副豬嗜血桿菌(Haemophilus parasuis,HPS)是豬上呼吸道常駐菌,通常在機(jī)體免疫能力低下時(shí)發(fā)病,該菌血清型眾多,還有不同程度的耐藥性,不同地區(qū)血清型和耐藥譜差異較大�，F(xiàn)階段預(yù)防HPS多用滅活苗,但其適用地區(qū)較為局限,雖已出現(xiàn)多價(jià)聯(lián)苗,但效果有限仍不能有效阻止該病的發(fā)生。近年來(lái),有關(guān)益生菌的益生功能逐漸被開(kāi)發(fā),在臨床上對(duì)疾病的預(yù)防效果顯著,由此給了我們啟示,在防治HPS病的過(guò)程中,是否可以借助于益生菌通過(guò)日常飼養(yǎng)的改良提高機(jī)體的免疫能力,從而抑制HPS病的發(fā)生。本研究就是尋找可抑制HPS生長(zhǎng)繁殖并且提高機(jī)體免疫能力的益生菌,為HPS病的臨床防治及生豬養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展提供科學(xué)依據(jù),具有重要的現(xiàn)實(shí)意義及應(yīng)用價(jià)值。實(shí)驗(yàn)一:首先從可能含有益生菌的食品、飼料及環(huán)境中分離益生菌,分離純化之后對(duì)菌液采取4種不同處理方式,再利用瓊脂擴(kuò)散抑菌實(shí)驗(yàn)、紙片法抑菌實(shí)驗(yàn)以及生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)篩選能夠有效抑制HPS生長(zhǎng)的益生菌菌株,并進(jìn)行鑒定。結(jié)果顯示:1.利用MRS、TSB、TSA等培養(yǎng)基分離出多株益生菌,篩選出3株能夠有效抑制HPS生長(zhǎng)的益生菌菌株。2.通過(guò)對(duì)有效菌株進(jìn)行革蘭氏染色、PCR鑒定及測(cè)序...

【文章頁(yè)數(shù)】：60 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 HPS概述
        1.1.1 HPS血清型及流行情況
        1.1.2 HPS毒力因子研究進(jìn)展
        1.1.3 HPS與信號(hào)通路
        1.1.4 HPS的侵染機(jī)制
    1.2 益生菌概述
        1.2.1 益生菌免疫機(jī)制的研究現(xiàn)狀
        1.2.2 常見(jiàn)益生菌的應(yīng)用
    1.3 研究目的與意義
第二章 有效抑制5型HPS生長(zhǎng)益生菌的篩選及鑒定
    2.1 試驗(yàn)材料
        2.1.1 菌株來(lái)源
        2.1.2 主要試驗(yàn)儀器及設(shè)備
        2.1.3 試驗(yàn)藥品與試劑
        2.1.4 主要試劑、培養(yǎng)基及實(shí)驗(yàn)用品的制備
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 5型HPS實(shí)驗(yàn)室凍存菌株的復(fù)蘇及菌種與血清型的鑒定
        2.2.2 益生菌的分離純化
        2.2.3 抑菌試驗(yàn)分組及處理
        2.2.4 瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)
        2.2.5 紙片擴(kuò)散試驗(yàn)
        2.2.6 生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)
        2.2.7 有效菌株的鑒定
        2.2.8 序列測(cè)定及分析
        2.2.9 菌濃度與OD600 關(guān)系的建立
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 實(shí)驗(yàn)室凍存5型HPS菌株的菌種與血清型鑒定結(jié)果
        2.3.2 益生菌的分離純化及革蘭氏染色結(jié)果
        2.3.3 瓊脂擴(kuò)散抑菌試驗(yàn)結(jié)果
        2.3.4 紙片擴(kuò)散抑菌試驗(yàn)結(jié)果
        2.3.5 生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)結(jié)果
        2.3.6 有效菌株的鑒定結(jié)果
        2.3.7 測(cè)序結(jié)果及序列分析
        2.3.8 菌液濃度與OD600 的關(guān)系
    2.4 討論
    2.5 小結(jié)
第三章 益生菌對(duì)5型HPS感染小鼠的預(yù)防作用研究
    3.1 試驗(yàn)材料
        3.1.1 菌株來(lái)源
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        3.1.3 主要試驗(yàn)儀器與設(shè)備
        3.1.4 試驗(yàn)試劑與用品
        3.1.5 主要試劑和培養(yǎng)基的配制
    3.2 試驗(yàn)方法
        3.2.1 菌液的制備
        3.2.2 動(dòng)物分組及處理
        3.2.3 小鼠體重及臟器解剖學(xué)檢查
        3.2.4 小鼠組織病理學(xué)檢查
        3.2.5 小鼠外周血淋巴細(xì)胞的提取
        3.2.6 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)小鼠外周血T淋巴細(xì)胞亞群
        3.2.7 小鼠外周血血清中IgA及 s IgA的檢測(cè)
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 小鼠的臨床表現(xiàn)及體重變化
        3.3.2 剖檢病理變化
        3.3.3 小鼠組織病理學(xué)檢查
        3.3.4 小鼠T淋巴細(xì)胞亞群的變化
        3.3.5 小鼠外周血中單核細(xì)胞及中性粒細(xì)胞的百分比
        3.3.6 小鼠外周血中IgA及sIgA的變化
    3.4 討論
    3.5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝



本文編號(hào)：3818011