妊娠期能量限飼對子代成年大鼠胰島β細胞的影響
發(fā)布時間:2023-01-08 19:17
在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上,由于母畜在妊娠期間飼料供給不足或者飼料短缺,容易造成母畜能量攝入不足,從而導致胎兒宮內(nèi)生長發(fā)育遲緩(Intrauterine growthretardation,IUGR)。IUGR仔畜的出生體重降低,胰腺重量降低,并在后天的生長發(fā)育過程中,容易造成家畜瘦肉品質(zhì)下降并產(chǎn)生相關(guān)代謝性疾病。目前,多種IUGR動物模型表明母體妊娠期能量攝入不足能夠?qū)е翴UGR子代胰島β細胞的生長發(fā)育受損和胰島素分泌功能紊亂,主要表現(xiàn)為β細胞面積減小、β細胞質(zhì)量和數(shù)量降低、胰島素分泌降低以及PDX-1(胰腺十二指腸同源框因子-1)的表達量降低。然而,大多數(shù)IUGR限飼模型的研究主要在母體妊娠期和哺乳期,并且集中在胎兒和新生兒的胰島β細胞。所以,胎兒先天能量限飼所造成的胰島損傷是否能通過后天正常飲食的彌補而有一定程度的恢復還不清楚,也就是說,IUGR子代在哺乳期和后天恢復正常能量攝入對胰島β細胞是否有持續(xù)性的影響以及相關(guān)調(diào)控機制還有待研究。因此,本試驗采用Sprague Dawley(SD)大鼠為試驗材料,探究IUGR子代出生后恢復正常能量攝入對其成年胰島β細胞形態(tài)和胰島素分泌功能的影響。本試驗旨...
【文章頁數(shù)】:67 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第1章 文獻綜述
1.1 宮內(nèi)發(fā)育遲緩(IUGR)概述
1.1.1 IUGR產(chǎn)生原因
1.1.2 IUGR動物模型
1.2 IUGR對后代健康及組織器官的影響
1.3 胰島β細胞生長發(fā)育相關(guān)調(diào)控因子
1.3.1 胰腺十二指腸同源框因子-1(PDX-1)
1.3.2 胰島素樣生長因子(IGF)
1.3.3 成纖維細胞生長因子(FGF)
1.3.4 表皮生長因子(EGF)
1.3.5 血管內(nèi)皮生長因子A(VEGFa)
1.4 胰島素分泌相關(guān)調(diào)控因子
1.4.1 葡萄糖轉(zhuǎn)運
1.4.2 ATP/ADP比值
1.4.3 KATP通道
1.4.4 Ca~(2+)通道
1.4.5 胰島素基因
1.5 研究現(xiàn)狀
第2章 引言
第3章 宮內(nèi)發(fā)育遲緩子代大鼠模型建立
3.1 試驗材料
3.1.1 試驗動物
3.1.2 主要儀器
3.2 試驗方法
3.3 數(shù)據(jù)處理與分析
3.4 結(jié)果
3.4.1 0~12周的每周大鼠體重
3.4.2 12周齡大鼠的組織重量
3.5 討論
3.6 小結(jié)
第4章 IUGR對成年子代大鼠胰島素分泌的影響及相關(guān)調(diào)控機制
4.1 試驗材料
4.1.1 試驗動物
4.1.2 主要試劑及耗材
4.1.3 主要儀器
4.1.4 溶液配制
4.2 試驗方法
4.2.1 腹腔注射葡萄糖耐量試驗(IPGTT)
4.2.2 大鼠血漿胰島素酶聯(lián)免疫分析(ELISA)
4.2.3 大鼠原代胰島細胞的分離和純化
4.2.4 提取胰島細胞總RNA
4.2.5 引物序列及合成
4.2.6 逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA
4.2.7 PCR擴增反應(yīng)
4.2.8 瓊脂糖凝膠電泳
4.2.9 實時熒光定量PCR反應(yīng)(RT-qPCR)
4.3 數(shù)據(jù)處理與分析
4.4 結(jié)果
4.4.1 12周齡大鼠血糖和血漿胰島素濃度變化
4.4.2 胰島素分泌相關(guān)調(diào)控因子的表達變化
4.5 討論
4.6 小結(jié)
第5章 IUGR對成年子代大鼠胰島β細胞形態(tài)的影響及相關(guān)調(diào)控機制
5.1 試驗材料
5.1.1 試驗動物
5.1.2 主要試劑
5.1.3 主要儀器
5.1.4 溶液配制
5.2 試驗方法
5.2.1 胰腺組織的冷凍切片制作
5.2.2 胰島β細胞的免疫熒光染色
5.2.3 大鼠原代胰島細胞的分離和純化
5.2.4 提取胰島細胞總RNA
5.2.5 引物序列及合成
5.2.6 逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA
5.2.7 PCR擴增反應(yīng)
5.2.8 瓊脂糖凝膠電泳
5.2.9 實時熒光定量PCR反應(yīng)
5.3 數(shù)據(jù)處理與分析
5.4 結(jié)果
5.4.1 β細胞形態(tài)學觀察
5.4.2 胰島β細胞面積比例變化
5.4.3 胰島生長發(fā)育相關(guān)調(diào)控因子的表達變化
5.5 討論
5.6 小結(jié)
第6章 結(jié)論
參考文獻
致謝
本文編號:3729030
【文章頁數(shù)】:67 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第1章 文獻綜述
1.1 宮內(nèi)發(fā)育遲緩(IUGR)概述
1.1.1 IUGR產(chǎn)生原因
1.1.2 IUGR動物模型
1.2 IUGR對后代健康及組織器官的影響
1.3 胰島β細胞生長發(fā)育相關(guān)調(diào)控因子
1.3.1 胰腺十二指腸同源框因子-1(PDX-1)
1.3.2 胰島素樣生長因子(IGF)
1.3.3 成纖維細胞生長因子(FGF)
1.3.4 表皮生長因子(EGF)
1.3.5 血管內(nèi)皮生長因子A(VEGFa)
1.4 胰島素分泌相關(guān)調(diào)控因子
1.4.1 葡萄糖轉(zhuǎn)運
1.4.2 ATP/ADP比值
1.4.3 KATP通道
1.4.4 Ca~(2+)通道
1.4.5 胰島素基因
1.5 研究現(xiàn)狀
第2章 引言
第3章 宮內(nèi)發(fā)育遲緩子代大鼠模型建立
3.1 試驗材料
3.1.1 試驗動物
3.1.2 主要儀器
3.2 試驗方法
3.3 數(shù)據(jù)處理與分析
3.4 結(jié)果
3.4.1 0~12周的每周大鼠體重
3.4.2 12周齡大鼠的組織重量
3.5 討論
3.6 小結(jié)
第4章 IUGR對成年子代大鼠胰島素分泌的影響及相關(guān)調(diào)控機制
4.1 試驗材料
4.1.1 試驗動物
4.1.2 主要試劑及耗材
4.1.3 主要儀器
4.1.4 溶液配制
4.2 試驗方法
4.2.1 腹腔注射葡萄糖耐量試驗(IPGTT)
4.2.2 大鼠血漿胰島素酶聯(lián)免疫分析(ELISA)
4.2.3 大鼠原代胰島細胞的分離和純化
4.2.4 提取胰島細胞總RNA
4.2.5 引物序列及合成
4.2.6 逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA
4.2.7 PCR擴增反應(yīng)
4.2.8 瓊脂糖凝膠電泳
4.2.9 實時熒光定量PCR反應(yīng)(RT-qPCR)
4.3 數(shù)據(jù)處理與分析
4.4 結(jié)果
4.4.1 12周齡大鼠血糖和血漿胰島素濃度變化
4.4.2 胰島素分泌相關(guān)調(diào)控因子的表達變化
4.5 討論
4.6 小結(jié)
第5章 IUGR對成年子代大鼠胰島β細胞形態(tài)的影響及相關(guān)調(diào)控機制
5.1 試驗材料
5.1.1 試驗動物
5.1.2 主要試劑
5.1.3 主要儀器
5.1.4 溶液配制
5.2 試驗方法
5.2.1 胰腺組織的冷凍切片制作
5.2.2 胰島β細胞的免疫熒光染色
5.2.3 大鼠原代胰島細胞的分離和純化
5.2.4 提取胰島細胞總RNA
5.2.5 引物序列及合成
5.2.6 逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA
5.2.7 PCR擴增反應(yīng)
5.2.8 瓊脂糖凝膠電泳
5.2.9 實時熒光定量PCR反應(yīng)
5.3 數(shù)據(jù)處理與分析
5.4 結(jié)果
5.4.1 β細胞形態(tài)學觀察
5.4.2 胰島β細胞面積比例變化
5.4.3 胰島生長發(fā)育相關(guān)調(diào)控因子的表達變化
5.5 討論
5.6 小結(jié)
第6章 結(jié)論
參考文獻
致謝
本文編號:3729030
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