TLR2和TLR4受體封閉肽對小鼠腹腔巨噬細胞細胞因子分泌的影響
發(fā)布時間:2025-02-09 14:40
Toll樣受體(Toll-like receptors,TLRs)是參與天然免疫的一類重要的模式識別受體,在天然免疫和獲得性免疫反應(yīng)過程中發(fā)揮著重要的作用。當(dāng)細菌及其毒素等模式識別分子與TLRs結(jié)合進而激活TLRs,誘導(dǎo)趨化因子、細胞因子以及炎癥介質(zhì)的大量分泌并促進炎癥細胞的浸潤,引發(fā)炎癥反應(yīng)的發(fā)生。研究發(fā)現(xiàn),在抗細菌感染所引發(fā)的炎癥過程中TLR2和TLR4發(fā)揮著核心作用,如能夠控制TLR2和TLR4的激活效應(yīng),則能夠控制細菌感染過程中過度炎癥反應(yīng)的發(fā)生。因此,本研究根據(jù)文獻已公布序列,合成了 TLR2和TLR4的特異性封閉肽。采用熒光定量PCR、ELISA以及Western Blot等技術(shù)檢測了 TLR2和TLR4的特異性封閉肽對小鼠腹腔巨噬細胞細胞因子IL-1β、IL-10、TNF-α以及RANTES表達和ERK、p38、JNK以及p65磷酸化的影響。TLR2和TLR4封閉肽預(yù)處理(24h)的小鼠腹腔巨噬細胞在LPS刺激4h后,熒光定量PCR檢測結(jié)果顯示,與LPS刺激組相比較,CP對照組IL-1β、IL-10、TNF-α以及RANTESmRNA的相對表達量無顯著性差異(P>0....
【文章頁數(shù)】:45 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略語表
1 引言
1.1 天然免疫研究概述
1.1.1 天然免疫簡述
1.1.2 天然免疫模式識別作用機制
1.2 Toll樣受體研究概述
1.2.1 Toll樣受體簡介
1.2.2 Toll樣受體介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路
1.2.3 Toll樣受體在細菌感染過程中的作用
1.3 細胞因子研究概述
1.4 Toll樣受體封閉肽的研究概述
1.5 研究的目的及意義
2 試驗內(nèi)容
2.1 實驗材料
2.1.1 實驗動物
2.1.2 實驗試劑
2.1.3 實驗儀器
2.2 試驗方法
2.2.1 小鼠腹腔巨噬細胞的分離培養(yǎng)
2.2.2 TLR2和TLR4封閉肽的合成
2.2.3 分組及給藥
2.2.4 RT-PCR檢測細胞因子mRNA的表達量
2.2.5 ELISA檢測細胞因子蛋白表達量
2.2.6 Western Blot檢測TLR2和TLR4介導(dǎo)的信號通路
3 試驗結(jié)果
3.1 BBPs對細胞因子表達的影響
3.1.1 BBPs對腹腔巨噬細胞細胞因子mRNA表達的影響
3.1.1.1 BBPs對腹腔巨噬細胞IL-1βmRNA表達的影響
3.1.1.2 BBPs對腹腔巨噬細胞IL-10 mRNA表達的影響
3.1.1.3 BBPs對腹腔巨噬細胞TNF-αmRNA表達的影響
3.1.1.4 BBPs對腹腔巨噬細胞RANTES mRNA表達的影響
3.1.2 BBPs對細胞因子蛋白表達的影響
3.1.2.1 BBPs對腹腔巨噬細胞IL-1β蛋白表達的影響
3.1.2.2 BBPs對腹腔巨噬細胞IL-10蛋白表達的影響
3.1.2.3 BBPs對腹腔巨噬細胞TNF-α蛋白表達的影響
3.1.2.4 BBPs對腹腔巨噬細胞RANTES蛋白表達的影響
3.2 BBPs對NF-κ B和MAPK激活效應(yīng)的影響
3.2.1 BBPs對腹腔巨噬細胞p65磷酸化的影響
3.2.2 BBPs對MAPK激活效應(yīng)的影響
4 討論
5 結(jié)論
致謝
參考文獻
作者簡介
本文編號:4032391
【文章頁數(shù)】:45 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮略語表
1 引言
1.1 天然免疫研究概述
1.1.1 天然免疫簡述
1.1.2 天然免疫模式識別作用機制
1.2 Toll樣受體研究概述
1.2.1 Toll樣受體簡介
1.2.2 Toll樣受體介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路
1.2.3 Toll樣受體在細菌感染過程中的作用
1.3 細胞因子研究概述
1.4 Toll樣受體封閉肽的研究概述
1.5 研究的目的及意義
2 試驗內(nèi)容
2.1 實驗材料
2.1.1 實驗動物
2.1.2 實驗試劑
2.1.3 實驗儀器
2.2 試驗方法
2.2.1 小鼠腹腔巨噬細胞的分離培養(yǎng)
2.2.2 TLR2和TLR4封閉肽的合成
2.2.3 分組及給藥
2.2.4 RT-PCR檢測細胞因子mRNA的表達量
2.2.5 ELISA檢測細胞因子蛋白表達量
2.2.6 Western Blot檢測TLR2和TLR4介導(dǎo)的信號通路
3 試驗結(jié)果
3.1 BBPs對細胞因子表達的影響
3.1.1 BBPs對腹腔巨噬細胞細胞因子mRNA表達的影響
3.1.1.1 BBPs對腹腔巨噬細胞IL-1βmRNA表達的影響
3.1.1.2 BBPs對腹腔巨噬細胞IL-10 mRNA表達的影響
3.1.1.3 BBPs對腹腔巨噬細胞TNF-αmRNA表達的影響
3.1.1.4 BBPs對腹腔巨噬細胞RANTES mRNA表達的影響
3.1.2 BBPs對細胞因子蛋白表達的影響
3.1.2.1 BBPs對腹腔巨噬細胞IL-1β蛋白表達的影響
3.1.2.2 BBPs對腹腔巨噬細胞IL-10蛋白表達的影響
3.1.2.3 BBPs對腹腔巨噬細胞TNF-α蛋白表達的影響
3.1.2.4 BBPs對腹腔巨噬細胞RANTES蛋白表達的影響
3.2 BBPs對NF-κ B和MAPK激活效應(yīng)的影響
3.2.1 BBPs對腹腔巨噬細胞p65磷酸化的影響
3.2.2 BBPs對MAPK激活效應(yīng)的影響
4 討論
5 結(jié)論
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本文編號:4032391
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