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捻轉(zhuǎn)血矛線蟲六種酶蛋白體外對(duì)山羊外周血單個(gè)核細(xì)胞功能的影響

發(fā)布時(shí)間:2023-05-31 02:24
  捻轉(zhuǎn)血矛線蟲(Haemonchus contortus)是毛圓科(Trichostrongylidae)血矛屬(Haemonchus)線蟲,是嚴(yán)重危害牛羊等反芻動(dòng)物的一種重要寄生蟲,蟲體主要寄生于宿主第四胃,偶見于小腸,以吸食宿主血液為營養(yǎng)來源。目前,捻轉(zhuǎn)血矛線蟲病雖然在免疫學(xué)研究上有了重要的進(jìn)展,但至今仍無商品化的疫苗出現(xiàn),所以發(fā)掘新的抗原、進(jìn)一步研究蟲體抗原的特性對(duì)于疫苗的開發(fā)尤為重要。本文對(duì)捻轉(zhuǎn)血矛線蟲的谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione peroxidase,HC29)、甘油醛-3-磷酸脫氫酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)、谷氨酸脫氫酶(glutamate dehydrogenase,GDH)、烯醇化酶(enolase,ENO)、磷酸丙糖異構(gòu)酶(triosephosphate isomerase, TPI)及醛縮酶(aldolase, ALD)進(jìn)行了重組表達(dá),進(jìn)而研究這六種重組酶蛋白體外與山羊外周血單個(gè)核細(xì)胞的結(jié)合情況;對(duì)外周血單個(gè)核細(xì)胞細(xì)胞因子表達(dá)和增殖的影響以及對(duì)巨噬細(xì)胞吞噬功能和分泌NO的影響。1捻...

【文章頁數(shù)】:93 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
前言
上篇 文獻(xiàn)綜述
    第一章 捻轉(zhuǎn)血矛線蟲及捻轉(zhuǎn)血矛線蟲病
        1 病原學(xué)
            1.1 蟲體形態(tài)特征
            1.2 生活史
        2 捻轉(zhuǎn)血矛線蟲病
            2.1 癥狀及病理變化
            2.2 流行病學(xué)
            2.3 防治措施
        參考文獻(xiàn)
    第二章 捻轉(zhuǎn)血矛線蟲的免疫機(jī)理及其主要抗原的研究進(jìn)展
        1 捻轉(zhuǎn)血矛線蟲的免疫機(jī)理
            1.1 排斥反應(yīng)機(jī)制
            1.2 細(xì)胞免疫
                1.2.1 肥大細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞
                1.2.2 細(xì)胞因子
            1.3 體液免疫
            1.4 免疫逃避機(jī)制
        2 捻轉(zhuǎn)血矛線蟲抗原的研究進(jìn)展
            2.1 隱蔽抗原
                2.1.1 H11
                2.1.2 H45(P1)
                2.1.3 H-gal-GP
                2.1.4 P 52/46
                2.1.5 胱氨酸蛋白酶
            2.2 天然抗原
                2.2.1 三期幼蟲的表面抗原(Hc-sL3)
                2.2.2 成蟲ES15/24
                2.2.3 55kDa secretory glycoprotein(gp55),66 kDa excretory/secretory antigen
        參考文獻(xiàn)
    第三章 捻轉(zhuǎn)血矛線蟲重要酶的研究進(jìn)展
        1 谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione peroxidase,HC29)
        2 甘油醛-3-磷酸脫氫酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)
        3 烯醇化酶(Enolase)
        4 磷酸丙糖異構(gòu)酶(Triosephosphate isomerase,TPI)
        5 谷氨酸脫氫酶(glutamate dehydrogenase,GDH)
        6 醛縮酶(Aldolase,ALD)
        參考文獻(xiàn)
下篇試驗(yàn)研究
    第四章 捻轉(zhuǎn)血矛線蟲重組蛋白HC29、GAPDH、ENO、TPI、ALD和GDH的表達(dá)及其與山羊外周血單個(gè)核細(xì)胞的結(jié)合試驗(yàn)
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 材料
                1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
                1.1.2 重組質(zhì)粒和菌種
                1.1.3 工具酶與試劑
                1.1.4 本試驗(yàn)所配制溶液試劑
                1.1.5 主要儀器設(shè)備
            1.2 方法
                1.2.1 重組蛋白的表達(dá)
                1.2.2 重組蛋白與外周血單個(gè)核細(xì)胞的結(jié)合試驗(yàn)
                    1.2.2.1 抗血清的制備
                    1.2.2.2 山羊外周血單個(gè)核細(xì)胞的分離和結(jié)合試驗(yàn)
        2 結(jié)果
            2.1 重組蛋白的表達(dá)純化
            2.2 重組蛋白與外周血單個(gè)核細(xì)胞的結(jié)合試驗(yàn)
        3 討論
        參考文獻(xiàn)
        ABSTRACT
    第五章 捻轉(zhuǎn)血矛線蟲重組蛋白HC29、GAPDH、ENO、TPI、ALD和GDH體外對(duì)山羊外周血單個(gè)核細(xì)胞細(xì)因子表達(dá)的影響
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 材料
                1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
                1.1.2 重組蛋白
                1.1.3 主要試劑和儀器設(shè)備
                1.1.4 本實(shí)驗(yàn)所配制溶液試劑
            1.2 方法
                1.2.1 重組蛋白刺激山羊外周血單個(gè)核細(xì)胞細(xì)胞因子的表達(dá)情況
                    1.2.1.1 山羊外周血單個(gè)核細(xì)胞的分離
                    1.2.1.2 細(xì)胞RNA的提取
                    1.2.1.3 cDNA第一鏈的合成
                    1.2.1.4 引物的設(shè)計(jì)
                    1.2.1.5 熒光定量PCR的反應(yīng)體系
        2 結(jié)果
            2.1 不同重組蛋白刺激后細(xì)胞因子的表達(dá)情況
        3 討論
        參考文獻(xiàn)
        ABSTRACT
    第六章 捻轉(zhuǎn)血矛線蟲重組蛋白HC29、GAPDH、ENO、TPI、ALD和GDH對(duì)山羊外周血單個(gè)核細(xì)胞的增殖作用
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 材料
                1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
                1.1.2 重組蛋白
                1.1.3 主要試劑與儀器設(shè)備
                1.1.4 本實(shí)驗(yàn)所配溶液試劑
            1.2 方法
                1.2.1 重組蛋白對(duì)山羊外周血單個(gè)核細(xì)胞的增殖效應(yīng)
        2 結(jié)果
        3 討論
        參考文獻(xiàn)
        ABSTRACT
    第七章 捻轉(zhuǎn)血矛線蟲重組蛋白HC29、GAPDH、ENO、TPI、ALD和GDH對(duì)山羊巨噬細(xì)胞吞噬和分泌NO功能的影響
        摘要
        1 材料與方法
            1.1 材料
                1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
                1.1.2 重組蛋白
                1.1.3 主要試劑和儀器設(shè)備
                1.1.4 本實(shí)驗(yàn)所配制溶液試劑
            1.2 方法
                1.2.1 山羊巨噬細(xì)胞的分離
                1.2.2 巨噬細(xì)胞吞噬功能的測(cè)定
                1.2.3 巨噬細(xì)胞分泌NO的測(cè)定
        2 結(jié)果
            2.1 巨噬細(xì)胞吞噬功能的測(cè)定
            2.2 巨噬細(xì)胞分泌NO的測(cè)定
        3 討論
        參考文獻(xiàn)
        ABSTRACT
全文總結(jié)
致謝



本文編號(hào):3825501

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