本文關鍵詞：長春地區(qū)特發(fā)性矮小兒童SHOX基因突變檢測與分析

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【摘要】：研究目的： 特發(fā)性矮小(idiopathic short stature，，ISS)是指原因不明的身材矮小，是兒童期身材矮小的最常見原因。在最能決定兒童身高的各種因素中，遺傳因素起著主要作用。矮小同源盒基因（short stature homcobox-coniaining，SHOX）編碼蛋白作為轉錄激活因子在促進生長發(fā)育過程中起重要調控作用，SHOX基因異常與ISS有極大地相關性，且存在一定區(qū)域性差別。本研究對長春地區(qū)確診為ISS患兒進行發(fā)育相關SHOX基因突變檢測，并分析其與生長相關因子IGF-1之間的關系，為探討ISS的發(fā)病機制及對ISS患兒篩查提供一定的理論依據。 研究方法： 1．研究對象：病例組來源于2010年1月至2012年12月在長春市兒童醫(yī)院內分泌門診已確診為ISS的患者，共計209例,其中男孩130例，女孩79例。對照組來源于2010年1月至2012年12月在長春市兒童醫(yī)院健康體檢中心進行體格檢查的健康兒童,共計50例，其中男孩31例，女孩19例。 2．隨機抽取30例ISS患兒和30例正常兒童，采用酚氯仿抽提法提取全血DNA，應用聚合酶鏈反應（PCR）擴增SHOX基因外顯子2，利用測序儀對PCR產物進行測序，并與GENEBANK中SHOX基因的標準序列進行比對。 3．采用酶聯免疫吸附試驗測定研究對象血清中IGF-1水平，分別對正常對照組、SHOX異常和ISS患兒組無SHOX異常血清中的IGF-1水平進行組間兩兩比較，確定IGF-1與SHOX基因突變的關系。 實驗結果： 1．所選取的研究對象，性別和年齡構成比無統(tǒng)計學差異。 2．常規(guī)提取DNA，利用PCR擴增SHOX基因外顯子2序列，并對擴增后的產物進行鑒定。結果顯示：在目的條帶相應分子量位置擴增條帶清晰。進一步測序可見：正常對照組SHOX基因測序未發(fā)現C缺失，無堿基轉換的改變。30例ISS患兒中發(fā)現SHOX基因異常為10例（33.3%），其中8例SHOX基因存在C缺失；2例SHOX基因突變。 3．ISS患兒血清IGF-1水平明顯低于正常對照組，差別具有統(tǒng)計學意義；ISS患兒無基因突變組的血清IGF-1水平明顯低于正常對照組，差別具有統(tǒng)計學意義；ISS患兒基因突變組的血清IGF-1水平明顯低于正常對照組，差別具有統(tǒng)計學意義；ISS患兒基因突變組的血清IGF-1水平不明顯低于基因無突變組，差別不具有統(tǒng)計學意義。 結論： 1．長春地區(qū)特發(fā)性矮小患者中，存在SHOX基因突變，該突變可能是長春地區(qū)ISS患兒病因之一。 2．特發(fā)性矮小患兒中血清IGF-1水平明顯降低，IGF-1水平與特發(fā)性矮小疾病的發(fā)病相關。 3．通過對ISS患兒SHOX基因突變的檢測及其與血清IGF-1關系分析，為探討長春地區(qū)特發(fā)性矮小兒童分子生物學發(fā)病機制，進一步深入開展特發(fā)性矮小兒童基因篩查奠定基礎。
【關鍵詞】：特發(fā)性矮小 SHOX基因 基因突變 IGF-1
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：R725
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 中英文縮寫對照10-11
• 第1章 緒論11-17
• 1.1 特發(fā)性矮小簡介11-14
• 1.1.1 特發(fā)性矮小定義11
• 1.1.2 特發(fā)性矮小的病因及發(fā)病機制11-12
• 1.1.3 流行病學調查12
• 1.1.4 特發(fā)性矮小的診斷12-14
• 1.1.5 特發(fā)性矮小的治療14
• 1.2 特發(fā)性矮小與 IGF-1 和 SHOX 基因的關系14-16
• 1.2.1 特發(fā)性矮小與 IGF-1 的關系14-15
• 1.2.2 特發(fā)性矮小與 SHOX 基因的關系15-16
• 1.3 研究目的及意義16-17
• 第2章 材料與方法17-22
• 2.1 主要試劑與儀器17-18
• 2.1.1 主要試劑17
• 2.1.2 主要儀器17-18
• 2.2 研究對象18-19
• 2.2.1 研究對象18
• 2.2.2 病例納入標準18-19
• 2.2.3 病例排除標準19
• 2.2.4 實驗分組19
• 2.2.5 樣本采集19
• 2.3 SHOX 基因測序19-21
• 2.3.1 PCR 引物設計與合成19
• 2.3.2 樣本 DNA 提取19-20
• 2.3.3 PCR 擴增目的基因20
• 2.3.4 SHOX 基因測序結果分析20-21
• 2.4 血清 IGF-1 的測定21
• 2.5 統(tǒng)計學分析21
• 2.6 質量控制21-22
• 第3章 結果22-29
• 3.1 ISS 組與正常兒童對照組性別構成比較22
• 3.2 ISS 組與正常兒童對照組年齡比較22
• 3.3 PCR 擴增 SHOX 基因第 2 外顯子產物的鑒定結果22-23
• 3.4 SHOX 基因外顯子 2 PCR 擴增 DNA 測序結果23-27
• 3.5 研究對象血清 IGF-1 變化情況27-29
• 3.5.1 ISS 患兒組與正常對照組血清 IGF-1 比較結果27
• 3.5.2 ISS 患兒無基因突變組與正常對照組血清 IGF-1 比較結果27
• 3.5.3 ISS 患兒基因突變組與正常對照組血清 IGF-1 比較結果27-28
• 3.5.4 ISS 患兒基因突變組與無基因突變組血清 IGF-1 比較結果28-29
• 第4章 討論29-35
• 4.1 ISS 患兒 SHOX 基因突變情況29-33
• 4.1.1 SHOX 基因結構29-30
• 4.1.2 SHOX 基因突變與特發(fā)性矮小30-32
• 4.1.3 SHOX 基因測序對診斷 ISS 的意義32-33
• 4.2 ISS 患兒與血清 IGF-1 水平的關系33-35
• 第5章 結論35-36
• 參考文獻36-40
• 作者簡介及取得科研成果40-41
• 致謝41

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前10條

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本文編號：1008399