生物鐘基因相互作用形成轉(zhuǎn)錄翻譯負(fù)反饋環(huán),構(gòu)成生物鐘系統(tǒng)的分子基礎(chǔ)。在生物鐘系統(tǒng)的調(diào)控作用下,動(dòng)物行為活動(dòng)和部分基因的表達(dá)呈現(xiàn)周期約為24h節(jié)律性變化。光照、溫度等環(huán)境因子的改變會(huì)破壞生物鐘系統(tǒng)穩(wěn)定,影響動(dòng)物的繁殖能力。顆粒細(xì)胞是卵巢卵泡內(nèi)的重要體細(xì)胞,其分泌的雌激素(E2)可調(diào)控動(dòng)物的發(fā)情周期,據(jù)研究E2的分泌受生物鐘核心基因Bmal1的調(diào)控,此外瘦素通過與瘦素受體(Lepr)結(jié)合可調(diào)節(jié)E2的分泌。通過生物信息學(xué)軟件分析我們發(fā)現(xiàn)Lepr的啟動(dòng)子上含有多個(gè)Bmal1/Clock二聚體潛在的結(jié)合位點(diǎn),但Lepr的表達(dá)是否受生物鐘系統(tǒng)的調(diào)控及其表達(dá)的變化是否會(huì)影響顆粒細(xì)胞E2的分泌仍不清楚。因此本實(shí)驗(yàn)探究光照周期紊亂是否會(huì)通過影響卵巢Lepr的表達(dá)對E2的分泌產(chǎn)生影響。首先通過ELISA和RT-qPCR方法分析12h光照/12h黑暗條件下小鼠卵巢E2分泌和Lepr表達(dá)節(jié)律,并利用ELISA、RT-qPCR和Western blot檢測持續(xù)光照時(shí)E2濃度及Bmal1、Lepr的表達(dá)變化;利用Lepr siRNA處理顆粒細(xì)胞,檢測細(xì)胞培養(yǎng)基中E2濃度,隨后用不同濃度的瘦素處理顆粒細(xì)胞,檢測E2合...

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
前言
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 顆粒細(xì)胞和E
        1.1.1 顆粒細(xì)胞增殖調(diào)控
        1.1.2 顆粒細(xì)胞增殖對卵母細(xì)胞發(fā)育的影響
        1.1.3 顆粒細(xì)胞內(nèi)E2的合成
        1.1.4 雌激素功能
    1.2 生物鐘系統(tǒng)
        1.2.1 生物鐘基因及相互作用機(jī)制
        1.2.2 轉(zhuǎn)錄后和翻譯后修飾對分子生物鐘的影響
    1.3 生物鐘系統(tǒng)對生理功能的調(diào)節(jié)作用
        1.3.1 生物鐘對動(dòng)物繁殖能力的影響
        1.3.2 生物鐘對能量代謝的影響
        1.3.3 生物鐘對心血管功能的影響
        1.3.4 生物鐘對免疫系統(tǒng)的影響
    1.4 光照周期紊亂影響動(dòng)物的生理功能
        1.4.1 光照周期紊亂對繁殖性能的影響
        1.4.2 光照周期紊亂對癌癥發(fā)生的影響
        1.4.3 光照周期紊亂對代謝的影響
    1.5 瘦素對動(dòng)物繁殖能力的影響
        1.5.1 瘦素對下丘腦-垂體的影響
        1.5.2 瘦素對卵巢功能的影響
        1.5.3 瘦素對早期胚胎發(fā)育的影響
        1.5.4 瘦素對胎兒發(fā)育的影響
        1.5.5 Lepr對卵巢功能的影響
    1.6 目的與意義
實(shí)驗(yàn)研究
    前言
    第二章 光照周期紊亂對E2分泌的影響
        2.1 材料與方法
            2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
            2.1.2 實(shí)驗(yàn)方法
            2.1.3 數(shù)據(jù)分析
        2.2 結(jié)果與分析
        2.3 討論
        2.4 小結(jié)
    第三章 Lepr對E2分泌的影響
        3.1 材料與方法
            3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
            3.1.2 實(shí)驗(yàn)方法
            3.1.3 數(shù)據(jù)分析
        3.2 結(jié)果與分析
            3.2.1 干擾Lepr抑制E2的分泌
            3.2.2 瘦素對E2合成相關(guān)基因表達(dá)的影響
            3.2.3 干擾Lepr對瘦素功能的影響
        3.3 討論
        3.4 小結(jié)
    第四章 Bmal1對顆粒細(xì)胞Lepr表達(dá)的調(diào)控作用
        4.1 材料與方法
            4.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
            4.1.2 實(shí)驗(yàn)方法
            4.1.3 數(shù)據(jù)分析
        4.2 結(jié)果與分析
            4.2.1 Lepr啟動(dòng)子序列分析
            4.2.2 干擾Bmal1抑制顆粒細(xì)胞E2分泌和Lepr表達(dá)
            4.2.3 干擾Bmal1對瘦素功能的影響
        4.3 討論
        4.4 小結(jié)
結(jié)論與創(chuàng)新點(diǎn)
    結(jié)論
    創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
縮略詞
附錄
致謝
個(gè)人簡介



本文編號：3775961