豬流感（swine influenza,SI）的病原通常為正粘病毒科、流感病毒屬的A型流感病毒,可引起豬高熱、咳嗽和呼吸困難等癥狀,該病發(fā)病率高、病死率低,所以并沒有引起人們對豬群免疫的重視。研究發(fā)現(xiàn),豬呼吸道上皮細胞既含有人流感病毒受體又含有禽流感病毒受體,這意味著人流感和禽流感都能傳播給豬,而豬流感也能傳播給人和禽類。因此,做好豬流感的防護工作對阻止流感病毒的跨種間屏障傳播、阻擊流感全球范圍內(nèi)大流行、維護公共衛(wèi)生方面意義重大。目前控制和預防流感流行與傳播的主要手段是疫苗接種,市面上使用的疫苗以滅活疫苗為主,滅活疫苗的安全度高,特異性較強,同時存在生產(chǎn)周期長、生產(chǎn)工序復雜、不易產(chǎn)生局部免疫反應等缺點。在免疫學上冷適應減毒流感疫苗要優(yōu)于滅活疫苗,通過鼻腔途徑免疫,可誘導粘膜免疫、體液免疫和細胞免疫反應,產(chǎn)生交叉免疫保護力,對異源病毒的攻擊提供有效保護。本實驗通過對豬流感病毒EA H1N1亞型GX18ca株在適宜溫度和限制溫度下EID₅₀的比較,鑒定出具有其冷適應和溫度敏感特性;對全基因組測序發(fā)現(xiàn),與親本野生型毒株相比,GX18ca株共有六個位點發(fā)生氨基酸變化,分布在...

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖2-1親本毒株和冷適應毒株在MDCK細胞上的生長曲線A:SW/GX/18/11毒株生長曲線B:GX18ca毒株生長曲線

兩株病毒以相同劑量分別接種到MDCK細胞中,接種后,第24h、48h、72h收集細胞上清,測定其在30℃、33℃、37℃、39℃四種不同溫度下的TCID50,并利用GraphPadPrism6軟件作圖繪制生長曲線(圖2-1),結(jié)果顯示,SW/GX/18/11在37℃和....

圖2-2親本毒株和冷適應毒株引起的小鼠體重變化和臟器滴定結(jié)果比較A:臟器滴定B:體重變化

用106EID50/50μL劑量感染小鼠,在攻毒三天后每組剖殺3只小鼠,對鼻甲和肺臟病毒滴定,結(jié)果顯示,冷適應疫苗株GX18ca感染組的小鼠鼻甲檢測不到病毒復制,肺臟中檢測到了較低含量的病毒,肺臟中病毒滴度為2.67±0.72Log10EID50/mL,而SW/GX/18/1....

圖2-3親本毒株和冷適應毒株引起的肺臟病理變化結(jié)果比較

為了觀察小鼠感染病毒后的肺臟的病變程度,我們采集小鼠肺臟,在4%多聚甲醛中固定,然后做病理切片、HE染色后,鏡檢結(jié)果(圖2-3),在野生型病毒SW/GX/18/11攻毒組中,第3天小鼠的肺臟組織病變范圍約70%,表現(xiàn)出中度的出血性肺炎(圖2-3A);在GX18ca攻毒組中,第3....

圖3-3 HA基因進化樹

為了進一步闡明GX18ca與SW/GX/18/11、SW/LN/972/16、SC/1/09的遺傳進化關(guān)系,對各種H1N1亞型的SIV的HA序列進行比對,繪制遺傳進化樹。從圖3-1HA基因的遺傳進化樹可以看出,主要分為EAH1N1、CSH1N1兩個大的分支。GX18ca與S....

本文編號：4049091