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T-2毒素對小鼠胚胎著床和子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞的影響

發(fā)布時間:2023-10-14 07:37
  T-2毒素是單端孢霉倍半萜烯族毒素中毒性最強的真菌毒素,主要由鐮孢菌屬代謝產(chǎn)生,在全世界已被公認為谷物中不可避免的強毒性污染物,能夠?qū)е氯祟惡托笄輥喼滤佬灾卸?甚至是致死性中毒。用于飼喂動物的食品加工副產(chǎn)品和制作飼料的谷物原料常被檢測出含有高濃度T-2毒素和HT-2毒素。T-2毒素具有顯著的生殖毒性,飼料中低劑量的T-2毒素就可以顯著影響青年母牛和母羊的卵巢功能,造成一系列的生殖危害,影響畜牧生產(chǎn)進程。T-2毒素對妊娠動物的生殖毒性損傷更為嚴重,可導致胚胎丟失、流產(chǎn)、胎兒畸形、胎盤和生殖道病理性出血,極大地影響動物的繁殖性能。本試驗首先觀察對T-2毒素導致的子宮組織學損傷和對胚胎著床的影響,進一步通過熒光定量PCR、Western Bolt等方法檢測了T-2毒素對小鼠原代子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞凋亡和炎癥因子表達的影響。試驗主要結果如下:1.使用不同濃度的T-2毒素(0,0.34 mg/kg,1.5 mg/kg,3.0 mg/kg)處理孕4 d小鼠,尾靜脈注射臺盼藍檢測對胚胎著床的影響。結果顯示,T-2毒素能夠顯著減少胚胎著床數(shù),影響胚胎著床位點的分布,導致子宮兩側胚胎分布不均勻,胚胎間隔距離...

【文章頁數(shù)】:48 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
abstract
文獻綜述
    第一章 T-2毒素研究進展
        1.1 T-2毒素的生物學特性
        1.2 T-2毒素的污染現(xiàn)狀
        1.3 T-2毒素的毒性作用
            1.3.1 T-2毒素的免疫毒性
            1.3.2 T-2毒素的生殖毒性
            1.3.3 T-2毒素的基因毒性和細胞毒性
    第二章 小鼠胚胎著床的研究進展
        2.1 子宮內(nèi)膜的組織結構
        2.2 胚胎著床和蛻膜化
            2.2.1 胚胎著床
            2.2.2 蛻膜化
        2.3 胚胎著床與子宮局部免疫
            2.3.1 ―有利炎癥”—胚胎著床
            2.3.2 ―有害炎癥”—炎癥反應
            2.3.3 胚胎著床與炎癥反應的區(qū)別
        2.4 本研究的目的意義及主要內(nèi)容
試驗部分
    第三章 T-2毒素對小鼠早期妊娠的影響
        3.1 材料
            3.1.1 主要材料
            3.1.2 主要設備
            3.1.3 實驗動物
        3.2 方法
            3.2.1 T-2毒素的溶解、稀釋與保存
            3.2.2 動物處理與分組
            3.2.3 小鼠胚胎著床位點的計數(shù)與觀察
            3.2.4 統(tǒng)計處理
        3.3 結果
            3.3.1 不同劑量T-2毒素處理后對小鼠胚胎著床的影響
            3.3.2 HE染色
        3.4 討論
        3.5 小結
    第四章 T-2毒素對小鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞的影響
        4.1 材料
            4.1.1 主要試劑
            4.1.2 主要儀器
            4.1.3 實驗動物
        4.2 方法
            4.2.1 小鼠原代子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞的分離和培養(yǎng)
            4.2.2 小鼠原代子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞的純度鑒定
            4.2.3 小鼠原代子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞人工誘導蛻膜化
            4.2.4 T-2毒素對小鼠原代子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞活力的影響
            4.2.5 RT-qPCR檢測目的基因mRNA表達
            4.2.6 WesternBlot檢測目的基因蛋白表達
        4.3 結果
            4.3.1 T-2毒素對小鼠原代子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞活力的影響
            4.3.2 RT-qPCR與WesternBlot檢測凋亡相關基因的表達
            4.3.3 RT-qPCR檢測炎癥因子相關的基因表達
            4.3.4 WesternBlot檢測炎癥信號通路相關基因的表達
            4.3.5 RT-qPCR檢測人工誘導蛻膜化標志基因的表達
            4.3.6 RT-qPCR檢測人工蛻膜化后炎癥因子的基因表達
            4.3.7 RT-qPCR檢測炎癥信號通路下游的蛻膜化功能基因的表達
        4.4 討論
        4.5 小結
結論
參考文獻
縮略詞
致謝
作者簡介



本文編號:3853881

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