本文關(guān)鍵詞：ZD制劑對小鼠軟組織損傷修復(fù)及對RAW264.7炎癥因子的影響

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【摘要】：ZD制劑是治療馬屬動物肢體軟組織損傷的經(jīng)驗方劑,在臨床應(yīng)用上取得了較好的療效。全方由乳香、沒藥、當歸、紅花等12味中藥組成,通過前期實驗表明ZD制劑具有良好的抗炎、鎮(zhèn)痛、促消腫的作用,臨床上應(yīng)用于馬屬動物軟組織損傷具有良好的治療效果。本文建立小鼠急性軟組織損傷模型和巨噬細胞炎癥模型,觀察ZD制劑分別對這兩種體內(nèi)、外模型炎癥的治療效果,確定ZD制劑的抗炎機制。健康的昆明種小鼠,隨機分為正常組、模型組、藥物對照組和實驗藥物組。除正常組外,其余各組制備軟組織損傷模型,觀察小鼠肌肉病理學(xué)改變判定造模是否成功。造模1d后開始給予患部涂抹藥物,每日2次,給藥7 d。在損傷后第2d和7d相同時間點每組隨機處取6只小鼠,以打擊部位為中心,進行肌肉取材,運用免疫組化法檢測小鼠肌肉中IL-1p、IL-6表達情況。通過脂多糖(LPS)刺激RAW264.7細胞系建立炎癥細胞模型,使用5種不同濃度的ZD制劑進行實驗,分別采用Griess反應(yīng)測定NO水平,ELISA法檢測ZD制劑干預(yù)前后上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌量。小鼠造模后,肌肉出現(xiàn)淤血、水腫等癥狀,提示造模成功。經(jīng)藥物干預(yù)后,各個給藥組小鼠的征候?qū)W和病理學(xué)有不同程度的改善。小鼠肌肉組織中IL-1β和IL-6的表達量和組織損傷程度均較模型組顯著減輕。用ZD制劑干預(yù)后,上清液中NO、TNF-α、IL-1β、IL-6含量與模型組相比均有下降。并存在劑量依賴關(guān)系。本實驗通過建立體內(nèi)軟組織損傷和體外炎癥模型,分別采用免疫組化法、Griess法和ELISA法對ZD制劑的抗炎作用進行了研究,結(jié)果表明ZD制劑的體.內(nèi)外抗炎作用是通過抑制這些炎性介質(zhì)的表達來實現(xiàn)的。
【關(guān)鍵詞】：ZD制劑 炎癥 軟組織損傷 巨噬細胞 細胞因子
【學(xué)位授予單位】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：S853.74
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-11
• 1 引言11-20
• 1.1 中藥治療軟組織損傷的研究進展11-14
• 1.1.1 當代醫(yī)學(xué)對急性軟組織損傷的治療方式11-12
• 1.1.2 中醫(yī)對急性軟組織損傷的治療方法12-14
• 1.2 炎癥14-16
• 1.2.1 炎癥介質(zhì)在炎癥過程中的作用14-15
• 1.2.2 中藥對炎癥的治療15-16
• 1.3 ZD制劑的研究概況16-18
• 1.3.1 乳香16
• 1.3.2 沒藥16-17
• 1.3.3 當歸17
• 1.3.4 紅花17-18
• 1.3.5 其他藥物18
• 1.4 研究目的、意義與內(nèi)容18-20
• 2 ZD制劑對小鼠肌肉軟組織損傷修復(fù)的影響20-26
• 2.1 材料與方法20-22
• 2.1.1 試驗動物20
• 2.1.2 主要試劑20
• 2.1.3 主要儀器20
• 2.1.4 ZD制劑的制備20
• 2.1.5 小鼠軟組織損傷造模方法20-21
• 2.1.6 小鼠的分組和治療21
• 2.1.7 樣品的采集21
• 2.1.8 實驗小鼠指標檢測21-22
• 2.2 實驗結(jié)果22-24
• 2.2.1 ZD制劑對非開放性軟組織損傷小鼠精神活動狀態(tài)的影響22
• 2.2.2 小鼠肌肉組織病理學(xué)指標22-24
• 2.3 討論24-25
• 2.4 小結(jié)25-26
• 3 ZD制劑對小鼠損傷肌肉中細胞因子表達量的影響26-35
• 3.1 材料與方法26-27
• 3.1.1 實驗動物26
• 3.1.2 實驗試劑26
• 3.1.3 主要儀器26
• 3.1.4 ZD制劑的制備26
• 3.1.5 小鼠軟組織損傷造模方法26
• 3.1.6 模型小鼠的分組和治療26
• 3.1.7 樣品的采集26
• 3.1.8 EliVision法檢測肌肉組織中細胞因子IL-1β的表達26-27
• 3.1.9 EliVision法檢測肌肉組織中細胞因子IL-6的表達27
• 3.1.10 數(shù)理統(tǒng)計27
• 3.2 結(jié)果27-33
• 3.2.1 ZD制劑對小鼠肌肉組織中細胞因子IL-1β表達的影響27-30
• 3.2.2 ZD制劑對小鼠肌肉組織中細胞因子IL-6表達的影響30-33
• 3.3 討論33
• 3.4 小結(jié)33-35
• 4 ZD制劑對RAW264.7炎癥因子的影響35-41
• 4.1 材料與方法35-37
• 4.1.1 細胞35
• 4.1.2 主要試劑與藥品35
• 4.1.3 主要溶液配制35
• 4.1.4 主要儀器35-36
• 4.1.5 ZD制劑的制備36
• 4.1.6 細胞培養(yǎng)與分組36
• 4.1.7 細胞毒性的檢測36
• 4.1.8 NO的測定36-37
• 4.1.9 TNF-α、IL-1β、IL-6的測定37
• 4.1.10 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計37
• 4.2 實驗結(jié)果37-39
• 4.2.1 ZD制劑對細胞毒性的影響37-38
• 4.2.2 ZD制劑對NO影響38
• 4.2.3 ZD制劑對TNF-α、IL-1、IL-6的影響38-39
• 4.3 討論39-40
• 4.4 小結(jié)40-41
• 5 結(jié)論41-42
• 致謝42-43
• 參考文獻43-48
• 作者簡介48

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