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成纖維細(xì)胞有絲分裂同步化條件的摸索及HSF-2基因在絨山羊染色體中的定位分析

發(fā)布時(shí)間:2024-10-04 21:09
  目前對(duì)于絨山羊Y染色體相關(guān)基因的研究較少,被定位在絨山羊Y染色體上的功能基因更是未見報(bào)道。為了豐富絨山羊的基因圖譜,進(jìn)一步擴(kuò)大絨山羊的功能基因的定位,完善絨山羊Y染色體上的遺傳信息,本實(shí)驗(yàn)選取了HSF-2基因,并對(duì)其進(jìn)行定位。HSF-2基因主要在細(xì)胞循環(huán)、胚胎發(fā)育、細(xì)胞分化、生殖細(xì)胞的形成中發(fā)揮作用,對(duì)熱刺激信號(hào)有耐受性,同時(shí)對(duì)調(diào)控機(jī)體生長(zhǎng)、發(fā)育、分化的信號(hào)更為敏感。因此,了解HSF-2的基因相關(guān)信息對(duì)絨山羊的選育具有重要意義。 實(shí)驗(yàn)通過體外培養(yǎng)成纖維細(xì)胞,制作細(xì)胞的染色體核型,并對(duì)核型進(jìn)行分析,確定染色體懸液制備的最優(yōu)條件。然后以HSF-2基因的質(zhì)粒DNA標(biāo)記探針,與絨山羊的成纖維細(xì)胞染色體標(biāo)本進(jìn)行雜交,從而對(duì)絨山羊的HSF-2基因進(jìn)行物理定位。 結(jié)果如下: (一)為了制備高質(zhì)量的染色體標(biāo)本,獲得大量處于中期分裂相的細(xì)胞,對(duì)培養(yǎng)條件進(jìn)行了摸索,結(jié)果如下: 1、未經(jīng)任何同步化處理,正常培養(yǎng)72h成纖維細(xì)胞,流式檢測(cè)G2/M期所占比例僅為0.18%。 2、運(yùn)用秋水仙堿同步化處理的最適濃度是0.07ug/ml,最適作用時(shí)間是18h,得到的G2/M期最高比例為10...

【文章頁(yè)數(shù)】:44 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖1內(nèi)蒙古絨山羊Fig.1InnerMongoliaCashmereGoat

圖1內(nèi)蒙古絨山羊Fig.1InnerMongoliaCashmereGoat

擇形成了品種[2]叫“溫暖全世界”,它是鄂爾多斯羊絨制品人引以為豪的本土品牌,這個(gè)品牌就是以該hmeregoat)主要分布于內(nèi)蒙古自治區(qū)西部爾市、阿拉善三盟市,1988年經(jīng)自治區(qū)檢狼山型、阿拉善型這三型都屬于絨、肉兼用自治區(qū)政府將三個(gè)類型的羊合并命名為內(nèi)蒙多風(fēng)少雨而且干旱植....


圖2熱激轉(zhuǎn)錄因子家族成員的激活通路Fig.2Activationpathwayformembersoftheheatshocktranscriptionfactorfamily

圖2熱激轉(zhuǎn)錄因子家族成員的激活通路Fig.2Activationpathwayformembersoftheheatshocktranscriptionfactorfamily

內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文體上的位置以及相關(guān)的功能調(diào)控的研究,這一研究成果對(duì)于絨山羊的選育意義。熱應(yīng)激反應(yīng)熱應(yīng)激反應(yīng)是指當(dāng)周圍的環(huán)境溫度超過了人或者動(dòng)物自身最舒適的溫度時(shí)物為了保護(hù)自身正常的代謝作用所做出的應(yīng)激性的各種反應(yīng)的總和。它是細(xì)列高度程序化的事件,熱應(yīng)激反應(yīng)機(jī)制在分子遺....


圖3第五代成纖維細(xì)胞(100倍鏡下觀察)

圖3第五代成纖維細(xì)胞(100倍鏡下觀察)

內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文3.3.5顯微觀察及顯微照相實(shí)驗(yàn)所用的兩種熒光染料是FITC和PI,F(xiàn)ITC的激發(fā)波長(zhǎng)為492nm,發(fā)射波520nm,綠色,PI的激發(fā)波長(zhǎng)為353nm,發(fā)射波長(zhǎng)為420nm,紅色,在NikonE8光顯微鏡下,用濾光片B-2A(激....


圖4第八代成纖維細(xì)胞(100倍鏡下觀察)

圖4第八代成纖維細(xì)胞(100倍鏡下觀察)

以判斷絨山羊Y染色體上是否存在HSF-2基因。4結(jié)果4.1成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)圖3第五代成纖維細(xì)胞(100倍鏡下觀察)Fig.3Thefifthgenerationoffibroblasts(100timesmicroscope)



本文編號(hào):4007150

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