發(fā)布時間：2017-08-19 08:20

  本文關(guān)鍵詞：豬血凝性腦脊髓炎病毒重組N蛋白間接ELISA檢測方法的建立與應(yīng)用

  更多相關(guān)文章： 豬血凝性腦脊髓炎病毒 重組N蛋白 間接ELISA 血清抗體

【摘要】：為建立檢測豬血凝性腦脊髓炎病毒(porcine hemagglutinating encephalomyelitis virus,PHEV)血清抗體的間接ELISA方法,構(gòu)建了高效表達(dá)PHEV核衣殼蛋白(N)的重組質(zhì)粒(pET28a-N),Western blot檢測該重組蛋白具有較好的免疫原性。以純化的N重組蛋白作為包被抗原,通過方陣試驗確定了抗原的最適包被濃度為2mg/L,酶標(biāo)二抗的最佳稀釋倍數(shù)為1∶10 000,建立了用于PHEV抗體檢測間接ELISA方法。此外,用該法(N-ELISA)對天津市地區(qū)采集到的200份豬血清樣品進(jìn)行檢測,陽性檢出率為83.5%,與前期工作中建立的全病毒作為包被抗原的間接ELISA診斷方法 (HEV-ELISA)檢測結(jié)果的符合率為90.91%。結(jié)果表明:以重組N蛋白為包被抗原所建立的用于PHEV血清抗體檢測的方法能夠用于檢測PHEV感染及相關(guān)的流行病學(xué)調(diào)查。
【作者單位】： 吉林大學(xué)動物醫(yī)學(xué)學(xué)院;天津市動物衛(wèi)生監(jiān)督所;
【關(guān)鍵詞】： 豬血凝性腦脊髓炎病毒 重組N蛋白 間接ELISA 血清抗體
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(31272530) 國家重點研發(fā)計劃資助項目(2016YFD0500707) 吉林省青年科研基金資助項目(20160520033JH)
【分類號】：S852.65
【正文快照】： *Corresponding author,E-mail:gf86661@sohu.com豬血凝性腦脊髓炎病毒(porcine hemagglutina-ting encephalomyelitis virus,PHEV)屬于冠狀病毒科β-冠狀病毒屬成員,為不分段的單股正鏈RNA病毒,可引起仔豬發(fā)生豬血凝性腦脊髓炎(porcinehemagglutinating encephalomyelitis,PH

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本文編號：699640