發(fā)布時間：2024-03-25 23:47

　　布魯氏菌病是由布魯氏菌感染引發(fā)的重要人獸共患病,給畜牧業(yè)發(fā)展和人畜健康帶來極大危害。馬耳他種布魯氏菌作為一種兼性胞內寄生菌,進化出多種逃避宿主免疫策略,可在宿主細胞內建立持久的感染。MicroRNA是一類長約18²5個核苷酸的非編碼小分子RNA,主要在細胞轉錄后水平調控基因表達,在宿主體內發(fā)揮重要調控作用。本實驗室前期將馬耳他種布魯氏菌強毒株M28和疫苗株M5-90感染BALB/c小鼠,獲得強弱毒感染后不同時間的microRNA表達譜,初步研究發(fā)現(xiàn)microRNA-363-5p(miRNA-363-5p)參與布魯氏菌誘導巨噬細胞凋亡。為了篩選更多對布魯氏菌復制和細胞凋亡有影響的microRNAs,利用巨噬細胞過表達或抑制microRNA表達,然后感染布魯氏菌。通過細菌分離計數(shù)和細胞生長狀態(tài)初步篩選microRNA。結果顯示,過表達miRNA-29c-5p,胞內分菌數(shù)顯著低于對照組,過表達miRNA-335-5p和miRNA-329-3p,胞內分菌數(shù)顯著高于對照組(均p<0.05);過表達miRNA-676-3p、miRNA-674-5p和miRNA-18b-...

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖3-1miRNA-363-5p靶基因雙熒光素酶報告質粒的鑒定500bp250bp

學院碩士論文第三章miRNA-的’UTR結合區(qū)連接到pmirGLODual-LuciferasemiRNATargetExpress化至DH5α感受態(tài)涂含氨芐青霉素的培養(yǎng)基平板，溫箱培養(yǎng)1h后觀察NA--p靶基因雙熒光素酶報告質粒的鑒定化后在含....

圖5-4親本株M28.缺失株M28}OmpR及互補株M28}OmpR-cam在RAW2fi4.7巨噬細胞中的

中國農(nóng)業(yè)科學院碩士論文第五章馬耳他布魯氏菌ΔOmpR的構建及其對生長與復制的影響基因缺失不影響布魯氏菌在液體培養(yǎng)基中的生長。巨噬細胞感染實驗將MΔOmpR、M和MΔOmpR-com按MOI感染RAW巨噬細胞，于不同時間點分離胞內菌并計數(shù)。結果顯示，感染....

本文編號：3939034