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利用DGE技術(shù)篩選雞×鵪鶉雜交種胚胎早期死亡相關(guān)基因

發(fā)布時(shí)間:2023-03-24 00:53
  雞與鵪鶉之間的雜交屬于非常典型的屬間遠(yuǎn)緣雜交,其雜交后代早期胚胎出現(xiàn)雌性大量死亡,且主要集中在孵化的第3-5天,該時(shí)間段剛好與其性別分化的時(shí)間相吻合,已有研究表明性別分化相關(guān)基因與其死亡存在一定相關(guān)性,與性別分化的調(diào)控機(jī)制比較復(fù)雜,參與的基因也很繁多,通過(guò)建立數(shù)字表達(dá)譜,篩選該時(shí)期特異表達(dá)的與性別分化相關(guān)的基因,為更好的研究雞與鵪鶉雜交后代在胚胎發(fā)育早期雌性胚胎死亡和性別分化的機(jī)理奠定基礎(chǔ)。 因此,本研究以雞、鵪鶉及其雜交后代發(fā)育早期的胚胎為試驗(yàn)材料,通過(guò)形態(tài)學(xué)觀察和分子生物學(xué)方法對(duì)其進(jìn)行準(zhǔn)確的性別鑒定后,采用Illumina測(cè)序技術(shù)對(duì)孵化到第3天的雞、鵪鶉、雜交胚胎進(jìn)行高通量測(cè)序,分別構(gòu)建了雌性和雄性個(gè)體發(fā)育第3天的6個(gè)DGE文庫(kù),篩選它們之間的差異表達(dá)基因,分析其在表達(dá)趨勢(shì)與測(cè)序結(jié)果是否一致,并對(duì)與性別分化相關(guān)的基因進(jìn)行分析,旨在對(duì)比其同雞與鵪鶉雜交后代早期胚胎死亡之間存在的關(guān)系,具體研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下: (1)采集雞、鵪鶉及其雜交種孵化第3-4.5天(每隔12h采樣)的胚胎,通過(guò)體式顯微鏡觀察發(fā)育各時(shí)期的形態(tài)。結(jié)果表明,雜交胚胎發(fā)育各時(shí)期的形態(tài)變化介于其父本雞與母本鵪鶉的中間,各...

【文章頁(yè)數(shù)】:73 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
石河子大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文導(dǎo)師評(píng)閱表
摘要
Abstract
前言
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1. 雞與鵪鶉屬間遠(yuǎn)緣雜交研究進(jìn)展
        1.1 遠(yuǎn)緣雜交概述
        1.2 雞與鵪鶉屬間雜交概述
        1.3 雞與鵪鶉屬間雜交種死亡的可能原因概述
    2. 家禽胚胎形態(tài)學(xué)研究進(jìn)展
        2.1 家雞胚胎發(fā)育形態(tài)學(xué)概述
        2.2 鵪鶉胚胎發(fā)育形態(tài)學(xué)概述
    3. 家禽性別控制研究進(jìn)展
        3.1 家雞性別分化研究進(jìn)展
        3.2 家禽胚胎的分子鑒定研究進(jìn)展
    4. 數(shù)字基因表達(dá)譜
    5. 本研究目的與意義
第二章 雞、鵪鶉及其屬間雜交早期胚胎形態(tài)學(xué)觀察
    1 材料和方法
        1.1 材料
        1.2 胚胎采集及形態(tài)學(xué)觀察
    2 結(jié)果與分析
        2.1 3-4.5 天雞胚胎形態(tài)觀察
        2.2 3-4.5 天鵪鶉胚胎胚胎形態(tài)觀察
        2.3 3-4.5 天雜交種胚胎形態(tài)觀察
    3 討論
第三章 數(shù)字表達(dá)譜篩選性別分化相關(guān)差異表達(dá)基因基因
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 試劑與儀器
        1.3 試驗(yàn)方法
        1.4 數(shù)字表達(dá)譜實(shí)驗(yàn)原理
        1.5 數(shù)字基因表達(dá)譜生物信息學(xué)分析
        1.6 數(shù)字基因表達(dá)譜(DGE)測(cè)序結(jié)果驗(yàn)證
    2 結(jié)果與分析
        2.1 胚胎組織性別鑒定
        2.2 總 RNA 提取結(jié)果
        2.3 雌雞與雄雞數(shù)字表達(dá)譜的建立及差異基因的篩選
        2.4 雌鵪鶉與雄鵪鶉數(shù)字表達(dá)譜的建立及差異基因的篩選
        2.5 雌雜交禽與雄雜交禽數(shù)字表達(dá)譜的建立及差異基因的篩選
        2.6 雌雞與雌雜交禽數(shù)字表達(dá)譜的建立及差異基因的篩選
        2.7 雌鵪鶉與雌雜交禽數(shù)字表達(dá)譜的建立及差異基因的篩選
    3 討論
        3.1 雌雞與雄雞數(shù)字表達(dá)譜的建立及差異基因的篩選的分析
        3.2 雌鵪鶉與雄鵪鶉數(shù)字表達(dá)譜的建立及差異基因的篩選的分析
        3.3 雌雜交禽與雄雜交禽數(shù)字表達(dá)譜的建立及差異基因的篩選的分析
        3.4 雌雞與雌雜交禽數(shù)字表達(dá)譜的建立及差異基因的篩選的分析
        3.5 雌鵪鶉與雌雜交禽數(shù)字表達(dá)譜的建立及差異基因的篩選的分析
全文結(jié)論
創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)介



本文編號(hào):3769105

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