山羊地方性鼻內(nèi)腫瘤病毒SU蛋白的原核表達(dá)及多克隆抗體的制備
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更多相關(guān)文章: 山羊地方性鼻內(nèi)腫瘤病毒 SU蛋白 原核表達(dá) 純化 多克隆抗體
【摘要】:為獲得純化的山羊地方性鼻內(nèi)腫瘤病毒(enzootic nasal tumor virus of goats,ENTV)表面蛋白(surface protein,SU protein)和抗SU蛋白的多克隆抗體,根據(jù)Gen Bank已登錄的ENTV Shaanxi株SU基因序列,設(shè)計(jì)合成1對特異性引物,PCR擴(kuò)增SU基因并將其連接于原核表達(dá)載體p ET-28a(+)中,構(gòu)建重組質(zhì)粒p ET-28a-SU,經(jīng)鑒定正確后轉(zhuǎn)化大腸桿菌Rosetta(DE3)株進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá),并進(jìn)行SDS-PAGE分析。重組菌經(jīng)IPTG誘導(dǎo)后成功表達(dá)出分子質(zhì)量為43 ku的重組蛋白。將誘導(dǎo)表達(dá)的蛋白經(jīng)鎳柱親和層析純化、復(fù)性后免疫小鼠制備多克隆抗體。Western-blot分析結(jié)果表明,原核表達(dá)純化的SU蛋白能夠與制得的小鼠抗SU蛋白多克隆抗體特異性結(jié)合。上述結(jié)果表明,本試驗(yàn)成功獲得了純化的ENTV SU蛋白和小鼠抗ENTV SU蛋白的多克隆抗體,為進(jìn)一步研究SU蛋白在ENTV感染過程中的作用和建立診斷方法提供了材料。
【作者單位】: 西北農(nóng)林科技大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】: 山羊地方性鼻內(nèi)腫瘤病毒 SU蛋白 原核表達(dá) 純化 多克隆抗體
【基金】:陜西省農(nóng)業(yè)科技創(chuàng)新與攻關(guān)項(xiàng)目(2016NY-092) 陜西省重點(diǎn)產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新鏈項(xiàng)目(2016KTZDNY02-06) 西北農(nóng)林科技大學(xué)大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目(201610712019)
【分類號】:S852.65
【正文快照】: 山羊地方性鼻內(nèi)腫瘤病毒(enzootic nasal tumorvirus of goats,ENTV)屬于反轉(zhuǎn)錄病毒科、β反轉(zhuǎn)錄病毒屬,可引起山羊鼻內(nèi)出現(xiàn)單側(cè)或雙側(cè)性腫瘤。受感染的山羊表現(xiàn)為呼吸困難,運(yùn)動時(shí)流大量鼻液,食欲減退,消瘦,靜臥,不愿運(yùn)動,直至腫瘤堵死鼻腔無法呼吸最終死亡[1-2]。外科手術(shù)摘
【相似文獻(xiàn)】
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