本文關(guān)鍵詞：殘緣璃眼蜱的超微觀察、鑒定及牛環(huán)形泰勒蟲病治療效果分析

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【摘要】：牛環(huán)形泰勒蟲病是由泰勒科(Theileriidae)泰勒屬(Theileria)的環(huán)形泰勒蟲,以侵襲牛類動物的網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)細(xì)胞和紅細(xì)胞為特征的一類蜱傳性血液原蟲病。牛環(huán)形泰勒蟲病以肩前淋巴結(jié)腫大、稽留熱、貧血等癥狀為主要特征,急性病例常死亡;該病在我區(qū)發(fā)生、流行嚴(yán)重,如吐魯番、托克遜等疫區(qū)發(fā)病率可達(dá)60%以上,造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。而目前對于該病的防治仍沒有特效藥物及疫苗。殘緣璃眼蜱是該病的主要傳播媒介,因此牛環(huán)形泰勒蟲病的流行與媒介蜱的出沒規(guī)律、攜帶病原蟲量有著密切的關(guān)系。本研究運(yùn)用形態(tài)學(xué)觀察和分子生物學(xué)的方法對新疆吐魯番市周邊地區(qū)部分牛體表及其飼養(yǎng)環(huán)境中的殘緣璃眼蜱進(jìn)行了鑒定,并利用三組治療藥物在疫區(qū)蹲點治療了牛環(huán)形泰勒蟲病病例(N=60),進(jìn)行治療效果分析。(Ⅰ)本試驗在托克遜縣選擇約40個養(yǎng)殖戶牛場采集其牛體表及其飼養(yǎng)環(huán)境中的媒介蜱(N=1088),通過超微觀察、進(jìn)行了蜱種分類鑒定;并通過對璃眼蜱ITS2基因設(shè)計通用型引物、PCR擴(kuò)增與測序,對其進(jìn)行分子生物學(xué)鑒定。結(jié)果顯示:所采集的1088蜱中368只為殘緣璃眼蜱(Hyalomma detritum),齒式3|3;基節(jié)?外矩與內(nèi)矩約等長,外矩末端稍向外彎;爪墊短,約達(dá)爪長之半;雄蜱氣門板頭部近橢圓,背突漸細(xì);PCR擴(kuò)增出璃眼蜱種屬特異性ITS2基因序列大小為518 bp,與GenBank中登錄的殘緣璃眼蜱(登錄號:KC203394.1)ITS2基因序列的相似性為99%。結(jié)果表明,殘緣璃眼蜱是當(dāng)?shù)氐膬?yōu)勢硬蜱種之一;在傳統(tǒng)形態(tài)學(xué)鑒定方法的基礎(chǔ)上,采用ITS2基因?qū)σ盐拇乞?形態(tài)已改變)、若蜱以及形態(tài)類似的璃眼蜱屬進(jìn)行分子生物學(xué)鑒定具有鑒別性診斷的意義。(Ⅱ)本研究以疫區(qū)蹲點治療其臨床病例為目標(biāo),通過臨床癥狀觀察、病原學(xué)檢查和PCR檢測等方法確診了60例牛環(huán)形泰勒蟲病病例,并隨機(jī)分為4個組;選用3組不同的治療藥物對其進(jìn)行治療,即治療1組(中草藥組)、治療2組(貝尼爾藥物組)、治療3組(黃色素藥物組)以及空白對照組。按治療第1 d、2 d、3 d、4 d、5 d以及一周,分別對每組患牛進(jìn)行臨床癥狀觀察、體溫測定、血涂片觀察、染蟲率統(tǒng)計及治療效果觀察。結(jié)果表明,治療3組治愈率為93.33%(14/15)高于治療2組治愈率為86.67%(13/15)及治療1組治愈率為73.33%(11/15),治療3組與治療1組復(fù)發(fā)率為0%(0/15)低于治療2組復(fù)發(fā)率為15.38%(2/13);不同組患牛治愈后染蟲率方差分析結(jié)果顯示,對照組與各處方組差異極顯著(P0.01),治療2組、治療3組分別與治療1組差異顯著(P0.05),治療3組與治療2組差異不顯著(P0.05)。結(jié)果表明,治療3組的藥物(黃色素藥物組)是三組藥物中治療牛環(huán)形泰勒蟲病的最佳藥物組;適當(dāng)配用中草藥組藥物可對急、慢性牛環(huán)形泰勒蟲病起到一定的治療效果,以上治療數(shù)據(jù)可為我區(qū)牛環(huán)形泰勒蟲病的防治奠定基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：環(huán)形泰勒蟲病 殘緣璃眼蜱 超微觀察 ITS2基因鑒定 藥物治療
【學(xué)位授予單位】：新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：S858.23
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-10
• 第1章 牛環(huán)形泰勒蟲病及其防治現(xiàn)狀10-24
• 1.1 牛環(huán)形泰勒蟲病概要10-16
• 1.1.1 病原學(xué)特征10-11
• 1.1.2 生活史11-12
• 1.1.3 牛環(huán)形泰勒蟲病的流行病學(xué)12-13
• 1.1.4 牛環(huán)形泰勒蟲病的診斷13-16
• 1.2 牛環(huán)形泰勒蟲病媒介蜱的概況16-19
• 1.2.1 生物學(xué)特性16-17
• 1.2.2 危害17-18
• 1.2.3 蜱類DNA序列分析18-19
• 1.3 牛環(huán)形泰勒蟲病防治現(xiàn)狀19-22
• 1.3.1 治療19-20
• 1.3.2 預(yù)防20-22
• 1.4 本課題研究的目的意義22-24
• 第2章 殘緣璃眼蜱的超微結(jié)構(gòu)觀察及分子生物學(xué)鑒定24-34
• 2.1 試驗材料24-25
• 2.1.1 蜱蟲來源24-25
• 2.1.2 主要儀器25
• 2.1.3 主要試劑25
• 2.2 試驗方法25-30
• 2.2.1 樣品處理25-26
• 2.2.2 蜱蟲DNA的提取26-27
• 2.2.3 引物設(shè)計27
• 2.2.4 殘緣璃眼蜱ITS2基因的PCR擴(kuò)增27
• 2.2.5 目的片段回收與純化27-28
• 2.2.6 標(biāo)準(zhǔn)陽性重組質(zhì)粒的構(gòu)建28-30
• 2.3 結(jié)果與分析30-32
• 2.3.1 殘緣璃眼蜱形態(tài)學(xué)鑒定結(jié)果30-31
• 2.3.2 殘緣璃眼蜱分子生物學(xué)鑒定結(jié)果31-32
• 2.4 討論與小結(jié)32-34
• 第3章 吐魯番市周邊地區(qū)牛環(huán)形泰勒蟲病治療效果分析34-47
• 3.1 試驗材料34-35
• 3.1.1 臨床樣品來源34
• 3.1.2 主要試劑與藥物34-35
• 3.1.3 主要儀器設(shè)備35
• 3.2 試驗方法35-40
• 3.2.1 臨床癥狀診斷35
• 3.2.2 病原學(xué)診斷35
• 3.2.3 分子生物學(xué)診斷35-38
• 3.2.4 治療方案38-40
• 3.2.5 數(shù)據(jù)處理40
• 3.3 結(jié)果與分析40-45
• 3.3.1 臨床癥狀觀察結(jié)果40-41
• 3.3.2 病原學(xué)與分子生物學(xué)診斷結(jié)果41-42
• 3.3.3 治療效果觀察結(jié)果42-44
• 3.3.4 不同治療組差異分析結(jié)果44-45
• 3.4 討論與小結(jié)45-47
• 全文結(jié)論47-48
• 參考文獻(xiàn)48-57
• 附錄57-61
• 致謝61-62
• 作者簡歷62-63

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本文編號：658399