產(chǎn)肉量和肉質(zhì)是豬肉生產(chǎn)中極其重要的經(jīng)濟性狀。肉質(zhì)方面,脂肪的含量與肉的嫩度、風味和多汁性相關(guān),并影響豬的整體胴體質(zhì)量,是生豬生產(chǎn)中影響經(jīng)濟效益的重要因素。前體脂肪細胞分化及成熟脂肪細胞內(nèi)脂質(zhì)積累程度顯著影響脂肪含量。項目組前期研究成果表明,骨形態(tài)發(fā)生蛋白2(BMP2)可以顯著促進豬前體脂肪細胞分化,而在此過程中,前體脂肪細胞中有大量lncRNAs的表達發(fā)生顯著變化,但它們的具體作用和機制尚不明確。因此,本研究首先體外分離培養(yǎng)豬前體脂肪細胞,在細胞分化過程中添加50ng/ml的BMP2后,利用高通量測序技術(shù)篩選出受BMP2調(diào)控的差異表達lncRNA,并通過生物信息學預測及構(gòu)建lncRNA-miRNA-mRNA互作網(wǎng)絡(luò)。隨后分別通過雙熒光素酶報告系統(tǒng)、qRT-PCR、油紅O染色等方法明確候選lncRNA/miRNA/mRNA的相互調(diào)控關(guān)系及其對前體脂肪細胞分化、脂質(zhì)生成與沉積的影響,結(jié)果表明:在132個受BMP2調(diào)控而差異表達的lncRNA中,有61個表達上調(diào),71個下調(diào)。LncRNA潛在的靶基因GO功能富集在組織發(fā)育、器官形態(tài)發(fā)生和細胞分化等功能。KEGG通路則富集于mTOR信號通路、賴...

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
abstract
引言
第一篇 文獻綜述
    第1章 脂肪的生成及其影響因素
        1 脂肪的形成及其與肉品質(zhì)的關(guān)系
        2 影響脂肪沉積的因素
            2.1 畜禽品種
            2.2 營養(yǎng)水平與管理
            2.3 前體脂肪細胞分化
    第2章 LncRNA及 miRNA在脂肪形成中的作用
        1 LncRNA的來源和潛在功能
        2 miRNA的來源和潛在功能
        3 ceRNA機制的產(chǎn)生和研究進展
        4 LncRNA在前體脂肪細胞分化和脂肪形成中的作用
第二篇 研究內(nèi)容
    第1章 BMP2 誘導的豬前體脂肪細胞差異lncRNA表達譜的構(gòu)建及分析
        1 材料與方法
            1.1 實驗材料
            1.2 方法
        2 結(jié)果
            2.1 RNA質(zhì)量檢測
            2.2 整體測序數(shù)據(jù)質(zhì)量評估
            2.3 LncRNA鑒定
            2.4 差異表達lncRNA分析與靶基因篩選
            2.5 靶基因的GO分析
            2.6 通路顯著性富集分析
            2.7 LncRNA-miRNA-mRNA互作預測分析與篩選
            2.8 差異表達lncRNA q-PCR驗證結(jié)果
        3 討論
        4 小結(jié)
    第2章 LncRNA 00046716 對豬前體脂肪細胞分化的影響
        1 材料與方法
            1.1 實驗材料
            1.2 實驗方法
        2 結(jié)果
            2.1 LncRNA 00046716、FASN在豬前體脂肪細胞分化過程中表達趨勢
            2.2 LncRNA 00046716 在豬前體脂肪細胞中的轉(zhuǎn)染效率檢測結(jié)果
            2.4 LncRNA00046716 對豬前體脂肪細胞分化關(guān)鍵基因的影響..
            2.5 LncRNA 00046716 對豬脂肪細胞甘油三酯積累的影響
            2.6 備選lncRNA-miRNA-mRNA互作網(wǎng)絡(luò)生物信息學預測
            2.7 LncRNA 00046716 可能競爭性結(jié)合miRNA-149 影響FASN的表達
            2.8 miRNA-149對FASN蛋白表達的影響
            2.9 雙熒光素酶實驗驗證lncRNA00046716-miRNA-149-FASN調(diào)控網(wǎng)絡(luò)
        3 討論
        4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻
導師簡介
作者簡介及在學期間所取得的科研成果
致謝



本文編號：3758389