為探究短鏈脂肪酸(SCFAs)對(duì)奶牛瘤胃上皮細(xì)胞(BRECs)Ca2+信號(hào)通路相關(guān)基因表達(dá)的影響,試驗(yàn)分為3個(gè)處理組,分別為野生型BRECs組,含20mmol/L SCFAs BRECs組,含20mmol/L SCFAs且通過(guò)CRISPR/Cas 9系統(tǒng)敲除GPR41基因的BRECs組,每個(gè)處理組3個(gè)重復(fù),每組細(xì)胞均培養(yǎng)24h后,收集細(xì)胞提取總RNA,通過(guò)qRT-PCR對(duì)Ca2+信號(hào)通路相關(guān)基因的mRNA表達(dá)量和細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明,與野生型BRECs相比,添加20mmol/L SCFAs可極顯著增加PLCB2的mRNA表達(dá)量(P<0.01),顯著增加IP3R1的mRNA表達(dá)量(P<0.05),對(duì)PLCE1、PLCL1、PKCB和PKCG的mRNA表達(dá)量無(wú)顯著差異(P>0.05),可增加細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度但無(wú)顯著差異(P>0.05);敲除SCFAs的受體GPR41后,添加20 mmol/L SCFAs可顯著降低IP3R1的mRNA表達(dá)量(P<0.05),極顯著上調(diào)PLCE1和PLCB2的mRNA表達(dá)量(P<0.01),但對(duì)PLCL1、...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 試驗(yàn)材料
    1.2 試驗(yàn)方法
        1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
        1.2.2 總RNA提取
        1.2.3 反轉(zhuǎn)錄成cDNA
        1.2.4 Real-time PCR
        1.2.5 細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度的測(cè)定
    1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
2 結(jié)果與分析
    2.1 SCFAs對(duì)BRECs中PLC表達(dá)的影響
    2.2 SCFAs對(duì)BRECs中PKC表達(dá)的影響
    2.3 SCFAs對(duì)BRECs中IP3R1表達(dá)的影響
    2.4 SCFAs對(duì)BRECs中Ca2+濃度的影響
3 討論
4 結(jié)論



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