新生大鼠HIBD模型。于模型建立后立即對低劑量組、中劑量組、高劑量組腹腔注射不同劑量的RhEPO1000IU/kg、2500IU/kg、5000IU/kg,隔日1次,連續(xù)4次,對照組和假手術(shù)組腹腔注射等體積的0.9%鹽水。每組隨機取10例于模型建立后3d、7d兩個時間點處死。HE染色觀察腦組織病理形態(tài)學變化并應用免疫組織化學方法和計算機圖像分析技術(shù)檢測腦組織中AQP-4陽性細胞數(shù)變化。 結(jié)果1.與對照組相比,3d時RhEPO治療組AQP-4陽性細胞數(shù)明顯減少(26.6±4.67、36.6±3.97、20.8±7.9、23.0±9.6,P0.05),中劑量和高劑量組較低劑量組AQP-4陽性細胞數(shù)明顯減少(P0.05)。對照組較假手術(shù)組AQP-4陽性細胞數(shù)明顯增多(P0.05)。2.與對照組相比,7d時中劑量組、高劑量組AQP-4陽性細胞數(shù)仍明顯減少(33.2±4.38、25.6±7.63,P0.05),高劑量組較中劑量組、中劑量組較低劑量組AQP-4陽性細胞數(shù)明顯減少(P0.05),各組AQP-4陽性細胞數(shù)均較假手術(shù)組明顯增高(P0.05)。3.HE染色顯示模型建立后3d時對照組和RhEPO治療組右側(cè)腦組織出現(xiàn)神經(jīng)元腫脹、變性、凋亡和壞死,至7d時病理變化減輕,但相同時間RhEPO治療組右側(cè)腦組織細胞水腫、變性、凋亡和壞死均較對照組減輕。與低劑量組大腦皮質(zhì)和海馬區(qū)病理改變相比較,中劑量組和高劑量組錐體細胞層次較多,細胞邊界較清楚,出現(xiàn)壞死及凋亡的數(shù)量明顯減少。假手術(shù)組兩側(cè)和對照組左側(cè)腦組織結(jié)構(gòu)無異常病理改變。 結(jié)論新生大鼠在HIBD后腦組織中AQP-4表達明顯增加,與HIBD后腦水腫嚴重程度密切相關(guān)。RhEPO可下調(diào)HIBD新生大鼠AQP-4蛋白的表達,從而有效的減輕腦水腫,發(fā)揮神經(jīng)保護作用。RhEPO神經(jīng)保護作用存在劑量依賴效應,2500IU/kg和5000IU/kg較1000IU/kgRhEPO減輕腦水腫的作用更明顯。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of recombinant human erythropoietin (RhEPO) at different doses on the expression of aquaporin-4 (AQP-4) in brain tissue after hypoxic-ischemic brain injury (HIBD) in neonatal rats and to explore the neuroprotective effect of EPO. Methods 100 7-day-old SD rats were randomly divided into sham operation group (n = 20) and control group (n = 20) [low dose group (n = 20), middle dose group (n = 20), high dose group (n = 20)]. In the sham-operated group, the right common carotid artery was isolated, without ligation, no hypoxia and ischemia, and the right common carotid artery was ligated in the RhEPO treatment group and the control group. The neonatal rat HIBD model was induced by 8% oxygen for 2 h after the ligation of the right common carotid artery. Immediately after the establishment of the model, intraperitoneal injection of different doses of RhEPO1000IU/kg,2500IU/kg,5000IU/kg, was given once every other day to low dose group, middle dose group and high dose group, and 0.9% saline was injected intraperitoneally in control group and sham operation group. Ten patients in each group were killed at two time points 3 days after the establishment of the model. The pathological changes of brain tissue were observed by HE staining and the changes of AQP-4 positive cells in brain tissue were detected by immunohistochemical method and computer image analysis technique. Result 1. Compared with the control group, the number of AQP-4 positive cells in the RhEPO treatment group was significantly lower than that in the control group (26.6 鹵4.67) (26.6 鹵4.67 鹵36.6 鹵3.97,20.8 鹵7.9 鹵23.0 鹵9.6 (P0.05). The number of AQP-4 positive cells in middle and high dose groups was significantly lower than that in low dose groups (P0.05). The number of AQP-4 positive cells in the control group was significantly higher than that in the sham operation group (P0.05). Compared with the control group, the number of AQP-4 positive cells in the high dose group was significantly lower than that in the control group at 7 days (33.2 鹵4.38 鹵25.6 鹵7.63 P 0.05), and the number of AQP-4 positive cells in the high dose group was significantly lower than that in the middle dose group. The number of AQP-4 positive cells in middle dose group was significantly lower than that in low dose group (P0.05). The number of AQP-4 positive cells in each group was significantly higher than that in sham-operated group (P0.05). 3.HE staining showed that neurons swelling, degeneration, apoptosis and necrosis appeared in the right brain tissue of the control group and RhEPO treatment group 3 days after the establishment of the model. At the 7th day, the pathological changes were alleviated, but the edema, degeneration, apoptosis and necrosis of the right brain tissue in the RhEPO treatment group were less than those in the control group at the same time. Compared with the pathological changes of cerebral cortex and hippocampus in the low dose group, the pyramidal cells in the middle dose group and the high dose group were more stratified, the cell boundary was clear, the number of necrosis and apoptosis was significantly decreased. There were no abnormal pathological changes in both sides of the sham operation group and the control group. Conclusion the expression of AQP-4 in the brain tissue of neonatal rats after HIBD is significantly increased, which is closely related to the severity of cerebral edema after HIBD. RhEPO can down-regulate the expression of AQP-4 protein in HIBD neonatal rats, thereby effectively attenuating brain edema. The neuroprotective effects of RhEPO were dose-dependent and 2500IU/kg and 5000IU/kg were more effective than 1000IU/kgRhEPO in alleviating brain edema.
【學位授予單位】：青島大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R722.19

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 胡科;楊繼元;;水通道蛋白1與腫瘤[J];微循環(huán)學雜志;2011年03期

2 劉洋;王月蘭;宋秀梅;;聚乙烯亞胺介導水通道蛋白5基因表達載體體外轉(zhuǎn)染的研究[J];山東大學學報(醫(yī)學版);2011年08期

3 呂鎮(zhèn)東;華明鋒;;春眠為何不覺曉[J];食品與健康;1999年04期

4 邱曉明;王弘;饒德利;;腦內(nèi)型表皮樣囊腫的CT和MRI診斷[J];臨床放射學雜志;2011年07期

5 朱建國;吳玫;劉亞男;趙丹;;水通道蛋白1和3在小鼠前列腺組織的表達及意義[J];中華男科學雜志;2011年06期

6 王懷穎;石少慧;張晶晶;張悅;史建紅;;四君子湯對衰老小鼠腦組織caspase-3表達及活性的影響[J];中國老年學雜志;2011年15期

7 譚美蕓;高俊英;丁炯;肖明;;水通道蛋白1在小鼠口腔粘膜表達與分布[J];解剖科學進展;2011年05期

8 張亮;孫香蕾;雷蕾;李鋒;吳昌歸;;吸煙大鼠肺臟AQP4和MUC5AC的表達及其與一氧化氮的關(guān)系[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學進展;2011年13期

9 史永華;陳銳;拉萊·蘇祖克;;AQP1和AQP8在子宮頸癌中的表達研究[J];臨床與實驗病理學雜志;2011年08期

10 吳燕川;李堯華;謝勝男;李昕;于順;何士大;;液相色譜法測定小鼠腦組織中ATP、ADP及AMP含量[J];首都醫(yī)科大學學報;2011年04期

相關(guān)會議論文 前10條

1 陳英輝;趙永波;劉文文;馬愛梅;;藥物難治性癲癇患者腦內(nèi)水通道蛋白-4基因的表達研究[A];第十一屆全國神經(jīng)病學學術(shù)會議論文匯編[C];2008年

2 路楊;師忠芳;韓明;袁芳;;谷氨酸引起星形膠質(zhì)細胞體積增加及水通道蛋白4表達動態(tài)變化[A];中國病理生理學會第九屆全國代表大會及學術(shù)會議論文摘要[C];2010年

3 潘建;黃衛(wèi)東;;精氨酸加壓素、水通道蛋白-4與腦水腫[A];2007年浙江省急診醫(yī)學學術(shù)年會論文匯編[C];2007年

4 何洋;劉廣志;高旭光;;水通道蛋白-4抗體與自身免疫病[A];中華醫(yī)學會第十三次全國神經(jīng)病學學術(shù)會議論文匯編[C];2010年

5 孟慶霞;徐晨明;黃荷鳳;;控制性超排卵對小鼠卵母細胞表達水通道蛋白(AQP3)影響的研究[A];2005年浙江省婦產(chǎn)科學暨計劃生育學術(shù)會議論文匯編[C];2005年

6 楊建華;石一復;陳曉端;陳曉飛;;水通道蛋白-1與微血管密度與卵巢上皮性腫瘤的相關(guān)研究[A];第八次全國婦產(chǎn)科學學術(shù)會議論文匯編[C];2004年

7 陳生曉;任昊;劉鄭榮;劉宏發(fā);;腹透液對大鼠腹膜間皮細胞水通道蛋白1表達的影響[A];中華醫(yī)學會腎臟病學分會2006年學術(shù)年會論文集[C];2006年

8 張愛麗;Zohra Zaknrou F;李江;王妍青;李曉萌;;水通道蛋白1在肝癌細胞增殖和遷徙過程中的作用的分子機制研究[A];吉林省第六屆生命科學大型學術(shù)報告會論文集[C];2008年

9 才麗平;梁瀟;夏淑杰;林庶茹;杜松;;哺乳動物水通道蛋白家族成員-AQP8[A];中國解剖學會第八屆組織學與胚胎學專業(yè)青年研討會論文集[C];2004年

10 于紫燕;張勁松;;水通道蛋白—1mRNA在人晶狀體上皮細胞中表達[A];中華醫(yī)學會第十二屆全國眼科學術(shù)大會論文匯編[C];2007年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 方陵生　編譯;修復受損腦組織[N];文匯報;2009年

2 記者 陳怡;樂感·語感·腦組織[N];上�？萍紙�;2010年

3 王振坤;浸泡腦組織之水[N];家庭醫(yī)生報;2007年

4 記者 楊霞　周婷玉;專家認為:無證據(jù)表明甲流直接侵害腦組織[N];新華每日電訊;2009年

5 夏洪平 譯;SARS病毒能夠感染腦組織[N];健康報;2005年

6 薛連璧邋朱麗麗;緩解臨考疲勞慎吸氧[N];健康報;2007年

7 李建生；劉敬霞；梁生旺;大黃可影響相關(guān)基因保護腦組織[N];中國醫(yī)藥報;2005年

8 徐欣;井穴放血治中風[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報;2006年

9 仇倩;發(fā)生顱骨骨折勿盲目處理[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報;2006年

10 江 波;切莫輕視體內(nèi)缺氧[N];中國中醫(yī)藥報;2006年

相關(guān)博士學位論文 前10條

1 胡華;人腦外傷和腫瘤周圍水腫的分子調(diào)節(jié)：5-脂氧酶/半胱氨酰白三烯受體與水通道蛋白4（AQP4）的關(guān)系[D];浙江大學;2005年

2 陳學軍;水通道蛋白在卵巢上皮性癌中的表達及對細胞順鉑敏感性的影響[D];浙江大學;2010年

3 朱漢yN;椒苯酮胺對大鼠腦缺血再灌注損傷的保護作用及機制研究[D];南方醫(yī)科大學;2011年

4 姜永軍;經(jīng)鼻給予腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子治療大鼠缺血性腦卒中[D];南京大學;2012年

5 羿菲;水通道蛋白AQP5在小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞分化中的功能研究[D];東北師范大學;2012年

6 楚燕飛;AQP4在顱腦爆炸傷后腦水腫發(fā)生機制中的作用研究[D];第三軍醫(yī)大學;2005年

7 張穎;麻瘋樹水通道蛋白JcPIP2的分離、基因克隆及功能鑒定與調(diào)控分析[D];四川大學;2007年

8 王小紅;依達拉奉對重癥急性胰腺炎大鼠腦損傷保護作用的實驗研究[D];蘇州大學;2010年

9 張剛;水通道蛋白1、3在小鼠前列腺中的表達及意義[D];吉林大學;2011年

10 鮑峰;星形膠質(zhì)細胞水通道蛋白4（AQP-4）敲除對脊髓傷害性信息的調(diào)制作用[D];復旦大學;2010年

相關(guān)碩士學位論文 前10條

1 孫文江;高壓氧治療兔腦爆炸傷后AQP4的表達及PWI的時相性研究[D];安徽醫(yī)科大學;2011年

2 孫弦;難治性癲癇患者顳葉皮層水通道蛋白4的表達情況[D];山東大學;2009年

3 程文剛;大鼠顱腦損傷時水通道蛋白4基因表達的實驗研究[D];山西醫(yī)科大學;2008年

4 廖承德;肝功能衰竭大鼠腦水通道蛋白-4表達與MR DWI的相關(guān)性研究[D];昆明醫(yī)學院;2005年

5 王志強;水通道蛋白及血管內(nèi)皮細胞生長因子在人腦膠質(zhì)瘤中的表達及意義[D];河北醫(yī)科大學;2005年

6 趙彬;水通道蛋白在人腦轉(zhuǎn)移瘤中的表達分析[D];吉林大學;2007年

7 杜寧;低氧腦水腫時腦血管內(nèi)皮細胞和星形膠質(zhì)細胞VEGF和AQPs基因和蛋白表達的變化[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2005年

8 康翠琴;水通道蛋白在人和小鼠喉組織中的表達[D];東北師范大學;2009年

9 張迷;蠟梅水通道蛋白基因CpAQP1和CpAQP2的克隆及功能初步分析[D];西南大學;2010年

10 雷霏;實驗性變應性鼻炎大鼠鼻粘膜水通道蛋白5的表達及意義[D];吉林大學;2005年

，

本文編號：2354360