發(fā)布時(shí)間：2024-04-13 17:49

　　近年來(lái),低致病性H9亞型禽流感病毒(Avian influenza virus, AIV)對(duì)水禽的感染率逐年上升。因而,防控水禽H9N2亞型禽流感顯得尤為重要。盡管如此,水禽缺乏有效H9亞型禽流感疫苗,已成為世界性難題。建立水禽的H9N2亞型AIV感染模型,是解決上述問(wèn)題的前提。 通過(guò)雞胚純化法,純化并鑒定3株H9N2亞型AIV。將這3株H9N2亞型AIV和實(shí)驗(yàn)室早期已純化鑒定的2株H9N2亞型AIV,分別通過(guò)靜脈途徑感染5周齡鴨子：以106.0EID50/100μL的劑量,100μL/只,2只/毒株。在感染后第1-5天,采集咽拭子和泄殖腔拭子,并進(jìn)行病毒分離。結(jié)果表明,與其他4株H9N2亞型AIV相比,SH441對(duì)鴨的感染率最高,為100%,且在鴨體內(nèi)具有良好的復(fù)制能力；該病毒可在咽拭子中檢測(cè)到,但無(wú)法在泄殖腔拭子中檢測(cè)到。選用SH441作為攻毒試驗(yàn)的毒株,進(jìn)一步擴(kuò)大攻毒試驗(yàn)的動(dòng)物數(shù)量為6只。在感染后第3天,剖殺3只鴨子并取其肺、氣管、心、肝、脾、腎、腦、胰等8個(gè)組織進(jìn)行病毒分離。在感染后第1-5天,分別采集所有存活的鴨子咽拭子。結(jié)果顯示,SH441對(duì)5周齡鴨子的感染結(jié)果與小規(guī)模攻毒...

【文章頁(yè)數(shù)】：45 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 引言
    1.1 禽流感病毒
        1.1.1 禽流感概述
        1.1.2 H9N2亞型禽流感病毒
        1.1.3 禽流感病毒的結(jié)構(gòu)及組成
        1.1.4 禽流感病毒的復(fù)制
        1.1.5 禽流感病毒致病力的判定
        1.1.6 禽流感診斷技術(shù)
        1.1.7 禽流感的防控
    1.2 疫苗
        1.2.1 疫苗類(lèi)型
        1.2.2 H9N2亞型禽流感疫苗
    1.3 本研究的目的和意義
2 病毒的純化、鑒定與擴(kuò)毒
    2.1 材料與方法
        2.1.1 病毒分離株
        2.1.2 SPF雞胚
        2.1.3 主要試劑和儀器
        2.1.4 血凝(HA)試驗(yàn)
        2.1.5 病毒純化
        2.1.6 擴(kuò)毒實(shí)驗(yàn)
        2.1.7 血清學(xué)鑒定
        2.1.8 RT-PCR鑒定
        2.1.9 EID₅₀(雞胚半數(shù)致死量)的測(cè)定
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 病毒純化的結(jié)果
        2.2.2 血清學(xué)鑒定結(jié)果
        2.2.3 RT-PCR鑒定結(jié)果
        2.2.4 三株病毒EID₅₀的測(cè)定結(jié)果
    2.3 討論
3 H9N2亞型禽流感病毒的水禽感染模型的建立
    3.1 材料與方法
        3.1.1 病毒分離株
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        3.1.3 主要儀器及試劑
        3.1.4 鴨攻毒用H9毒株的篩選
        3.1.5 棉拭子的病毒滴度測(cè)定
        3.1.6 動(dòng)物擴(kuò)大試驗(yàn)
        3.1.7 感染鴨組織的病毒滴定
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 SH441感染鴨實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.2.2 SH1753感染鴨實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.2.3 其他3株鴨源H9N2亞型AIV感染鴨實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.2.4 攻毒用毒株的篩選結(jié)果
        3.2.5 SH441擴(kuò)大動(dòng)物數(shù)量實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.2.6 組織的病毒分離結(jié)果
    3.3 討論
4 H9N2亞型禽流感病毒的水禽感染模型實(shí)際應(yīng)用的效果評(píng)估
    4.1 材料與方法
        4.1.1 病毒株和疫苗
        4.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        4.1.3 主要儀器及試劑
        4.1.4 SH441滅活苗免疫效果的監(jiān)測(cè)
        4.1.5 血凝抑制(HI)試驗(yàn)
        4.1.6 免疫鴨感染SH441后棉拭子病毒滴度的測(cè)定
        4.1.7 免疫鴨感染SH441后肺組織的病毒滴定
        4.1.8 肺組織病理切片的制作
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 血凝抑制試驗(yàn)測(cè)定結(jié)果
        4.2.2 免疫鴨感染SH441后棉拭子的病毒分離結(jié)果
        4.2.3 肺組織的病毒分離結(jié)果
        4.2.4 肺組織的病理切片結(jié)果
    4.3 討論
5 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄
作者簡(jiǎn)介



本文編號(hào)：3953401