本文關鍵詞：揚州地區(qū)部分屠宰場、農(nóng)貿(mào)市場和動物醫(yī)院豬源沙門菌分離鑒定、耐藥性分析及致病性研究

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【摘要】：沙門菌是一類極其重要的食源性病原菌,在嚴重威脅著畜禽產(chǎn)品的安全的同時,也給人類的健康造成了嚴重的威脅。蛋類、畜禽類動物產(chǎn)品現(xiàn)在已成為沙門菌的重要污染源,而豬肉是中國重要的肉類消費品,在中國人日常飲食的動物蛋白來源中占到近70%的比例,因而有效的控制和減少豬肉在屠宰、加工、運輸及銷售過程中細菌的污染對提升肉制品的衛(wèi)生情況和減少食品衛(wèi)生安全問題的發(fā)生有著重要的意義。本研究旨在調查揚州地區(qū)部分屠宰場的屠宰流程及農(nóng)貿(mào)市場中豬肉沙門菌的污染情況及沙門菌分離株的耐藥情況,同時根據(jù)動物醫(yī)院送檢病料中沙門菌的分離情況判斷揚州周邊地區(qū)豬源沙門菌的血清型及流行情況,為流行病學調查提供數(shù)據(jù)資料,也為周邊豬場沙門菌病的防治提供資料。1揚州地區(qū)部分屠宰場、農(nóng)貿(mào)市場及動物醫(yī)院樣品中沙門菌的分離鑒定及耐藥性分析2015年至2016年間,共從揚州某屠宰場采集樣品1358份、揚州農(nóng)貿(mào)市場采集樣品182份和揚州大學動物醫(yī)院采集樣品187份,按照GB 4789.4-2010中分離程序對采集樣品進行沙門菌分離,并結合PCR方法進行沙門菌鑒定。屠宰場樣品中沙門菌的分離率為10.5%,農(nóng)貿(mào)市場樣品中沙門菌分離率19.7%,動物醫(yī)院樣品中沙門菌的分離率為2.6%。結果分析說明季節(jié)對屠宰場和農(nóng)貿(mào)市場中沙門菌的分離率無明顯影響。對不同來源的沙門菌分離株進行血清型鑒定,屠宰場分離株中德爾卑沙門菌分離率最高(63.6%)。鼠傷寒沙門菌、羅森沙門菌也是常見的血清型；農(nóng)貿(mào)市場分離株中羅森沙門菌和德爾卑沙門菌分離率最高(27.8%),鴨沙門菌次之；而動物醫(yī)院送檢病料中的檢出的全部為鼠傷寒沙門菌(100%)。對所有分離株進行藥物敏感性測定,結果表明84.8%沙門菌分離株對四環(huán)素表現(xiàn)出極高的耐藥率,對強力霉素、羧芐西林也有較高的耐藥率。屠宰場分離株中57.4%菌株耐9種以上抗生素,農(nóng)貿(mào)市場中44.4%菌株對9種以上抗生素產(chǎn)生抗藥性,而動物醫(yī)院分離株9種以上抗生素耐藥率則高達100.0%。2屠宰場、農(nóng)貿(mào)市場及動物醫(yī)院來源的沙門菌分離株的毒力基因測定、PFGE分型分析及小鼠致病性研究為研究沙門菌分離株中毒力基因的分布,運用PCR方法對全部分離株進行mogA, sscA, sseC, mgtC, siiE, sopB毒力基因的檢測,各毒力基因檢出率分別為81.5%(150/184)、70.1%(129/184)、68.5%(126/184)、87.5%(161/171)、85.7%(158/184)、70.7%(130/184)。共有57株沙門菌含有全部6種毒力基因,占全部分離株31%,其中屠宰場來源的沙門菌有47株,占82.5%,農(nóng)貿(mào)市場來源的沙門菌有5株,占8.75%,動物醫(yī)院來源的沙門菌有5株,占8.75%。通過脈沖場凝膠電泳(pulsed-field gel electrophoresis, PFGE)分型將27株德爾卑沙門菌、9株羅森沙門菌及17株鼠傷寒沙門菌分成18、8和17個PFGE譜型(PFGE patterns, PF)。從農(nóng)貿(mào)市場中可以找到與屠宰場來源沙門菌相同的PFEG譜型。表明沙門菌可在屠宰場和農(nóng)貿(mào)市場之間傳播。選取5個分離株和1株豬霍亂沙門菌參考株(CVCC503)以109CFU的劑量腹腔注射攻毒6-8周齡KM系小鼠,死亡高峰發(fā)生于攻毒后8-12 h,且攻毒后的24 h內(nèi),各攻毒組小鼠全部死亡。剖解死亡小鼠可以觀察到小鼠組織臟器呈現(xiàn)急性敗血癥病變,且病死小鼠有嚴重的腹腔積液。LD50結果表明,6個攻毒組中JY-1攻毒組的LD5o值為1.48×105,小鼠的死亡率為52.8%,6個菌株中JY-1菌株對小鼠的致病性最強,而T4-D1菌株和參考株CVCC503的致病性相近。
【關鍵詞】：屠宰場 沙門菌 血清型 耐藥性 脈沖場凝膠電泳 致病性
【學位授予單位】：揚州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：S852.61
【目錄】：

• 摘要3-5
• Abstract5-8
• 符號說明8-9
• 沙門菌文獻綜述9-23
• 1 屠宰場中食源性沙門菌的污染現(xiàn)況9-10
• 2 農(nóng)貿(mào)市場豬肉沙門菌的污染狀況10
• 3 沙門菌的感染機制及致病性10-12
• 4 沙門菌毒力相關因子的研究12-13
• 5 沙門菌耐藥現(xiàn)狀13-14
• 6 沙門菌的分型技術14-18
• 參考文獻18-23
• 第一章 揚州地區(qū)部分屠宰場、農(nóng)貿(mào)市場以及豬源沙門菌分離株的分離鑒定及藥物敏感性分析23-42
• 1 材料23-24
• 2 方法24-28
• 3 實驗結果28-37
• 4 討論37-40
• 參考文獻40-42
• 第二章 揚州地區(qū)部分屠宰場、農(nóng)貿(mào)市場以及豬源沙門菌分離株的脈沖場分型及相關生物學特性研究42-66
• 1 材料42-44
• 2 方法44-50
• 3 實驗結果50-62
• 4 討論62-64
• 參考文獻64-66
• 全文小結66-67
• 附錄67-74
• 致謝74-75

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王晶鈺;董睿;王利勤;芮弦;陳婷;李成山;張三東;張彥明;郭抗抗;;市售鮮雞蛋中沙門氏菌的分離鑒定及毒力島基因檢測[J];食品科學;2012年16期

2 張東方;袁飛;陳穎;葛毅強;楊海榮;暴書嬋;趙勇勝;;沙門菌分子分型方法研究進展[J];中國公共衛(wèi)生;2012年01期

3 高麗娟;甕紹蘇;劉清s，

本文編號：733212