發(fā)布時間：2018-10-30 13:38

【摘要】：背景 隨著產科技術的不斷提高及新生兒重癥監(jiān)護的廣泛推廣,越來越多的早產兒得以存活,然而,早產兒腦損傷的發(fā)病率也隨之提高。腦組織發(fā)育的不成熟性及易損性是早產兒腦損傷發(fā)生的根本原因,腦室周圍白質軟化(periventricular leukomalacia, PVL)是早產兒腦損傷的重要表現形式之一,并可導致腦性癱瘓、癲癇、精神發(fā)育遲緩、認知障礙等嚴重的神經系統(tǒng)后遺型。早產兒腦損傷不僅嚴重地影響患兒的生命質量,而且使患兒家庭備受精神和經濟的雙重折磨。因此,提高早產兒腦損傷的早期診斷,并采取行之有效的早期干預措施極其重要。如何通過早期干預來減少早產兒腦損傷后遺癥的發(fā)生率已成為眾多臨床醫(yī)生及科研人員的探索焦點。 目的 頭皮位點藥物注射(Scalp Sites of Medicine Injection)是治療腦損傷的有效方式之一,但其在早產兒腦損傷中的療效有待進一步研究,其作用機制目前亦不明確。本實驗旨在通過成功建立宮內感染早產鼠的動物模型,并檢測干預前后腦組織中髓鞘堿性蛋白(myelin basic protein, MBP)、神經元特異性烯醇化酶(neuron specific enolase, NSE)、膠質纖維酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein, GFAP)的表達,及評價對神經行為學的影響,來探討頭皮位點藥物注射對宮內感染早產鼠的腦保護作用及相關的作用機制,為頭皮位點藥物注射治療早產兒腦損傷提供相關的理論依據。 材料與方法 清潔級Wistar大鼠,雌性(約90日齡,體重250±20g)50只,雄性(約90日齡,體重280±20g)25只,于17：00按雌雄比2：1合籠,次日晨8：00取陰道分泌物涂片鏡檢,以檢測到精子為受孕第0天。隨機選取37只孕鼠于孕16d、17d腹腔注射脂多糖(lipopolysaccharide, LPS),劑量為350μg.Kg-1,制備宮內感染模型,5只對照組孕鼠腹腔注射同等容積的9g.L-1鹽水。其中,孕22d前分娩的仔鼠為早產鼠。 將LPS組早產鼠隨機分為三組：A組：于生后第7d始給予頭皮位點藥物注射(VitB1、VitB12)進行干預治療；B組：于生后第7d始給予豐富的環(huán)境干預；C組：不予任何干預。各組仔鼠于生后第7d,25d分別通過免疫組織化學染色檢測腦組織MBP、NSE、GFAP蛋白的陽性表達,并于生后第25d進行神經行為學檢測。 所有數據均采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學分析,實驗數據結果以χ±S表示,各組數據分別采用t檢驗,單因素方差分析,兩兩比較采用LSD-t檢驗,以a=0.05為檢驗水準。 結果 1HE染色結果 LPS組共有14只孕鼠孕22d前分娩,為早產鼠,取其胎盤組織進行HE染色,可見胎盤組織明顯充血水腫,并有大量中性粒細胞浸潤；9g.L-1鹽水組5只母鼠所產仔鼠均為足月鼠,胎盤組織HE染色未見血管充血及炎癥反應。 2免疫組化結果 7日齡LPS組早產仔鼠腦組織中MBP蛋白的表達低于對照組(P0.01),NSE蛋白的表達明顯低于對照組(P0.05),海馬齒狀回及大腦皮質GFAP陽性細胞數目均高于對照組(P0.05；P0.05)；25日齡仔鼠中,腦組織MBP表達A組高于C組(P0.01),B組高于C組(P0.01),NSE表達A組高于C組(P0.01),B組高于C組(P0.01),GFAP陽性細胞數目海馬齒狀回B組C組(P0.05),大腦皮質A組C組(P0.05),B組C組(P0.01),差異均具有統(tǒng)計學意義。 3行為學檢測結果 懸吊試驗得分：A組高于C組(P0.01),B組高于C組(P0.01);曠野試驗得分：A組及B組均高于C組(P0.01；P0.01),斜坡實驗中B組實驗時間最短,A組所用時間明顯短于C組(P0.01),差異均具有統(tǒng)計學意義。 結論 1.宮內感染脂多糖可成功誘發(fā)孕鼠早產。 2.頭皮位點藥物注射對宮內感染早產鼠具有腦保護作用。 3.頭皮位點藥物注射腦保護作用機制為通過增加腦組織中MBP、NSE蛋白的表達及抑制GFAP的過度表達發(fā)揮腦保護作用。
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【學位授予單位】：鄭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2012
【分類號】：R722.6

【參考文獻】

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本文編號：2300153