隨著生活水平的不斷提高，人們對豬肉肉質(zhì)的要求也越來越高，肌內(nèi)脂肪（IMF）是影響肉質(zhì)的重要指標(biāo)之一。肉的嫩度、風(fēng)味、多汁性都與之相關(guān)。從上世紀(jì)，人們追求的主要是瘦肉率，隨著不斷的選種選育，雖然瘦肉率得到了明顯提高，但造成現(xiàn)在的肉口感下降，商品瘦肉型豬的肌內(nèi)脂肪平均含量僅僅在1.5%左右，嚴(yán)重影響了肉的口感。本實驗室前期研究發(fā)現(xiàn)磷酸酪氨酸互作結(jié)構(gòu)域1（PID1）與肌內(nèi)脂肪的沉積密切相關(guān)，并且在高肌內(nèi)脂肪的萊蕪豬中呈現(xiàn)高表達。其他相關(guān)研究也發(fā)現(xiàn)，PID1基因與肉質(zhì)存在一定聯(lián)系。本研究采用制備轉(zhuǎn)基因兔動物模型的方式，將攜帶豬PID1基因的重組質(zhì)粒pIRES2-acGFP-PID1注射到新西蘭兔的睪丸內(nèi)，通過后代檢測進一步研究PID1基因與肉質(zhì)的關(guān)系，同時進一步探討睪丸注射法在轉(zhuǎn)基因動物制備中的可行性。本論文主要獲得了如下結(jié)果： 一、設(shè)計克隆豬PID1基因CDS區(qū)全長的特異性引物，經(jīng)過PCR擴增獲得該基因CDS區(qū)全長，在特異性引物的5ˊ端分別加入限制性內(nèi)切酶Bgl II和EcoR I的酶切序列，并加入保護堿基。對pIRES2-acGFP空載體和基因全長分別用上述兩對限制性內(nèi)切酶酶切、回收、純化...

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1豬肌肉組織總RNA提取結(jié)果

圖1豬肌肉組織總RNA提取結(jié)果ig.1ResultofRNAextractedfrompigmuscularti表9cDNA檢測引物able9TheprimersusedforthedetectionofthecD引物序列Prim....

圖2GAPDH檢測cDNA結(jié)果

對豬肌肉組織中總RNA進行提取，OD值測定結(jié)果顯示用1%的瓊脂糖凝膠進行檢測，有28S、18S、5S3條清晰GAPDH的序列設(shè)計特異性引物（表9）檢測cDNA。檢圖1豬肌肉組織總RNA提取結(jié)果Fig.1ResultofRNAextracted....

圖3PID1基因全長擴增結(jié)果

圖3PID1基因全長擴增結(jié)果Fig.3ThePCRamplificationoffullcodingregionofthePID1genes的重組質(zhì)粒及鑒定關(guān)鑒定基和酶切位點的目的基因全長經(jīng)過限制性內(nèi)切酶BglII和�？召|(zhì)粒pIRES2-ac....

圖4菌液PCR檢測結(jié)果

圖3PID1基因全長擴增結(jié)果Fig.3ThePCRamplificationoffullcodingregionofthePID1genes建成功的重組質(zhì)粒及鑒定組質(zhì)粒相關(guān)鑒定有保護堿基和酶切位點的目的基因全長經(jīng)過限制性內(nèi)切酶BglII和Eco....

本文編號：3899174