本文關(guān)鍵詞：大約克豬SLA-1原核表達(dá)載體的構(gòu)建及表達(dá)

  更多相關(guān)文章： 大約克豬 SLA-基因 原核表達(dá)載體

【摘要】：為構(gòu)建大約克豬SLA-1胞外區(qū)的原核表達(dá)載體及表達(dá)目的蛋白,試驗(yàn)設(shè)計(jì)1對(duì)引物,經(jīng)PCR擴(kuò)增獲得大約克豬SLA-1胞外區(qū)基因(命名為SLA-1-DYKe),將此片段克隆至pMD~汶19-T Simple Vector,轉(zhuǎn)化大腸桿菌TOP10感受態(tài)細(xì)胞,經(jīng)NdeⅠ和XhoⅠ雙酶切篩選陽(yáng)性克隆菌并測(cè)序,將目的基因插入到原核表達(dá)載體pET-28a(+)中,轉(zhuǎn)化至宿主菌BL21(DE3)進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá),用SDS-PAGE檢測(cè)目的蛋白的表達(dá)情況,大量誘導(dǎo)提取包涵體并檢測(cè)。結(jié)果顯示,PCR成功擴(kuò)增SLA-1-DYKe的胞外區(qū),得到大小為837bp的目的基因,目的基因成功克隆至pMD~汶19-T Simple Vector,并獲得序列正確的重組質(zhì)粒。以得到的重組質(zhì)粒成功構(gòu)建了SLA-1-DYKe/pET-28a(+)表達(dá)載體,目的蛋白大小約為34ku。本研究成功構(gòu)建了大約克豬SLA-1原核表達(dá)載體,獲得了表達(dá)蛋白,為今后研究大約克豬SLA-1的空間結(jié)構(gòu)和基因功能奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 大連大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 大約克豬 SLA-基因 原核表達(dá)載體
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目:豬源病毒CTL多肽表位與SLA-Ⅰ結(jié)晶研究(31172304) 2015年遼寧省大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目:育-大約克豬SLA-1原核表達(dá)載體的構(gòu)建及表達(dá)研究(20150086) 2014年大連大學(xué)大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目重點(diǎn)項(xiàng)目:育-大約克豬SLA-1原核表達(dá)載體的構(gòu)建及表達(dá)研究(2014066)
【分類(lèi)號(hào)】：S828;Q78
【正文快照】： 大約克豬是中國(guó)引進(jìn)的主要國(guó)外品系豬,其性能表現(xiàn)為增重快、飼料報(bào)酬高、瘦肉率高等,主要飼養(yǎng)在中國(guó)北方地區(qū)[1]。目前,國(guó)內(nèi)已經(jīng)對(duì)該品系豬進(jìn)行了雜交等生產(chǎn)性能的研究[2-3],然而,對(duì)于該品系豬基因資源方面的研究缺乏,尤其是涉及到與遺傳相關(guān)的免疫應(yīng)答基因。主要組織相容復(fù)合

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 方美英,胡曉湘,李寧,吳常信;小梅山、中梅山及大約克豬的SLA-DQB基因外顯子2 PCR-RFLP多態(tài)性分析[J];遺傳學(xué)報(bào);2002年08期

2 ;[J];;年期

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 彭靜;金華豬和大約克豬泌乳期乳腺組織的microRNA和轉(zhuǎn)錄組測(cè)序分析[D];浙江大學(xué);2015年

，

本文編號(hào)：540775