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LPS和沙門氏菌刺激時雞腦內(nèi)TLR4的表達規(guī)律研究

發(fā)布時間:2023-05-05 18:32
  由于血腦屏障(Blood Brain Barrier, BBB)的存在,中樞神經(jīng)系統(tǒng)(Central Nervous System, CNS)被認為是免疫特免區(qū),CNS內(nèi)炎癥感染與免疫反應(yīng)一直以來都備受關(guān)注和爭議。Toll樣受體(Toll like receptors, TLRs)的發(fā)現(xiàn)促進了人們對腦內(nèi)炎癥反應(yīng)機制的認識,吸引了眾多研究者的目光。TLR4是第一個被發(fā)現(xiàn)的TLRs,廣泛分布于機體的組織細胞。有研究表明TLR4在哺乳動物CNS內(nèi)膠質(zhì)細胞上表達,并證實在炎癥過程中,膠質(zhì)細胞通過TLR4與配體結(jié)合而發(fā)揮作用。目前有關(guān)TLR4與家禽腦內(nèi)炎癥和免疫反應(yīng)的關(guān)系缺乏系統(tǒng)研究報道。因此,本項目擬以2日齡雛雞作為試驗對象,研究脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)和沙門氏菌刺激對腦組織結(jié)構(gòu)和BBB超微結(jié)構(gòu)的影響,同時檢測雞腦組織內(nèi)TLR4的分布特征以及表達變化,為揭示腦內(nèi)天然免疫反應(yīng)機制奠定基礎(chǔ)。主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下: 1.LPS和沙門氏菌刺激對腦組織結(jié)構(gòu)的影響 本試驗采用LPS和沙門氏菌腹腔注射2日齡雛雞,探究細菌及其產(chǎn)物外周刺激后,腦組織結(jié)構(gòu)的變化。結(jié)果顯示:與對照...

【文章頁數(shù)】:77 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
基金項目資助
摘要
Abstract
縮略語表
1 前言
    1.1 立題依據(jù)
    1.2 文獻綜述
        1.2.1 CNS免疫的研究現(xiàn)狀
        1.2.2 TLRs的作用及其與天然免疫的關(guān)系
            1.2.2.1 TLRs的發(fā)現(xiàn)、基本結(jié)構(gòu)和基因定位
            1.2.2.2 TLRs在生物體內(nèi)的分布及其生物學功能
            1.2.2.3 TLR4的信號通路研究
            1.2.2.4 TLRs與CNS的關(guān)系
        1.2.3 雞TLRs研究進展
        1.2.4 血腦屏障的研究進展
            1.2.4.1 血腦屏障的發(fā)現(xiàn)、結(jié)構(gòu)和功能
            1.2.4.2 LPS對血腦屏障結(jié)構(gòu)和功能的影響
    1.3 本研究的目的和意義
2 材料與方法
    2.1 試驗動物與器材
        2.1.1 試驗動物及處理
        2.1.2 主要儀器
        2.1.3 主要試劑
        2.1.4 主要溶液和試劑的配制
    2.2 試驗方法
        2.2.1 樣品采集
        2.2.2 石蠟切片制作
        2.2.3 蘇木精-伊紅(HE)染色
        2.2.4 兩步法免疫組化染色
        2.2.5 電鏡切片制作
        2.2.6 ELISA檢測
        2.2.7 圖像采集及數(shù)據(jù)分析
3 結(jié)果
    3.1 LPS和沙門氏菌外周刺激后不同時間點腦組織結(jié)構(gòu)的變化
        3.1.1 LPS外周刺激后腦組織結(jié)構(gòu)的變化
        3.1.2 沙門氏菌外周刺激后腦組織結(jié)構(gòu)的變化
    3.2 沙門氏菌外周刺激致腦內(nèi)BBB超微結(jié)構(gòu)的變化
        3.2.1 沙門氏菌刺激對雞大腦內(nèi)BBB超微結(jié)構(gòu)的影響
        3.2.2 沙門氏菌刺激對雞小腦內(nèi)BBB超微結(jié)構(gòu)的影響
    3.3 TLR4在雞腦組織的分布特征
        3.3.1 TLR4在雞小腦內(nèi)的分布特征
        3.3.2 TLR4在雞大腦內(nèi)的分布特征
    3.4 LPS和沙門氏菌刺激對腦內(nèi)免疫因子表達的影響
        3.4.1 LPS和沙門氏菌刺激對腦內(nèi)TLR4表達的影響
        3.4.2 LPS和沙門氏菌刺激對小膠質(zhì)細胞活性的影響
        3.4.3 LPS和沙門氏菌刺激對內(nèi)皮細胞活性的影響
        3.4.4 LPS和沙門氏菌刺激對腦內(nèi)炎癥因子表達的影響
4 討論
    4.1 LPS和沙門氏菌外周刺激對腦組織結(jié)構(gòu)的影響
    4.2 沙門氏菌外周刺激對血腦屏障超微結(jié)構(gòu)的影響
    4.3 TLR4與雞腦內(nèi)的天然免疫
        4.3.1 TLR4在雞腦內(nèi)的分布
        4.3.2 TLR4與BBB之間的關(guān)系
    4.4 LPS和沙門氏菌外周刺激對腦內(nèi)免疫相關(guān)因子表達的影響
        4.4.1 LPS和沙門氏菌外周刺激對TLR4表達的影響
        4.4.2 LPS和沙門氏菌外周刺激對小膠質(zhì)細胞活性的影響
        4.4.3 LPS和沙門氏菌外周刺激對微血管內(nèi)皮細胞活性的影響
        4.4.4 LPS和沙門氏菌外周刺激對腦內(nèi)炎癥因子表達的影響
結(jié)論
參考文獻
致謝
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附錄2 論文發(fā)表情況



本文編號:3808172

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