為評(píng)價(jià)霍亂弧菌菌影(VCG)對(duì)豬瘟活疫苗及豬瘟病毒E2蛋白抗原區(qū)(BC和AD區(qū))亞單位疫苗免疫增強(qiáng)效果的作用,本實(shí)驗(yàn)首先利用含有裂解質(zhì)粒的霍亂弧菌制備VCG,通過(guò)對(duì)細(xì)菌裂解前后進(jìn)行平板計(jì)數(shù)及透射電鏡檢測(cè)VCG裂解效果,結(jié)果顯示所制備的VCG裂解率高,且基本形成一個(gè)完整的細(xì)菌空殼。在確定最佳豬瘟活疫苗使用量后探究VCG對(duì)豬瘟活疫苗(CFS ST)免疫效果的影響,實(shí)驗(yàn)分別用VCG+CFS ST和CFS ST免疫家兔一次,設(shè)置對(duì)照組,并在免疫第42 d后攻毒。本研究還探究了VCG作為佐劑對(duì)豬瘟E2蛋白主要抗原區(qū)蛋白亞單位疫苗免疫效果的影響,實(shí)驗(yàn)分別用完全弗氏佐劑(CFA)和VCG聯(lián)合E2蛋白主要抗原區(qū)蛋白,通過(guò)間隔兩周的方式分4次免疫家兔,設(shè)置對(duì)照組,并在免疫第56 d后攻毒。通過(guò)阻斷ELISA方法每周檢測(cè)家兔血清的抗體阻斷率,免疫后以500 RID₅₀的豬瘟病毒弱毒株通過(guò)耳緣靜脈注射方式對(duì)家兔攻毒。結(jié)果顯示,50 RID₅₀的豬瘟活疫苗組家兔血清抗體阻斷率顯著降低(p<0.001);VCG+CFS ST組家兔豬瘟抗體阻斷率在免疫14 d后大...

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圖1VCG(A)與霍亂弧菌(B)透射電鏡結(jié)果

將制備的VCG進(jìn)行平板活菌計(jì)數(shù)檢測(cè)，結(jié)果顯示，在誘導(dǎo)E基因表達(dá)前，活菌數(shù)為1.7×107cfu/mL，裂解后活菌數(shù)為4×103cfu/mL，根據(jù)裂解率計(jì)算公式得出細(xì)菌裂解率為99.9%。菌影制備成凍干粉后，取約109細(xì)胞的菌影量涂板計(jì)數(shù)發(fā)現(xiàn)無(wú)活菌生長(zhǎng)。透射電鏡觀察可見(jiàn)，表達(dá)E基因....

圖2豬瘟活疫苗免疫家兔的豬瘟抗體水平

利用不同劑量豬瘟活疫苗（傳代細(xì)胞源）免疫家兔，并監(jiān)測(cè)家兔體內(nèi)豬瘟抗體產(chǎn)生的變化。結(jié)果顯示，當(dāng)使用免疫劑量為50RID50的豬瘟活疫苗時(shí)，家兔體內(nèi)CSFV抗體的產(chǎn)生速度相較于其它免疫劑量組顯著降低（p<0.001），而當(dāng)豬瘟活疫苗接種劑量大于200RID50時(shí)，相較于免疫劑量較....

圖4VCG與E2蛋白亞單位疫苗免疫家兔后的抗體水平

分別用CFA(E2）、VCG(E2）以及等量的PBS免疫家兔，免疫后每周采血檢測(cè)抗體。結(jié)果顯示，在二免一周后除對(duì)照組外均有特異性抗體產(chǎn)生，且均為上升趨勢(shì)（p<0.001）。此外，VCG(E2）組阻斷率略低于弗氏佐劑乳化E2蛋白主要抗原區(qū)組，然而在免疫后第56d后也可達(dá)到80%以....

圖3VCG與豬瘟活疫苗聯(lián)合免疫后家兔抗體水平

實(shí)驗(yàn)利用含有或不含有VCG的50RID50經(jīng)典豬瘟活疫苗（CSFST）以及等量的PBS（作為陰性對(duì)照）分別免疫家兔一周后，每周采血進(jìn)行抗體檢測(cè)。結(jié)果顯示，VCG+CSFST組家兔產(chǎn)生的抗體阻斷率在14d后的大部分時(shí)間點(diǎn)顯著高于CSFST組（p<0.05）（圖3）。表明V....

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