本文選題：Lowe綜合征 + OCRL��； 參考：《大連醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：第一部分Lowe綜合征八例臨床及基因分析目的分析和總結(jié)我院就診的8例符合Lowe綜合征臨床診斷的患兒的臨床表現(xiàn)及基因型特征,旨在提高對(duì)該疾病的認(rèn)識(shí)。方法選擇我院2011年11月至2016年6月份收治的臨床診斷為L(zhǎng)owe綜合征的8例患兒,回顧性總結(jié)、分析這些患兒的臨床表現(xiàn)、實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果以及基因檢測(cè)結(jié)果。結(jié)果該8例患兒均為男孩,均以先天性白內(nèi)障為首發(fā)癥狀,但至發(fā)現(xiàn)尿檢異常及確診為L(zhǎng)owe綜合征的時(shí)間間隔較長(zhǎng),為1~44月,平均(16.5±17.1)月。8例患兒除了眼部病變外,均合并有肌張力減退、運(yùn)動(dòng)發(fā)育遲緩、小分子蛋白尿和高鈣尿的表現(xiàn),都伴有生長(zhǎng)發(fā)育落后的癥狀;除了上述這些表現(xiàn)外,2/8(2例)的患兒合并嚴(yán)重的先天性青光眼,7/8(7例)合并智力下降,2/8(2例)合并行為障礙表現(xiàn),2/8(2例)合并驚厥表現(xiàn),6/8(6例)頭顱MRI結(jié)果顯示異常,6/8(6例)合并氨基酸尿,2/8(2例)合并腎小管酸中毒表現(xiàn),1/8(1例)合并低鉀血癥,2/8(2例)合并佝僂病表現(xiàn),5/8(5例)合并骨質(zhì)缺乏,2/8(2例)合并面部畸形。其中7例通過(guò)外顯子捕獲-第二代測(cè)序法行基因測(cè)序,檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)6例患兒存在OCRL基因突變,分別為R361G、L423W、Q388P、N373I、R695X及I366N,包括5個(gè)錯(cuò)義突變及1個(gè)無(wú)義突變;1例患兒未檢出OCRL基因突變,但卻發(fā)現(xiàn)存在SLC4A1基因c.16-15GA位點(diǎn)的雜合突變;除R695X外,均為之前未報(bào)到過(guò)的新突變。結(jié)論1.Lowe綜合征患兒表現(xiàn)為以眼睛、神經(jīng)系統(tǒng)、腎臟異常為主的多系統(tǒng)的病變。2.患兒多以先天性白內(nèi)障等眼部病變?yōu)槭装l(fā)表現(xiàn),但至發(fā)現(xiàn)尿檢異常并確診Lowe綜合征的間隔時(shí)間較長(zhǎng),因而提早確診時(shí)間對(duì)患兒的診治方面可能有重要的意義。3.部分臨床表現(xiàn)為L(zhǎng)owe綜合征的患兒未檢出合并OCRL基因突變,故推測(cè)OCRL可能不是導(dǎo)致Lowe綜合征的唯一致病基因。第二部分CLCN5突變基因轉(zhuǎn)染293細(xì)胞實(shí)驗(yàn)?zāi)康奈以航陙?lái)收治了多例Dent病患兒,掌握了Dent病的診治方法,現(xiàn)已知該病為一種伴X隱性遺傳病,多數(shù)患兒由CLCN5基因突變致病,但目前發(fā)病機(jī)制仍不十分明確。在診治過(guò)程中我們也發(fā)現(xiàn)2例CLCN5基因突變的Dent病患兒的表型及基因突變各不相同,1例尿蛋白水平相對(duì)不高,另1例則表現(xiàn)為大量蛋白尿,基因檢測(cè)結(jié)果分別為CLCN5基因的IVS3-2AG及L594fsX595突變。為進(jìn)一步研究Dent病的發(fā)病機(jī)制,我們?cè)O(shè)計(jì)了一個(gè)實(shí)驗(yàn)來(lái)探索這兩個(gè)突變基因所導(dǎo)致的突變效應(yīng),并在前期工作中合成了含這兩個(gè)突變基因的質(zhì)粒。方法利用SYBR染料法將含有2個(gè)CLCN5突變基因IVS3-2AG和L594fsX595及CLCN5野生型基因的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至293細(xì)胞中,取這些細(xì)胞中目的基因Megalin、Cubilin、NHE3、V-H+-ATPase的mRNA,反轉(zhuǎn)錄為DNA,通過(guò)QPCR技術(shù)擴(kuò)增并檢測(cè)這4個(gè)目的基因的相對(duì)表達(dá)量。將含有2個(gè)突變基因的293細(xì)胞中上述4個(gè)目的基因的相對(duì)表達(dá)量分別與含CLCN5野生型基因的293細(xì)胞中的作對(duì)比,從而初步推斷基因的突變效應(yīng)。結(jié)果含有野生型CLCN5基因及IVS3-2AG、L594fsX595突變基因的質(zhì)粒成功轉(zhuǎn)染至293細(xì)胞中。含IVS3-2AG突變基因的293細(xì)胞中Megalin、Cubilin、NHE3、V-H+-ATPase基因的相對(duì)表達(dá)量與野生型相比無(wú)明顯差別,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);而含L594fsX595突變基因的293細(xì)胞中Megalin和V-H+-ATPase基因的相對(duì)表達(dá)量減少,與野生型對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),而Cubilin和V-H+-ATPase基因的相對(duì)表達(dá)量與野生型相比,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論1.野生型CLCN5及IVS3-2AG、L594fsX595突變CLCN5基因成功轉(zhuǎn)染至293細(xì)胞中。2.L594fsX595突變導(dǎo)致Megalin、V-H+-ATPase的表達(dá)量減少,可能為引起小分子蛋白尿的原因之一。
[Abstract]:The first part of Lowe syndrome: analysis of eight cases clinical analysis and gene and summarize our hospital 8 patients with clinical diagnosis of Lowe syndrome with clinical manifestations and genotype characteristics, aims to enhance the understanding of the disease. Methods select 8 patients of clinical diagnosis in our hospital from November 2011 to 2016 June were treated for Lowe syndrome the retrospective analysis of clinical manifestations, these children, laboratory results and gene detection results. Results the 8 cases were boys, with congenital cataract is the first symptom, but to find abnormal urine and diagnosed as Lowe syndrome in a longer time interval, for 1~44 months, average (16.5. 17.1).8 cases in addition to eye disease, are associated with hypotonia, motor retardation, small molecule protein and urinary calcium, are associated with growth retardation symptoms; in addition to these tables 鐜板,2/8(2渚，

本文編號(hào)：1750021