根據(jù)本實驗室鑒定的鴨瘟病毒(DPV)UL10基因和UL48基因,開展了鴨瘟病毒在感染鴨胚成纖維細(xì)胞后,應(yīng)用免疫熒光技術(shù)對UL10和UL48基因的表達(dá)產(chǎn)物在細(xì)胞中分布特征的檢測。獲得如下的結(jié)果：1、UL10蛋白的細(xì)胞定位結(jié)果顯示特異性熒光可在鴨瘟病毒感染4h后在細(xì)胞質(zhì)中檢測到,在細(xì)胞核內(nèi)存在少量的熒光,隨著感染時間的延長,在細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)的特異性熒光會逐漸的增多,在感染后期,熒光逐漸向細(xì)胞膜推移,感染后48h,UL10基因表達(dá)的量達(dá)到了最大值,特異性熒光最多,感染后72h,特異性熒光開始明顯的減弱,部分細(xì)胞核已經(jīng)發(fā)生了皺縮,細(xì)胞質(zhì)開始出現(xiàn)破碎。2、UL48蛋白的細(xì)胞定位結(jié)果顯示特異性熒光可在鴨瘟病毒感染1h后就在細(xì)胞質(zhì)中檢測到,隨著感染時間的延長,在細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)數(shù)量較多的特異性熒光,且隨著時間的推移,更多的熒光逐漸向細(xì)胞核膜推移,在感染后9h,UL48基因表達(dá)量是達(dá)到了最大值,在細(xì)胞質(zhì)中可以觀察到大量的熒光物質(zhì),在感染后24h,特異性熒光開始明顯的減弱,在感染后72h,細(xì)胞內(nèi)存在的的熒光量已經(jīng)很少,部分細(xì)胞核已經(jīng)發(fā)生了皺縮和破碎,細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)了明顯的空泡。

【文章頁數(shù)】：38 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略詞表
一、引言
    1 皰疹病毒UL10基因和UL48基因及其編碼蛋白研究
        1.1 皰疹病毒的概述
        1.2 鴨瘟病毒的概述
    2 DPV UL10和UL48基因及其相關(guān)蛋白研究
        2.1 皰疹病毒UL10基因及其編碼的gM蛋白的相關(guān)研究
        2.2 皰疹病毒UL48基因及其編碼的VP16蛋白的研究進(jìn)展
    3 展望
二、試驗研究
    1 材料
        1.1 毒株/細(xì)胞
        1.2 主要試劑及配制
        1.3 主要儀器設(shè)備
    2 實驗方法
        2.1 兔抗高免血清UL10和UL48的純化及鑒定
        2.2 間接免疫熒光檢測DPV UL10和UL48在細(xì)胞內(nèi)分布特征方法的的建立及優(yōu)化
        2.3 DPV UL10和UL48基因產(chǎn)物在細(xì)胞內(nèi)分布的動態(tài)監(jiān)測
    3 實驗結(jié)果
        3.1 兔抗UL10蛋白和UL48蛋白IgG的純化的SDS-PAGE鑒定結(jié)果
        3.2 特異性試驗結(jié)果
        3.3 DPV UL10和UL48蛋白亞細(xì)胞定位的動態(tài)監(jiān)測結(jié)果
    4 討論
        4.1 關(guān)于蛋白在細(xì)胞內(nèi)分布的研究方法
        4.2 DPV UL10宿主亞細(xì)胞定位與病毒增殖相關(guān)性的初步探討
        4.3 DPV UL48宿主亞細(xì)胞定位與病毒增殖相關(guān)性的初步探討
三、結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號：3932320