發(fā)布時間：2023-06-04 00:41

　　本試驗旨在研究丁酸梭菌及其磷壁酸對腸道細(xì)胞作用的分子機(jī)制。以人體結(jié)腸腺癌細(xì)胞HT-29細(xì)胞為試驗對象,將其接種于六孔板上。TX-114法提取丁酸梭菌的磷壁酸,利用紅外光譜(IR)及核磁共振氫譜(NMR)檢測提取磷壁酸的純度；分別用濃度為0,50μg/mL、80μg/mL的磷壁酸處理細(xì)胞24h后,加入FITC標(biāo)記的濃度為109CFU/mL的丁酸梭菌,孵育2h后,于熒光倒置顯微鏡下觀察細(xì)菌的粘附情況；分別用濃度為0、10CFU/mL、103CFU/mL、105CFU/mL、107CFU/mL、109CFU/mL的丁酸梭菌以及濃度為0.10μg/mL、20μg/mL、50μg/mL、80μg/mL、100μg/mL的磷壁酸處理HT-29細(xì)胞12h,Trizol法提取細(xì)胞總RNA,反轉(zhuǎn)錄得到cDNA,利用RT-PCR技術(shù)分析IL-6、IL-8、IL-10、Hsp、TNF-α、NF-κB等免疫因子的表達(dá)水平；分別用濃度為0、10CFU/mL、103CFU/mL、105CFU/mL、107CFU/mL、109CFU/mL的丁酸梭菌以及濃度為0、10μg/mL、20μg/mL、50μg/mL、80μ...

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
符號說明
中文摘要
Abstract
1 前言
    1.1 研究背景
        1.1.1 腸道微生物與宿主的關(guān)系
        1.1.2 腸道微生物對宿主腸道免疫及發(fā)育的影響
        1.1.3 腸道微生物對宿主腸道炎癥的影響
        1.1.4 腸道微生物對宿主代謝的影響
    1.2 丁酸梭菌的應(yīng)用研究進(jìn)展
        1.2.1 丁酸梭菌簡介
        1.2.2 丁酸梭菌的生物學(xué)作用
        1.2.3 丁酸梭菌在治療人類疾病方面的應(yīng)用
        1.2.4 丁酸梭菌在動物生產(chǎn)中的應(yīng)用
        1.2.5 丁酸梭菌作用機(jī)理分析
        1.2.6 丁酸梭菌應(yīng)用中存在的問題
    1.3 磷壁酸的研究進(jìn)展
        1.3.1 磷壁酸對革蘭氏陽性菌的作用
        1.3.2 磷壁酸的生物合成
    1.4 研究內(nèi)容和路線
2 材料與方法
    2.1 丁酸梭菌磷壁酸的提取、純化
        2.1.1 試驗材料
        2.1.2 試驗設(shè)計
        2.1.3 測定方法
        2.1.4 統(tǒng)計分析
    2.2 磷壁酸對丁酸梭菌與HT-29細(xì)胞粘附率的影響
        2.2.1 試驗材料
        2.2.2 試驗設(shè)計
        2.2.3 測定方法
        2.2.4 統(tǒng)計分析
    2.3 丁酸梭菌及其磷壁酸對腸道細(xì)胞免疫因子mRNA表達(dá)量的影響
        2.3.1 試驗材料
        2.3.2 試驗設(shè)計
        2.3.3 測定方法
        2.3.4 統(tǒng)計分析
    2.4 丁酸梭菌及其磷壁酸對HT-29細(xì)胞外蛋白質(zhì)表達(dá)量的影響
        2.4.1 試驗材料
        2.4.2 試驗設(shè)計
        2.4.3 測定方法
        2.4.4 統(tǒng)計分析
3 結(jié)果與分析
    3.1 磷壁酸的提取、純化
    3.2 磷壁酸對丁酸梭菌與HT-29細(xì)胞粘附率的影響
    3.3 丁酸梭菌及其磷壁酸對腸道細(xì)胞免疫因子mRNA表達(dá)水平的影響
        3.3.1 丁酸梭菌及其磷壁酸對IL-8、IL-6、TNF-α表達(dá)水平的影響
        3.3.2 丁酸梭菌及其磷壁酸對HT-29細(xì)胞IL-10、Hsp70表達(dá)水平的影響
        3.3.3 丁酸梭菌及其磷壁酸對HT-29細(xì)胞NF-κB表達(dá)水平的影響
    3.4 丁酸梭菌及其磷壁酸對HT-29細(xì)胞外蛋白質(zhì)表達(dá)量的影響
        3.4.1 丁酸梭菌對細(xì)胞外蛋白質(zhì)IL-6、IL-10、IL-12、TNF-α表達(dá)量的影響
        3.4.2 磷壁酸對細(xì)胞外蛋白質(zhì)IL-6、IL-10、IL-12、TNF-α表達(dá)量的影響
4 討論
    4.1 磷壁酸的提取、純化
    4.2 磷壁酸對丁酸梭菌與HT-29細(xì)胞粘附率的影響
    4.3 丁酸梭菌及其磷壁酸對腸道細(xì)胞免疫因子表達(dá)量的影響
5 結(jié)論與展望
    5.1 總體結(jié)論
    5.2 課題創(chuàng)新點
    5.3 有待進(jìn)一步解決的問題
6 參考文獻(xiàn)
7 致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況



本文編號：3830351