一直以來,裸卵因其體外成熟后胞質(zhì)質(zhì)量差、發(fā)育能力低得不到廣泛運用。卵母細胞在高水平環(huán)磷酸腺苷(cAMP)抑制作用下發(fā)生減數(shù)分裂阻滯,延長胞質(zhì)成熟時間,提高胞質(zhì)成熟質(zhì)量。胞質(zhì)成熟達到一定水平后,cAMP下降,成熟促進因子(MPF)上升,使得質(zhì)核成熟同步,有利于卵母細胞后期發(fā)育。本試驗利用藥物添加培養(yǎng)的方式模擬卵母細胞在體內(nèi)成熟的機制,旨在建立小鼠裸卵體外成熟培養(yǎng)體系。通過統(tǒng)計成熟率,鑒定成熟卵母細胞質(zhì)量,統(tǒng)計孤雌激活率、囊胚率,體外受精率、囊胚率,囊胚質(zhì)量鑒定,熒光定量PCR檢測基因表達的方法,觀察本試驗所建立的裸卵體系的效率,進而判定該裸卵成熟體系建立的可行性。本研究分為以下兩個部分：試驗一:GV期小鼠自然裸卵在不同濃度的cAMP激動劑forskolin培養(yǎng)液中培養(yǎng)不同時間段(3 h,12 h,24 h),之后轉(zhuǎn)移至普通培養(yǎng)液中分別進行不同時間段的普通培養(yǎng)(21 h,12 h,0 h)。正交試驗結(jié)果顯示,GV期裸卵在10、50、100μM forskolin濃度下培養(yǎng)3 h,之后轉(zhuǎn)移至普通培養(yǎng)液培養(yǎng)21 h,成熟率分別為：54.17±4.88%、50.83±4.84%、54.17士4....

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－１６?Ｂａｘ巧光定量表達迄勢??Ｆｉｇ．２－１６?Ｇ巧ｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?Ｂａｘ??

圖２－１６?Ｂａｘ巧光定量表達迄勢??Ｆｉｇ．２－１６?Ｇ巧ｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?Ｂａｘ??

本文編號：3916587