發(fā)布時(shí)間：2018-05-11 17:09

  本文選題：兒童系統(tǒng)性紅斑狼瘡 + 淋巴細(xì)胞亞群�。� 參考：《重慶醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：第一部分兒童系統(tǒng)性紅斑狼瘡淋巴細(xì)胞亞群分析目的:分析系統(tǒng)性紅斑狼瘡患兒在不同疾病時(shí)期,淋巴細(xì)胞亞群數(shù)量變化情況。探討淋巴細(xì)胞亞群在兒童系統(tǒng)性紅斑狼瘡發(fā)病與疾病轉(zhuǎn)歸的關(guān)系,為患兒早期診斷和及時(shí)干預(yù)治療提供線索。方法:2015年3月至2016年12月,收集到我院就診的29例系統(tǒng)性紅斑狼瘡患兒外周血(女:男=6.5:1),分為初發(fā)組15例,穩(wěn)定組14例,同齡健康兒童15例。采用流式細(xì)胞術(shù)(Flow cytometry)檢測不同疾病時(shí)期下的SLE患兒外周血中主要淋巴亞群(T、B和NK細(xì)胞)及T、B細(xì)胞部分亞群比例及數(shù)量變化。以及γδT細(xì)胞,Tfh細(xì)胞,Treg細(xì)胞亞群比例的變化。結(jié)果:穩(wěn)定組SLE患兒CD3+T細(xì)胞的比例及絕對數(shù)均高于對照組及初發(fā)組;同時(shí),初發(fā)組CD3+T細(xì)胞的比例及絕對值低于對照組;穩(wěn)定組患兒CD8+T細(xì)胞的比例及絕對值均高于初發(fā)組;初發(fā)組B細(xì)胞的比例高于對照組及穩(wěn)定組;其他細(xì)胞亞群絕對數(shù)三組間無明顯差異。穩(wěn)定組患兒CD4+EM細(xì)胞比例明顯高于初發(fā)組及正常對照,其CD4+Naive絕對值低于對照組,其余Th細(xì)胞亞群比例及絕對數(shù)無明顯差異。穩(wěn)定組患兒CD8+TEMRA比例及絕對值均高于對照組,初發(fā)組患兒CD8+Naive絕對值低于正常組,其余CD8+T細(xì)胞亞群比例及絕對值三組間無明顯差異。穩(wěn)定期患兒Na?ve細(xì)胞百分比及絕對值均低于初發(fā)組及正常對照組,其余B細(xì)胞亞群比例及絕對數(shù)在三組間無明顯差異。初發(fā)組SLE患兒與穩(wěn)定組SLE患兒γδT比例均顯著低于對照組。SLE患兒Tfh細(xì)胞比例,ICOS及PD-1在Tfh中比例均明顯低于對照組。初發(fā)組與穩(wěn)定組患兒非抑制性Treg(non-Treg)細(xì)胞比例均明顯高于正常對照,初發(fā)組患兒活化Treg(a Treg)細(xì)胞比例高于穩(wěn)定組及對照組。靜息期Treg三組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異結(jié)論:SLE患兒外周血淋巴亞群比例失調(diào),同時(shí)伴有部分Tc、Th及B細(xì)胞亞群的比例變化,提示免疫細(xì)胞比例和或絕對數(shù)量的紊亂可能是參與SLE的發(fā)病。其中SLE患兒γδT細(xì)胞明顯下降,提示了γδT在其發(fā)病中可能有重要作用。此外,非抑制性Treg(non-Treg)細(xì)胞比明顯高于正常對照,可能提示導(dǎo)致患兒免疫抑制能力的下降,進(jìn)而出現(xiàn)免疫過激狀態(tài),導(dǎo)致了疾病發(fā)生或進(jìn)展。最后,穩(wěn)定組患兒c Tfh細(xì)胞數(shù)量的下降提示Tfh細(xì)胞可能作為反映治療效果的一項(xiàng)臨床指標(biāo),用以評估患兒的疾病轉(zhuǎn)歸及預(yù)后。第二部分WAS蛋白缺陷導(dǎo)致Tfh固有缺陷的研究目的:前期我們的研究發(fā)現(xiàn)WASp缺陷時(shí)人及基因敲除小鼠的Tfh細(xì)胞數(shù)量和功能出現(xiàn)明顯缺陷,但該Tfh缺陷是由于T細(xì)胞發(fā)育的自身因素所致還是在Tfh發(fā)育分化中其他細(xì)胞的外在影響所致并不清楚。本研究旨在通過骨髓嵌合鼠動物模型,明確WASKO小鼠Tfh細(xì)胞的減少是否為WASp缺陷引起的固有缺陷,進(jìn)一步對該病的發(fā)病機(jī)制進(jìn)行探討,最終為WAS患兒的臨床治療提供新的可能的方向。方法:將表達(dá)CD45.2的WASKO小鼠/WT小鼠骨髓細(xì)胞與表達(dá)CD45.1的WT小鼠的骨髓細(xì)胞按照1:1等比例混合后移植給經(jīng)致死劑量輻照后的CD45.1的WT小鼠,建立骨髓嵌合鼠動物模型。移植8周干細(xì)胞重建成功后,用NP-KLH免疫部分小鼠,2周后檢測受體小鼠CD45.2陽性的Tfh細(xì)胞比例,ICOS+Tfh細(xì)胞比例,PD-1+Tfh細(xì)胞比例,以及Tfh細(xì)胞增殖和凋亡情況。結(jié)果:移植成功的骨髓嵌合鼠,免疫前后WASKO組CD45.2+Tfh細(xì)胞比例與對照組相比明顯下降,同時(shí)ICOS+Tfh細(xì)胞比例及PD-1+Tfh細(xì)胞比例也明顯下降,同時(shí)Tfh細(xì)胞的增殖水平降低,凋亡增加。結(jié)論:本研究發(fā)現(xiàn)WAS蛋白缺陷時(shí),WASKO小鼠Tfh細(xì)胞有明顯減少,表現(xiàn)為Tfh細(xì)胞增殖能力減弱,凋亡增多。以上發(fā)現(xiàn)提示,WAS蛋白缺陷時(shí),Tfh細(xì)胞存在固有的缺陷,WASp與Tfh的產(chǎn)生有著密切關(guān)系。
[Abstract]:The proportion and absolute value of CD3 + T cells in children with SLE were significantly lower than those in control group . 鍓嶆湡鎴戜滑鐨勭爺絀跺彂鐜癢ASp緙洪櫡鏃朵漢鍙?qiáng)鍩哄洜鏁查櫎灏忛紶鐨凾fh緇嗚優(yōu)鏁伴噺鍜屽姛鑳藉嚭鐜版槑鏄劇己闄，

本文編號：1874829