本文關(guān)鍵詞： 耐藥菌 耐藥基因 新生兒 初乳 多位點(diǎn)序列分析　出處：《廣西醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目前,抗生素在臨床、畜牧和水產(chǎn)業(yè)廣泛的使用,導(dǎo)致環(huán)境出現(xiàn)了大量的耐藥菌(ARB)。這些耐藥菌的出現(xiàn),增加了治療感染性疾病的難度,給疾病的預(yù)防和控制提出了新的挑戰(zhàn)。同時(shí),耐藥菌攜帶的耐藥基因(ARGs)會(huì)通過水平轉(zhuǎn)移的方式向其他微生物轉(zhuǎn)移,導(dǎo)致敏感菌株獲得耐藥性,加快了耐藥菌的污染擴(kuò)散。通過抗生素的作用和耐藥基因的水平轉(zhuǎn)移,當(dāng)前已經(jīng)出現(xiàn)對(duì)多種抗生素耐藥的多重耐藥菌,甚至是超級(jí)耐藥菌,對(duì)人類的健康造成重大威脅。人腸道包含著豐富的微生物菌群,對(duì)人的營養(yǎng)吸收及生理機(jī)能有著重要作用。隨著抗生素在臨床上的濫用,耐藥菌在人群中已經(jīng)普遍傳播。目前在人腸道中分離了多種耐藥菌,發(fā)現(xiàn)了上千種的耐藥基因,甚至在新生兒胎便中也發(fā)現(xiàn)了耐藥菌和耐藥基因。新生兒免疫系統(tǒng)發(fā)育還不夠完善,腸道中的耐藥菌能夠使抗生素失效,可能會(huì)導(dǎo)致新生兒感染甚至死亡。母親腸道菌可以通過淋巴及血液系統(tǒng)向子宮內(nèi)移位,因此,新生兒腸道菌群的定植開始于胎兒時(shí)期,新生兒娩出之后初乳以及環(huán)境微生物開始進(jìn)入新生兒腸道。影響新生兒菌群早期定植的環(huán)境因素主要包括羊水、初乳和醫(yī)院空氣。如果新生兒接觸的環(huán)境含有耐藥菌,那么耐藥菌就可能伴隨正常菌群定植于新生兒腸道。目前,新生兒腸道耐藥菌及耐藥基因的來源尚不清楚,因此,我們需要追溯新生兒腸道耐藥菌的來源,減少新生兒腸道耐藥菌的定植,保障新生兒的健康。為評(píng)估新生兒腸道耐藥菌及耐藥基因的來源,本研究采集了82對(duì)剖腹產(chǎn)母親樣品(羊水、初乳)和母乳喂養(yǎng)新生兒糞便樣品(第一次、第三天),同時(shí)采集了醫(yī)院病房空氣樣本12份。本研究選取了7種耐藥基因,blaTEM、ampC、mecA屬于β-內(nèi)酰胺類,aac(6’)-Ib、ermB、sul2、tetM分別屬于氨基糖苷類、大環(huán)內(nèi)酯類、磺胺類、四環(huán)素類。本研究主要從以下三個(gè)方面進(jìn)行了研究:(1)新生兒腸道糞便(第一次、第三天)及所接觸的環(huán)境樣品羊水、初乳和空氣耐藥基因的檢測(cè)和分析,(2)針對(duì)細(xì)菌16SrDNA進(jìn)行高通量測(cè)序技術(shù)分析新生兒腸道糞便(第一次、第三天)和環(huán)境樣品(羊水、初乳)菌群特點(diǎn)及關(guān)系(3)利用多位點(diǎn)序列分析(MLST)對(duì)新生兒腸道糞便和環(huán)境樣品(初乳、空氣)中表皮葡萄球菌溯源分析。本文主要結(jié)果如下:(1)新生兒第三天糞便檢測(cè)到7種耐藥基因,糞便樣品最多同時(shí)含有四種耐藥基因,占比8.5%,新生兒第一次糞便未檢測(cè)到耐藥基因。性別對(duì)新生兒腸道耐藥基因的定植沒有影響。新生兒第三天的糞便中mecA基因檢出率最高,為45.1%。blaTEM、ampC、aac(6’)-Ib、ermB、sul2、tetM的檢出率分別為25.6%、28%、22%、17.1%、29.3%、20.7%。在第三天糞便樣品中,最大值分別達(dá)到1.25×109copies/g、4.19×106copies/g、7.33×109copies/g、3.87×107copies/g、1.26×106copies/g、9.76×106copies/g、2.08×106copies/g、8.98×109copies/g。(2)初乳檢測(cè)到7種耐藥基因,初乳樣品最多同時(shí)含有四種耐藥基因,占比3.7%。病房空氣中檢測(cè)到4種,分別為ampC、mecA、ermB、tetM,羊水中未檢測(cè)到耐藥基因。初乳中mecA檢出率最高,為36.6%,與新生兒第三天糞便一致。blaTEM、ampC、aac(6’)-Ib、ermB、sul2、tetM檢出率分別為24.4%、15.9%、24.4%、17.1%、25.6%、17.1%。(3)利用配對(duì)卡方檢驗(yàn),ampC耐藥基因在糞便與母乳樣品中檢出率有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P㩳0.05),而空氣中ampC檢出率最高,達(dá)到41.7%,表明空氣是糞便ampC的重要來源。初乳和糞便中7種耐藥基因檢出結(jié)果全部有關(guān)聯(lián)(p0.05),各個(gè)耐藥基因在兩組樣品中的重合率達(dá)到39.1%-66.7%,即糞便中耐藥基因來源于初乳的可能性達(dá)到39.1%-66.7%,說明初乳中的耐藥基因通過喂食新生兒有很大一部分隨著耐藥菌在腸道內(nèi)定植下來。(4)新生兒腸道菌群和環(huán)境菌群(羊水、初乳)有較大的重合。母親羊水和新生兒第一次糞便雖未檢測(cè)到可培養(yǎng)的微生物,但是通過高通量測(cè)序技術(shù),鹽單胞菌屬、希瓦氏菌屬、弧菌屬為其三大優(yōu)勢(shì)菌屬。初乳中鹽單胞菌、鏈球菌、葡萄球菌屬為三大優(yōu)勢(shì)菌。新生兒第三天糞便三大優(yōu)勢(shì)菌為不動(dòng)桿菌,梭菌和鹽單胞菌。羊水和新生兒第一次糞便菌群類似,二者的微生物菌群結(jié)構(gòu)并無差異(P㧐0.05),新生兒腸道菌群在胎兒時(shí)期便已經(jīng)開始定植。在新生兒娩出后,母體初乳、第一次糞便和第三天糞便菌群結(jié)構(gòu)有差異(P㩳0.05)�？梢哉J(rèn)為初乳和羊水共同對(duì)新生兒腸道菌群的定植有重要影響,間接說明初乳和羊水耐藥基因可能對(duì)新生兒腸道的垂直傳播。(5)新生兒第三天糞便和對(duì)應(yīng)初乳分離的表皮葡萄球菌具有較高的同源率。通過多位點(diǎn)序列分析,兩種來源的表皮葡萄球菌序列一致性達(dá)到63.4%,其中ST2型為分離最多的型別,達(dá)到34.6%。每一對(duì)表皮葡萄球菌耐藥情況和耐藥基因攜帶情況均一致,分別為同一菌株�？諝鈦碓吹谋砥て咸亚蚓蛄兄杏腥闟T2型菌株分別與3株糞便來源的表皮葡萄球菌是同一菌株,并且耐藥基因攜帶情況一致,說明新生兒糞便耐藥基因既來自于初乳也來源于空氣。綜上所述,新生兒腸道的菌群定植在胎兒時(shí)期就已經(jīng)開始,新生兒在與外界環(huán)境的接觸的過程中,初乳對(duì)腸道內(nèi)耐藥菌的定植有很大影響,同時(shí)醫(yī)院病房的空氣中飄散的耐藥菌對(duì)新生兒耐藥菌的定植也有潛在作用。因此,我們應(yīng)通過從源頭上規(guī)范抗生素的使用,減少耐藥菌在環(huán)境中的擴(kuò)散,來消除耐藥菌給孩子帶來的健康威脅。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號(hào)】：R722.1

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 徐軍;克丙申;齊法蓮;陳英劍;羅南萍;;核酸序列測(cè)定技術(shù)分析HBV耐藥基因與亞型鑒定[J];放射免疫學(xué)雜志;2007年02期

2 夏成靜;陸學(xué)東;黃烈;劉鍵;楊來智;王瓊;;MRFQ SYBR Green I-PCR結(jié)合融解曲線快速檢測(cè)產(chǎn)ESBLs菌耐藥基因[J];中國熱帶醫(yī)學(xué);2009年02期

3 張征;孫靜娜;武艷;;耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的紅霉素耐藥基因和殺白細(xì)胞基因的檢測(cè)[J];廣東醫(yī)學(xué);2009年07期

4 黃革;周曉紅;蔣文玲;李運(yùn)雄;榮卡彬;羅憲玲;趙瑩;;多重PCR快速檢測(cè)金黃色葡萄球菌中氨基糖苷類抗生素耐藥基因及其臨床應(yīng)用[J];中國感染與化療雜志;2009年04期

5 劉軍軍;張瑋;王元蘭;王星晨;魏建忠;孫裴;李郁;;沙門菌耐藥基因多重PCR檢測(cè)方法的建立[J];中國抗生素雜志;2013年11期

6 ;抗生素新耐藥基因被捕獲[J];中國臨床康復(fù);2003年09期

7 張燕;金先慶;趙珍珍;宿玉璽;;5種耐藥基因在成人常見惡性腫瘤中的表達(dá)特點(diǎn)[J];重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2007年10期

8 ;耐藥基因可從海洋細(xì)菌進(jìn)入人體內(nèi)細(xì)菌[J];醫(yī)學(xué)研究雜志;2007年12期

9 胡慶豐;呂火祥;糜祖煌;沈蓓瓊;;泛耐藥肺炎克雷伯菌的耐藥基因研究[J];中華醫(yī)院感染學(xué)雜志;2009年13期

10 陳茶;黃彬;藍(lán)鍇;龐雪云;糜祖煌;;多藥耐藥銅綠假單胞菌β-內(nèi)酰胺類耐藥基因研究[J];中華醫(yī)院感染學(xué)雜志;2009年15期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 孔繁德;陸承平;彭海濱;徐淑菲;陳瓊;;多重PCR技術(shù)檢測(cè)沙門菌兩種四環(huán)素耐藥基因[A];第二屆全國人畜共患病學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2008年

2 石燕華;李昌崇;;肺炎鏈球菌對(duì)β-內(nèi)酰胺類及大環(huán)內(nèi)酯類抗生素耐藥基因的研究進(jìn)展[A];第六屆江浙滬兒科學(xué)術(shù)會(huì)議暨兒科學(xué)基礎(chǔ)與臨床研究進(jìn)展學(xué)術(shù)班論文匯編[C];2009年

3 金先慶;李映良;向麗;李長春;羅慶;梁紹燕;宿玉璽;鄭改煥;;五種耐藥基因在15種332例兒童惡性腫瘤組織中表達(dá)的特點(diǎn)及臨床應(yīng)用[A];中國抗癌協(xié)會(huì)第七屆全國小兒腫瘤學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2007年

4 莫非;;耐甲氧西林金黃色葡萄球菌耐藥基因及消毒劑耐藥相關(guān)基因的檢測(cè)[A];第五次全國中青年檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

5 王晶;韓麗霞;;耐亞胺培南銅綠假單胞菌的耐藥基因研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議資料匯編[C];2008年

6 王鳳玲;馮秀河;劉靜;張竟宇;;耐甲氧西林金黃色葡萄球菌耐藥基因及致病毒素基因的研究[A];第五屆全國中醫(yī)藥免疫學(xué)術(shù)研討會(huì)——暨環(huán)境·免疫與腫瘤防治綜合交叉會(huì)議論文匯編[C];2009年

7 呂火祥;麇祖煌;胡慶豐;沈蓓瓊;;泛耐藥產(chǎn)酸克雷伯菌的耐藥基因研究[A];2007年浙江省醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2007年

8 雷永良;王曉光;陳秀英;;麗水市結(jié)核分枝桿菌分離株5種耐藥基因突變特點(diǎn)分析[A];2011年浙江省醫(yī)學(xué)會(huì)醫(yī)學(xué)病毒學(xué)分會(huì)、醫(yī)學(xué)微生物與免疫學(xué)分會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2011年

9 李晨;;耐甲氧西林金黃色葡萄球菌耐藥性及耐藥基因研究[A];中國醫(yī)院協(xié)會(huì)第十四屆全國醫(yī)院感染管理學(xué)術(shù)年會(huì)資料匯編[C];2007年

10 胡紅兵;熊寶華;夏維;王軍;康世秀;;新生兒甲氧西林耐藥凝固酶陰性葡萄球菌血液感染分離株耐藥基因研究[A];第六屆全國抗菌藥物臨床藥理學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2006年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 記者 徐志勇;深圳發(fā)現(xiàn)兩個(gè)新型耐藥基因[N];廣東科技報(bào);2007年

2 王其玲 李水根;抗生素新耐藥基因被捕獲[N];健康報(bào);2003年

3 段軍軍　熊學(xué)莉;“探訪”我國第一條腫瘤耐藥基因[N];解放軍報(bào);2002年

4 本報(bào)記者 齊芳;人體腸道菌群耐藥基因研究獲新突破[N];光明日?qǐng)?bào);2013年

5 記者 鮑文娟邋通訊員 帥菲斐;深一醫(yī)生全球率先發(fā)現(xiàn)兩新耐藥基因[N];廣州日?qǐng)?bào);2007年

6 易運(yùn)文;深圳醫(yī)生全球首次發(fā)現(xiàn)耐藥基因[N];光明日?qǐng)?bào);2007年

7 陳英云 喬蕤琳;我省專家首次確立控制耐藥基因表達(dá)研究思路[N];黑龍江經(jīng)濟(jì)報(bào);2010年

8 記者 陳楓;超級(jí)細(xì)菌蔓延?實(shí)為“耐藥基因”![N];南方日?qǐng)?bào);2010年

9 記者 郭靜 通訊員 郝黎 張丹娜;肺癌耐藥基因找到了[N];廣東科技報(bào);2010年

10 張?zhí)锟?濫用抗生素讓環(huán)境幾度呻吟[N];中國綠色時(shí)報(bào);2003年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前9條

1 李德喜;惡唑烷酮類耐藥基因cfr和optrA在豬源MRSA和CoNS中流行及傳播機(jī)制的研究[D];中國農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

2 熊文廣;抗生素耐藥基因在動(dòng)物腸道中的排布和在微環(huán)境中的消減規(guī)律[D];華南農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

3 魯曦;低劑量抗生素刺激條件下耐藥基因水平傳播的機(jī)制研究[D];華南理工大學(xué);2012年

4 魯玉俠;食源微生物耐藥基因水平傳播抑制研究[D];華南理工大學(xué);2010年

5 王晶;慢性阻塞性肺疾病急性加重多中心病原及耐藥基因分子流行病學(xué)調(diào)查[D];中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2014年

6 毛錦龍;Ⅱ-Ⅲ級(jí)星型細(xì)胞瘤體外誘導(dǎo)耐藥細(xì)胞—干細(xì)胞基因及耐藥基因研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2010年

7 葉蕾;廣州市水產(chǎn)養(yǎng)殖品中耐藥共生菌分布及耐藥基因傳播機(jī)制的研究[D];華南理工大學(xué);2012年

8 瞿婷婷;多重耐藥腸球菌耐藥基因篩選及傳播機(jī)制研究[D];浙江大學(xué);2007年

9 佟盼盼;雞糞便菌耐藥基因及其產(chǎn)ESBLs大腸桿菌耐藥性的研究[D];吉林大學(xué);2015年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 何紅美;2014年石家莊地區(qū)圍產(chǎn)期婦女B族鏈球菌的耐藥性及其耐藥基因的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

2 王佳Z，

本文編號(hào)：1552825