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沙門菌烈性噬菌體的分離鑒定及其生物學特性的研究

發(fā)布時間:2017-06-26 07:22

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【摘要】:以1株腸炎沙門菌(CICC21482)為宿主菌,從湖北省某規(guī);B(yǎng)豬場的污水中分離得到1株烈性沙門菌噬菌體,命名為SP01,并對其生物學特性進行了初步研究。采用雙層平板法篩選并純化噬菌體,觀察噬菌斑的形態(tài);采用透射電鏡觀察SP01顆粒;酚-氯仿法提取SP01核酸,酶切分析其核酸類型。同時對噬菌體SP01的最佳感染復數(multiplicity of infection,MOI)、一步生長曲線、熱穩(wěn)定性、p H穩(wěn)定性、噬菌體SP01對細菌的裂解曲線及裂解譜等生物學特性進行了研究。結果,噬菌體SP01噬菌斑形態(tài)呈圓形、透亮,邊界清晰,無暈環(huán),直徑約為1~2 mm;電鏡下可見噬菌體SP01有一正多面體立體對稱頭部,直徑約63 nm,含非收縮性尾部,尾長約158 nm,為長尾科噬菌體;提取基因組,酶切鑒定該噬菌體核酸類型為雙鏈DNA;當MOI=0.1時,子代噬菌體滴度較高;噬菌體SP01除對本身宿主菌產生裂解外,還裂解豬霍亂沙門菌和都柏林沙門菌;一步生長曲線試驗結果顯示,其感染宿主菌的潛伏期約為20 min,裂解期約為60 min,平均裂解量約為120 PFU/cell;噬菌體SP01在20~40℃穩(wěn)定,在p H=4.0~11.0穩(wěn)定;對體外培養(yǎng)的特定血清型的沙門菌具有良好的裂菌效果。上述結果表明,噬菌體SP01為1株沙門菌烈性噬菌體,對不同溫度、p H的環(huán)境均有較強的適應能力且殺菌能力較強,具有開發(fā)為抗沙門菌制劑的潛力。
【作者單位】: 華中農業(yè)大學動物醫(yī)學院;華中農業(yè)大學農業(yè)微生物學國家重點實驗室;華中農業(yè)大學湖北省生豬健康養(yǎng)殖協(xié)同創(chuàng)新中心;
【關鍵詞】沙門菌噬菌體 分離鑒定 生物學特性
【基金】:公益性行業(yè)農業(yè)科研專項(201403054) 湖北省科技支撐計劃項目(2013BBB14;2014BBB010)
【分類號】:S852.61
【正文快照】: 沙門菌(Salmonella)對人和多種動物有致病性,可導致傷寒、副傷寒、急性胃腸炎和敗血癥4種病型。一直以來,由沙門菌導致的食品安全事件頻發(fā),受到世界各國的廣泛關注。同時,抗生素的大量不合理應用使得細菌耐藥性不斷增強,療效也越來越得不到保障。近二十年來,沙門菌的多重耐藥

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3 裴s,

本文編號:485323


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