孕酮是一種性激素，它是一種反應(yīng)卵巢活動(dòng)狀態(tài)的精確指示劑。監(jiān)測(cè)乳汁孕酮含量是預(yù)防和治療奶牛繁殖障礙性疾病的最有效手段。孕酮在奶牛體內(nèi)含量比較低，需要有高效、靈敏和特異性的檢測(cè)方法才能準(zhǔn)確測(cè)得。本研究在優(yōu)化的孕酮生物傳感器的基礎(chǔ)上，結(jié)合商品化的ELISA試劑盒開(kāi)展了對(duì)發(fā)情的、妊娠的、繁殖障礙疾病的奶牛血漿和乳汁中的生殖激素，尤其是對(duì)孕酮進(jìn)行檢測(cè)，旨在了解優(yōu)化的孕酮生物傳感器的檢測(cè)性能，為奶牛臨床應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。 首先，本實(shí)驗(yàn)選用孕酮衍生物孕酮-11α-半琥珀酸酯(11α-hydroxyprogesteronehemisuccinate)作為半抗原與卵清白蛋白(OVA)在偶聯(lián)劑二環(huán)己基碳二亞胺(DDC)的作用下制備成完全抗原(P4-OVA)；通過(guò)免疫學(xué)檢測(cè)證明偶聯(lián)完全抗原成功。以此為基礎(chǔ)優(yōu)化了孕酮免疫生物傳感器的反應(yīng)條件：生物傳感器檢測(cè)孕酮的線(xiàn)性范圍在0.31⁵0ng/mL，檢測(cè)限為0.31ng/mL。生物傳感器的曲線(xiàn)方程為： y=-4.9461x+8.7982(R2=0.9932)。傳感器檢測(cè)的選擇特異性較好，與皮質(zhì)酮、皮質(zhì)醇、雄烯二酮無(wú)交叉反應(yīng)。 其次，本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用...

【文章頁(yè)數(shù)】：63 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
目錄
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 孕酮
        1.1.1 孕酮的基本性質(zhì)和特性
        1.1.2 孕酮在體內(nèi)的合成與濃度
        1.1.3 孕酮的生理作用
        1.1.4 孕酮的檢測(cè)
        1.1.5 孕酮檢測(cè)的國(guó)內(nèi)外研究進(jìn)展
    1.2 生物傳感器
        1.2.1 生物傳感器的組成
        1.2.2 生物傳感器的分類(lèi)
        1.2.3 生物傳感器的應(yīng)用
    1.3 奶牛生殖激素變化規(guī)律的研究進(jìn)展
        1.3.1 奶牛生殖激素變化的變化規(guī)律研究
        1.3.2 奶牛生殖激素的來(lái)源生理作用及變化規(guī)律
    1.4 奶牛乏情的發(fā)生機(jī)理研究進(jìn)展
        1.4.1 奶牛產(chǎn)后發(fā)情的生殖激素調(diào)控作用
        1.4.2 奶牛產(chǎn)后乏情的主要類(lèi)型
    1.5 研究目的
第二章 孕酮免疫生物傳感器的優(yōu)化
    2.1 材料
        2.1.1 主要儀器設(shè)備
        2.1.2 主要試劑
    2.2 方法
        2.2.1 完全檢測(cè)抗原制備及鑒定
        2.2.2 乳汁標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的測(cè)定
        2.2.3 生物傳感器的靈敏度
        2.2.4 生物傳感器的精確度
        2.2.5 生物傳感器的準(zhǔn)確度
        2.2.6 生物傳感器的特異性
        2.2.7 生物傳感器的穩(wěn)定性
        2.2.8 實(shí)驗(yàn)樣品的準(zhǔn)備及測(cè)定
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 完全抗原免疫活性鑒定結(jié)果
        2.3.2 生物傳感器的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)
        2.3.3 生物傳感器的靈敏度
        2.3.4 生物傳感器的精確度
        2.3.5 生物傳感器的準(zhǔn)確度
        2.3.6 生物傳感器的特異性
        2.3.7 生物傳感器的穩(wěn)定性
        2.3.8 生物傳感器的樣品測(cè)定實(shí)驗(yàn)
    2.4 討論
        2.4.1 生物傳感器的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)
        2.4.2 生物傳感器的靈敏度
        2.4.3 生物傳感器的特異性
        2.4.4 生物傳感器的準(zhǔn)確性
        2.4.5 生物傳感器的精確度
        2.4.6 生物傳感器的穩(wěn)定性
    2.5 小結(jié)
第三章 孕酮免疫生物傳感器的應(yīng)用
    3.1 材料與方法
        3.1.1 主要儀器
        3.1.2 主要試劑
        3.1.3 試驗(yàn)動(dòng)物分組與樣品處理
        3.1.4 主要檢測(cè)項(xiàng)目和方法
        3.1.5 數(shù)據(jù)處理
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 妊娠奶牛血漿生殖激素和乳汁孕酮變化
        3.2.2 發(fā)情奶牛與繁殖障礙性疾病奶牛血漿生殖激素與乳汁孕酮變化
    3.3 討論
        3.3.1 妊娠奶牛生殖激素的變化
        3.3.2 發(fā)情奶牛生殖激素的變化
        3.3.3 乏情奶牛生殖激素的變化
    3.4 小結(jié)
第四章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
附錄
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3764352