內蒙古白絨山羊是產絨量和絨纖維品質都位居世界前列的山羊品種,其絨產量約占中國的一半以上,占世界羊絨產量的1/3。山羊絨作為內蒙古白絨山羊最重要的經濟組成部分,是一類稀缺珍貴的動物資源,在國際上享有盛譽。但由于國際羊絨市場需求量大,各產區(qū)紛紛以提高產量為目的進行雜交擴繁,導致羊絨品質急速下降,使種質資源被嚴重破壞。傳統(tǒng)生物學育種也面臨著優(yōu)良種系存欄少、繁育周期長等問題,而基因編輯技術的應用為大動物育種提供了新的方向。角蛋白關聯(lián)蛋白(keratin-associated protein,KAP)是角蛋白的重要組成成分,對毛發(fā)等皮膚衍生物的形成和結構有著重要影響。研究發(fā)現(xiàn)KAP13-1的調控基因角蛋白關聯(lián)蛋白基因(keratin-associated protein,KRTAP)13-1參與了毛囊的早期發(fā)育,并對絨毛纖維直徑產生影響。本實驗利用CRISPR/Cas9系統(tǒng)制備KRTAP13-1基因敲除絨山羊,探究KRTAP13-1基因對于毛囊發(fā)育和纖維直徑的影響,為培育超細絨型絨山羊育種新材料提供理論依據(jù)和研究基礎。1、載體構建在KRTAP13-1基因的編碼序列(Coding sequence...

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮略詞表
第一章 文獻綜述 CRISPR/Cas系統(tǒng)簡述
    1 CRISPR/Cas系統(tǒng)的研究歷程
    2 CRISPR/Cas系統(tǒng)的功能
        2.1 CRISPR/Cas系統(tǒng)的獲得性免疫功能
        2.2 CRISPR/Cas系統(tǒng)的基因編輯功能
    3 CRISPR/Cas系統(tǒng)的分類與作用
    4 CRISPR/Cas系統(tǒng)的應用
        4.1 CRISPR/Cas9系統(tǒng)的應用
        4.2 CRISPR/Cas13系統(tǒng)的應用
    5 CRISPR/Cas系統(tǒng)的安全問題
    6 結語
第二章 研究論文
    1 引言
    2 材料與方法
        2.1 材料
        2.2 方法
    3 結果
        3.1 Cas9/gRNA共載體的構建與檢測
        3.2 單克隆細胞系的篩選與鑒定
        3.3 KRTAP13-基因敲除絨山羊的制備
    4 討論
        4.1 gRNA載體的設計與構建
        4.2 單克隆細胞的篩選
        4.3 KRTAP13-1基因敲除絨山羊的制備
結論
參考文獻
致謝



本文編號：3873937