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基于GEO公共數(shù)據(jù)挖掘影響豬脂肪沉積的基因表達模式與鑒定

發(fā)布時間:2023-08-16 17:43
  肌內(nèi)脂肪(Intramuscular fat,IMF)和皮下脂肪是豬的兩個重要的肉質相關性狀。肌內(nèi)脂肪含量影響p H值、肉色、嫩度、氣味等相關肉質性狀,而皮下脂肪也與豬肉質性狀和經(jīng)濟價值相關聯(lián)。眾所周知,我國地方豬種脂肪沉積能力強于外來引進豬種,其肉質也較好,受到消費者青睞。此外,脂肪沉積受到多基因、信號通路和Lnc RNAs的調控。研究不同豬種脂肪沉積分子機制,為豬的育種提供理論基礎。GEO數(shù)據(jù)庫是世界上最大的公共數(shù)據(jù)庫,并對使用者免費開放。通過對GEO數(shù)據(jù)庫與豬相關的基因芯片和RNA-seq數(shù)據(jù)進行數(shù)據(jù)整合和再分析,有利于闡明不同豬種脂肪沉積的分子機制。在本研究中,通過對大白豬和我國地方豬種的背最長肌(longissimus dorsi,LD)GEO數(shù)據(jù)進行分析,我們篩選出了AMPK、PPAR和脂肪酸代謝三個與豬IMF沉積相關的信號通路。q RT-PCR芯片檢測發(fā)現(xiàn):在大白豬LD中,AMPK信號通路中與脂肪酸氧化相關基因表達上調,PPAR信號通路中與脂肪酸氧化和轉運相關基因表達上調,脂肪酸代謝信號通路中與脂肪酸分解和氧化相關基因表達上調,此外,與脂肪酸合成相關基因表達下調。這些結果...

【文章頁數(shù)】:181 頁

【學位級別】:博士

【文章目錄】:
中文摘要
abstract
英文縮略詞表
前言
第一篇 文獻綜述
    第1章 豬的脂肪沉積研究進展
        1.1 豬肉肉質含義
        1.2 肌肉組成及其與肉質關系
        1.3 IMF含量的影響因素
            1.3.1 遺傳因素對IMF含量的影響
            1.3.2 性別和年齡對IMF含量的影響
            1.3.3 不同組織部位對IMF含量的影響
            1.3.4 營養(yǎng)水平和飼養(yǎng)環(huán)境對IMF含量的影響
            1.3.5 飼養(yǎng)環(huán)境對IMF含量的影響
            1.3.6 小結
        1.4 皮下脂肪與豬胴體性狀的關系
        1.5 豬的脂肪沉積相關基因與基因組學研究進展
            1.5.1 脂肪沉積相關基因
            1.5.2 脂肪沉積相關長鏈非編碼RNA
            1.5.3 脂肪沉積相關信號通路
        1.6 我國地方豬種與外來引進豬種概況
            1.6.1 我國地方豬種概況
            1.6.2 我國外來引進豬種概況
            1.6.2 小結
    第2章 GEO公共數(shù)據(jù)庫及其應用
        2.1 GEO公共數(shù)據(jù)庫
        2.2 基因芯片技術的應用
        2.3 RNA-seq技術的應用
        2.4 qRT-PCR array技術及應用
第二篇 研究內(nèi)容
    第1章 豬肌內(nèi)脂肪GEO數(shù)據(jù)挖掘和基因表達模式鑒定
        1.1 材料
            1.1.1 GEO數(shù)據(jù)收集
            1.1.2 生物信息學和統(tǒng)計分析方法
            1.1.3 動物樣本采集
            1.1.4 主要儀器
            1.1.5 主要試劑
            1.1.6 引物的設計
        1.2 方法
            1.2.1 DEGs的獲得
            1.2.2 差異基因信號通路和GO富集
            1.2.3 IMF含量測定
            1.2.4 RNA提取和q RT-PCR芯片驗證
            1.2.5 Western blot分析
        1.3 結果
            1.3.1 GEO數(shù)據(jù)集中差異表達分析結果
            1.3.2 GEO數(shù)據(jù)中DEGs的通路富集
            1.3.3 不同品種豬LD中IMF含量測定
            1.3.4 不同品種豬LD中 AMPK信號通路的驗證
            1.3.5 AMPK信號通路q RT-PCR芯片DEGs的 GO分析
            1.3.6 不同品種豬LD中 PPAR信號通路的驗證
            1.3.7 PPAR信號通路q RT-PCR芯片DEGs的 GO分析
            1.3.8 不同品種豬LD中脂肪酸代謝信號通路的驗證
            1.3.9 脂肪酸代謝信號通路q RT-PCR芯片DEGs的 GO分析
            1.3.10 三個信號通路共享基因情況分析
            1.3.11 兩個豬種中幾個關鍵蛋白的western blot分析
        1.4 討論
            1.4.1 AMPK信號通路
            1.4.2 PPAR信號通路
            1.4.3 脂肪酸代謝信號通路
            1.4.4 不足與展望
        1.5 小結
    第2章 豬皮下脂肪GEO數(shù)據(jù)挖掘和基因表達模式鑒定
        2.1 材料
            2.1.1 GEO數(shù)據(jù)收集
            2.1.2 生物信息學和統(tǒng)計分析方法
            2.1.3 動物樣本采集
            2.1.4 主要儀器
            2.1.5 主要試劑
            2.1.6 引物的設計
        2.2 方法
            2.2.1 DEGs的獲得
            2.2.2 DEGs信號通路富集和PPI網(wǎng)絡構建
            2.2.3 RNA提取和q RT-PCR芯片驗證
        2.3 結果
            2.3.1 GEO數(shù)據(jù)中差異表達分析結果
            2.3.2 GEO數(shù)據(jù)中DEGs的信號通路富集
            2.3.3 GEO數(shù)據(jù)中DEGs的 PPI網(wǎng)絡
            2.3.4 GEO數(shù)據(jù)中DEGs的共表達分析
            2.3.4 不同品種豬皮下脂肪組織中q RT-PCR芯片結果
        2.4 討論
        2.5 小結
    第3章 豬脂肪沉積相關Lnc RNAs數(shù)據(jù)挖掘
        3.1 材料
            3.1.1 GEO數(shù)據(jù)收集
            3.1.2 生物信息學分析
            3.1.3 動物樣本采集
            3.1.4 主要儀器
            3.1.5 主要試劑
            3.1.6 引物的設計
        3.2 方法
            3.2.1 DEGs和差異表達Lnc RNAs分析
            3.2.2 Lnc RNA-m RNA共表達分析
            3.2.3 RNA提取和q RT-PCR芯片驗證
        3.3 結果
            3.3.1 IMF數(shù)據(jù)差異表達m RNAs結果
            3.3.2 IMF數(shù)據(jù)差異表達Lnc RNAs結果
            3.3.3 IMF數(shù)據(jù)Lnc RNA-m RNA共表達分析結果
            3.3.4 皮下脂肪數(shù)據(jù)差異表達mRNAs結果
            3.3.5 皮下脂肪數(shù)據(jù)差異表達Lnc RNAs結果
            3.3.6 皮下脂肪數(shù)據(jù)Lnc RNA-m RNA共表達分析結果
            3.3.7 脂肪沉積相關的幾個Lnc RNAs的 q RT-PCR檢測結果
            3.3.8 脂肪沉積相關Lnc RNAs與人、小鼠的同源比對分析
        3.4 討論
        3.5 小結
結論
參考文獻
附錄
導師簡介
作者簡介
致謝



本文編號:3842337

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