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禽IL-2單克隆抗體的制備與鑒定

發(fā)布時(shí)間:2017-06-28 16:11

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【摘要】:為制備禽源IL-2的單克隆抗體,首先構(gòu)建chIL-2的原核表達(dá)載體并進(jìn)行表達(dá),用HIS-IL-2蛋白免疫BALB/c小鼠,經(jīng)3次免疫后,取小鼠脾與骨髓瘤細(xì)胞sp2/0融合,應(yīng)用間接ELISA方法篩選陽性雜交瘤,最終獲得3株穩(wěn)定分泌chIL-2抗體的雜交瘤,分別命名為1C2,2F2和4B5。并對(duì)所獲得單抗的特性進(jìn)行了鑒定,結(jié)果表明,3株單抗亞型均為IgG1,抗體親和力解離常數(shù)(K_d)分別為4.81×10~(-10)、1.36×10~(-10)、4.15×10~(-9),均為高親和力抗體,經(jīng)過Western Blot確定3株單抗分別識(shí)別chIL-2的不同區(qū)域,且均能特異性識(shí)別chIL-2。該單抗的制備為chIL-2的功能研究和應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】: 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院農(nóng)業(yè)生物技術(shù)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】禽源IL- 原核表達(dá) 單克隆抗體
【基金】:現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)資金(NYCYTX-41)
【分類號(hào)】:S852.4
【正文快照】: IL-2(Interleukin-2)主要是由T細(xì)胞產(chǎn)生的具有重要免疫調(diào)節(jié)作用的細(xì)胞因子。1976年Morgan等[1]發(fā)現(xiàn)小鼠脾細(xì)胞培養(yǎng)上清液中有一種能夠促進(jìn)和維持T細(xì)胞在體外長期生長的因子,將其稱為T細(xì)胞生長因子(T cell growth factor,TCGF),1979年統(tǒng)一命名為IL-2,1983年Taniguchi等[2]從Con

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本文編號(hào):494470

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