旨在提高對禽流感病毒(avian influenza virus, AIV)檢測效率,及時發(fā)現(xiàn)疫病。本研究通過分析M基因以及H5、H7和H9亞型的HA基因序列保守區(qū)域,設(shè)計并合成了相關(guān)探針和引物,建立了禽流感病毒(AIV)四重?zé)晒釸T-PCR檢測方法,該方法可在檢測禽流感病毒(AIV)的同時,確定病原是否為H5、H7和H9亞型。結(jié)果顯示,該檢測方法耗時短、特異性好、檢測下限達(dá)到10^-5 ng·μL^-1。采用該方法檢測臨床采集的13個活禽交易市場的384份禽咽喉和泄殖腔雙拭子樣品,經(jīng)檢測,其中有60份樣品為流感病毒陽性,且全部是H9亞型,該結(jié)果與行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)方法(NY/T 772—2013)檢測結(jié)果一致,κ值為1 (P<0.001)。本方法能實現(xiàn)對禽流感病毒及H5、H7和H9亞型的高通量快速檢測,將在AIV快速檢測中發(fā)揮重要作用。

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要儀器試劑
    1.2 毒株和核酸提取
    1.3 引物和探針篩選
    1.4 反應(yīng)體系與反應(yīng)條件
    1.5 特異性和靈敏度評估
    1.6 臨床樣品檢測
2 結(jié) 果
    2.1 引物和探針篩選
    2.2 特異性
    2.3 靈敏度
        2.3. 1 M基因檢測引物及探針靈敏度試驗
        2.3.2 H5亞型檢測引物及探針靈敏度試驗
        2.3.3 H7亞型檢測引物及探針靈敏度試驗
        2.3.4 H9亞型檢測引物及探針靈敏度試驗
    2.4 臨床試驗結(jié)果
3 討 論
4 結(jié) 論



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