發(fā)布時間：2023-02-13 14:44

　　本試驗旨在探究生長分化因子9(GDF9)對卵丘細(xì)胞擴展相關(guān)基因和激素受體基因表達(dá)量及激素分泌的影響,為GDF9在綿羊卵泡發(fā)育中的作用提供依據(jù)。以綿羊卵丘細(xì)胞為研究對象,通過在低血清細(xì)胞培養(yǎng)液中添加不同濃度(0、50、100、200、400 ng/mL)的GDF9,培養(yǎng)綿羊卵丘細(xì)胞48 h后,提取細(xì)胞總RNA,利用實時熒光定量PCR技術(shù),以β-actin為內(nèi)參基因,檢測卵丘細(xì)胞擴展相關(guān)基因透明質(zhì)酸合酶2(HAS2)、前列腺素內(nèi)過氧化物合酶2(PTGS2)、穿透素3(PTX3)及激素受體相關(guān)基因卵泡刺激素受體(FSHR)、促黃體生成素受體(LHR)和雌激素受體(E₂R)的mRNA相對表達(dá)量;利用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定培養(yǎng)液中卵丘細(xì)胞分泌的雌二醇(E₂)和孕酮(P₄)含量。結(jié)果顯示:在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加200 ng/mL GDF9時,HAS2、PTX3、FSHR、E₂R和LHR的mRNA相對表達(dá)量極顯著高于對照組與其他處理組(P<0.01);PTGS2 mRNA相對表達(dá)量極顯著高于對照組、5...

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要試劑及GDF9濃儲液配制
    1.2 主要儀器
    1.3 方法
        1.3.1 卵丘細(xì)胞收集及培養(yǎng)
        1.3.2 卵丘細(xì)胞消化傳代
        1.3.3 細(xì)胞處理
        1.3.4 細(xì)胞RNA提取
        1.3.5 引物設(shè)計與合成
        1.3.6 實時熒光定量PCR
        1.3.7 酶聯(lián)免疫(ELISA)檢測
    1.4 統(tǒng)計分析
2 結(jié) 果
    2.1 GDF9對綿羊卵丘細(xì)胞擴展相關(guān)基因表達(dá)量的影響
    2.2 GDF9對綿羊卵丘細(xì)胞激素受體基因表達(dá)量的影響
    2.3 GDF9對綿羊卵丘細(xì)胞分泌E2、P4的影響
3 討 論
4 結(jié) 論



本文編號：3741914