生豬養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)在我國畜牧業(yè)中占據(jù)著十分重要的地位,豬肉成為我國主要的肉制品來源。隨著人們生活水平的提高,對豬肉的需求不再僅僅是量的滿足,更大的是對肉品質(zhì)要求的改善。豬肉品質(zhì)的改善已經(jīng)成為豬遺傳育種學研究的熱點問題。肌纖維是構(gòu)成肌肉的基本單位,肌纖維特性直接影響到肉質(zhì)的好壞。肌肉的食用特性(嫩度、風味、多汁性)與肌纖維數(shù)目、肌纖維直徑、肌纖維面積、肌纖維類型以及肌內(nèi)脂肪(IMF)含量密切相關(guān)。通過研究個體肌纖維性狀的差異,從分子遺傳角度找到影響肌肉發(fā)育的相關(guān)基因,能更好地在實踐中指導(dǎo)育種,取得最佳的經(jīng)濟效益。 本研究基于一個純種大白資源群體,利用HE染色法對豬群肌纖維直徑、面積進行測定,結(jié)合分子生物學、生物統(tǒng)計學以及群體遺傳學等方法對Lpin1、BTG3基因進行了SNP檢測及與肌纖維短徑、長徑、直徑、肌纖維面積等性狀的關(guān)聯(lián)分析。同時通過免疫組化方法用Image Pro Plus6.0圖像處理軟件測得了11個個體的肌纖維快慢肌比例,并且通過Real-Time PCR技術(shù)驗證了這11個個體的慢肌narker基因MYH7的表達量。取得如下結(jié)果： (1)測定了118頭純種大白背最長肌肌纖維性狀指標...

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略詞表
1 前言
    1.1 研究問題的由來
    1.2 肌肉的組織學結(jié)構(gòu)及特性
    1.3 肌纖維性狀與肉質(zhì)以及胴體性狀的關(guān)系
    1.4 部分肌纖維性狀相關(guān)候選基因研究進展
        1.4.1 肌纖維直徑、面積的候選基因的研究進展
        1.4.2 肌纖維類型相關(guān)基因的研究進展
        1.4.3 本研究中兩個候選基因的研究進展
    1.5 本研究的目的和意義
2 材料和方法
    2.1 材料
        2.1.1 用于性狀關(guān)聯(lián)分析的豬群和DNA樣品
        2.1.2 用于檢測慢肌標志基因MYH7的cDNA樣品
        2.1.3 主要試劑
        2.1.4 主要試劑的配制
        2.1.5 主要儀器設(shè)備
        2.1.6 主要分子生物學軟件
        2.1.7 主要圖像分析處理軟件與統(tǒng)計軟件
        2.1.8 主要網(wǎng)站及數(shù)據(jù)庫
    2.2 方法
        2.2.1 本研究的技術(shù)路線
        2.2.2 石蠟切片的制備
        2.2.3 蘇木素伊紅染色(HE染色)進行肌纖維面積、直徑的測量統(tǒng)計
        2.2.4 免疫組化法(IHC)區(qū)分快慢肌肌纖維以及快慢肌纖維比例的統(tǒng)計
        2.2.5 耳樣DNA的提取及質(zhì)量檢測
        2.2.6 組織樣背最長肌Total RNA的提取及質(zhì)量檢測
        2.2.7 RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA
        2.2.8 熒光定量標準品的制備
        2.2.9 引物設(shè)計及PCR擴增
        2.2.10 基因多態(tài)性與性狀間的關(guān)聯(lián)分析
        2.2.11 熒光定量PCR檢測慢肌肌纖維標志基因表達水平
3 結(jié)果
    3.1 肌纖維直徑、面積的測量統(tǒng)計及相關(guān)基因的多態(tài)性驗證
        3.1.1 肌纖維直徑、面積的測量統(tǒng)計
        3.1.2 肌纖維直徑、面積以及肉質(zhì)性狀之間的相關(guān)性分析
        3.1.3 Lpin1基因在大白豬群體中的多態(tài)性檢測及關(guān)聯(lián)分析
        3.1.4 BTG3基因在大白豬群體中的多態(tài)性檢測及關(guān)聯(lián)分析
    3.2 肌纖維快慢肌比例的測量統(tǒng)計及絕對定量的驗證
        3.2.1 肌纖維快慢肌比例的測量統(tǒng)計
        3.2.2 熒光定量PCR檢測慢肌標記基因MYH7表達水平
4 討論
    4.1 關(guān)于肌纖維直徑、面積測量統(tǒng)計的討論
    4.2 Lpin1基因性狀關(guān)聯(lián)分析的討論
    4.3 BTG3基因性狀關(guān)聯(lián)分析的討論
    4.4 關(guān)于肌纖維快慢肌比例測量統(tǒng)計的討論
    4.5 關(guān)于熒光定量PCR檢測快慢肌比例結(jié)果的討論
5 小結(jié)
    5.1 本研究的主要結(jié)果與結(jié)論
    5.2 本研究的創(chuàng)新點與特色
    5.3 本研究的不足與進一步工作的建議
參考文獻
致謝



本文編號：3889920