豬瘟(classical swine fever, CSF)是由豬瘟病毒(classical swine fever virus, CSFV)引起的一種烈性傳染病,對養(yǎng)豬業(yè)能夠造成嚴重的經濟損失。目前國內外廣泛應用的CSF疫苗是兔化弱毒疫苗C株,雖然該疫苗對CSF的防控發(fā)揮了主要作用,但由于其不能區(qū)分疫苗免疫和CSF野毒感染,易受母源抗體干擾而常導致免疫減效或失敗等原因,致使CSF在我國未能得到有效控制。因此,研制一種安全高效且具有標記特征的新型疫苗對我國控制及凈化CSF具有重大意義。偽狂犬病(pseudorabies, PR)是由偽狂犬病病毒(pseudorabies virus, PRV)引起的多種家畜及野生動物的以發(fā)熱、奇癢、腦脊髓炎、呼吸和神經系統(tǒng)障礙為主要特征的急性傳染病。目前主要用于防控該病的疫苗是弱毒疫苗(MLV)Bartha-K61,歐美發(fā)達國家也通過接種該疫苗有效控制及根除了PRV。然而,白2011年以來我國大部分省份相繼爆發(fā)及流行了PR新疫情,給我國養(yǎng)豬業(yè)造成了嚴重的經濟損失。隨后多項研究結果表明,PRV在我國已經發(fā)生變異,毒力相對于PRV經典株(雙城株)明顯增強,...

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【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 文獻綜述
    1.1 豬瘟概述
        1.1.1 豬瘟
        1.1.2 豬瘟病毒
    1.2 豬瘟新型疫苗研究進展
        1.2.1 活病毒載體疫苗
        1.2.2 單位疫苗
        1.2.3 DNA疫苗
        1.2.4 嵌合豬瘟疫苗
    1.3 偽狂犬病概述
        1.3.1 偽狂犬病
        1.3.2 偽狂犬病病毒
        1.3.3 PRV感染神經系統(tǒng)的研究進展
        1.3.4 PRV作為疫苗載體的研究進展
    1.4 偽狂犬病新疫情的爆發(fā)
    1.5 PRV變異株疫苗的研究進展
    1.6 研究目的與意義
第二章 rPRVTJ-delgE/gI/TK-E2的構建及免疫效力評價
    2.1 材料和方法
        2.1.1 病毒、疫苗、質粒、細胞和抗體
        2.1.2 主要試劑及溶液
        2.1.3 主要儀器及設備
        2.1.4 實驗動物
        2.1.5 病毒基因組的提取
        2.1.6 質粒的提取
        2.1.7 rPRVTJ-delgE/gI/TK-EGFP的拯救、純化和鑒定
        2.1.8 rPRVTJ-delgE/gI/TK-E2拯救和純化
        2.1.9 rPRVTJ-delgE/gI/TK-E2的PCR、IFA與Western blotting鑒定
        2.1.10 rPRVTJ-delgE/gI/TK-E2一步生長曲線
        2.1.11 rPRVTJ-delgE/gI/TK-E2免疫豬對CSFV的攻毒保護實驗
        2.1.12 rPRVTJ-delgE/gI/TK-E2免疫豬對PRV的攻毒保護實驗
        2.1.13 特異性抗體檢測和病毒中和試驗
        2.1.14 免疫及攻毒后排毒檢測
        2.1.15 熒光定量RT-PCR
        2.1.16 剖檢組織病理變化
        2.1.17 數(shù)據(jù)統(tǒng)計學分析
    2.2 結果
        2.2.1 重組病毒rPRVTJ-delgE/gI/TK-EGFP和rPRVTJ-delgE/gI/TK-E2的獲得和鑒定
        2.2.2 一步生長曲線
        2.2.3 rPRVTJ-delgE/gI/TK-E2對仔豬的安全性
        2.2.4 rPRVTJ-delgE/gI/TK-E2誘導仔豬產生的E2特異性抗體和抗CSFV的中和抗體
        2.2.5 rPRVTJ-delgE/gI/TK-E2免疫豬對CSFV產生的攻毒保護
        2.2.6 rPRVTJ-delgE/gI/TK-E2免疫豬后誘導的gB抗體及抗PRV的中和抗體
        2.2.7 rPRVTJ-delgE/gI/TK-E2免疫豬對PRV產生的攻毒保護
    2.3 討論
全文結論
參考文獻
致謝
作者簡介
導師簡介



本文編號：3854569