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基于代謝組學(xué)的水牛早期胚胎發(fā)育潛能預(yù)測(cè)模型建立的初步研究

發(fā)布時(shí)間:2023-01-03 09:58
  胚胎代謝組學(xué)的變化動(dòng)態(tài)地反映了胚胎發(fā)育狀態(tài)及其對(duì)內(nèi)外環(huán)境做出的應(yīng)答,可作為胚胎發(fā)育潛能的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn);谂咛ゴx組學(xué)的整體預(yù)測(cè)模式比以形態(tài)學(xué)為基礎(chǔ)的傳統(tǒng)評(píng)價(jià)方法對(duì)胚胎發(fā)育潛能的預(yù)測(cè)具有更好的一致性和預(yù)見(jiàn)性。本研究通過(guò)建立單胚胎培養(yǎng)體系,借助代謝組學(xué)的理論和方法,初步建立了早期胚胎發(fā)育潛能的預(yù)測(cè)模型。本研究分為三個(gè)部分,簡(jiǎn)述如下: 研究一,通過(guò)改良當(dāng)前水牛胚胎體外培養(yǎng)體系,初步建立了培養(yǎng)效果較好的單胚胎培養(yǎng)系統(tǒng)。本實(shí)驗(yàn)中,將水牛胚胎的體外培養(yǎng)分為兩步。第一步是水牛卵子進(jìn)行體外受精后,將假定受精卵移入提前培養(yǎng)好的單層細(xì)胞中,第二步將成功發(fā)育至桑葚胚的胚胎移入無(wú)血清微滴中進(jìn)行單胚胎培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,兩步法培養(yǎng)水牛單胚胎,相比較于傳統(tǒng)方法培養(yǎng)水牛胚胎,培養(yǎng)效率(指桑葚胚發(fā)育至囊胚效率)較低(51.2%V.S40.4%,),但優(yōu)于一些文獻(xiàn)報(bào)道中的無(wú)血清單胚胎培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的囊胚發(fā)育率。兩步法無(wú)血清的單胚胎培養(yǎng)平臺(tái)的建立,為后續(xù)代謝組學(xué)研究奠定了基礎(chǔ)。 研究二,探討了兩步法培養(yǎng)水牛胚胎過(guò)程中第二步培養(yǎng)時(shí)血清和BSA在水牛胚胎發(fā)育過(guò)程中拉曼指紋圖譜的變化。結(jié)果顯示,在血清培養(yǎng)系統(tǒng)中,不同來(lái)源的... 

【文章頁(yè)數(shù)】:66 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一部分 文獻(xiàn)綜述
    1. 胚胎體外培養(yǎng)系統(tǒng)
        1.1 植入前胚胎培養(yǎng)液
            1.1.1 含血清的培養(yǎng)系統(tǒng)
            1.1.2 無(wú)血清培養(yǎng)系統(tǒng)
        1.2 植入前胚胎培養(yǎng)系統(tǒng)其他相關(guān)因素
            1.2.1 培養(yǎng)箱氣相環(huán)境
            1.2.2 培養(yǎng)方式
    2. 單胚胎培養(yǎng)應(yīng)用于代謝研究
        2.1 代謝組學(xué)
        2.2 代謝組學(xué)研究應(yīng)用于單胚胎研究
            2.2.1 單胚胎培養(yǎng)
            2.2.2 代謝組學(xué)應(yīng)用于單胚胎研究
    3. 拉曼光譜學(xué)應(yīng)用于代謝組學(xué)研究
        3.1 拉曼光譜
        3.2 拉曼光譜在生命科學(xué)領(lǐng)域的研究現(xiàn)狀
    4 基于支持向量機(jī)的拉曼光譜數(shù)據(jù)分類及預(yù)測(cè)
        4.1 支持向量機(jī)算法簡(jiǎn)介
        4.2 SVM原理
        4.3 提高SVM的性能討論
第二部分 實(shí)驗(yàn)研究
    第一章 實(shí)驗(yàn)材料及方法
        1 實(shí)驗(yàn)材料和主要儀器
            1.1 主要試劑
            1.2 操作液
            1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器
        2 試驗(yàn)方法
            2.1 共培養(yǎng)系統(tǒng)單層的制備
            2.2 卵泡液的制備
            2.3 發(fā)情牛血清的制備
            2.4 卵母細(xì)胞的體外成熟(IVM)
            2.5 卵母細(xì)胞的體外受精(IVF)
            2.6 胚胎培養(yǎng)(IVC)
            2.7 單胚胎培養(yǎng)液的收集
            2.8 單胚胎培養(yǎng)液拉曼光譜的測(cè)量
            2.9 統(tǒng)計(jì)分析
    第二章 兩步法培養(yǎng)水牛單胚胎
        前言
        實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果
        分析和討論
        小結(jié)
    第三章 對(duì)單胚胎培養(yǎng)液的拉曼光譜研究
        前言
        實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果
            1 不同積分時(shí)間對(duì)樣品拉曼光譜結(jié)果的影響
            2 不同添加物對(duì)兩步法胚胎培養(yǎng)的拉曼光譜
        分析和討論
            1 不同積分時(shí)間對(duì)樣品拉曼光譜結(jié)果的影響
            2 血清對(duì)兩步法胚胎培養(yǎng)的拉曼光譜的影響
        小結(jié)
    第四章 胚胎發(fā)育潛能的預(yù)測(cè)模型初步建立
        前言
        實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果
        分析和討論
            1 測(cè)量數(shù)據(jù)的可視化
            2 數(shù)據(jù)預(yù)處理
            3 樣本分類設(shè)置
            4 SVM分類預(yù)測(cè)
            5 SVM預(yù)測(cè)模型的優(yōu)化
        小結(jié)
參考文獻(xiàn)
附錄Ⅰ 重要術(shù)語(yǔ)中英文對(duì)照表
附錄Ⅱ 拉曼特征峰物質(zhì)歸屬表
致謝
碩士期間發(fā)表文章情況


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]代謝組學(xué):一個(gè)迅速發(fā)展的新興學(xué)科(英文)[J]. 唐惠儒,王玉蘭.  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2006(05)



本文編號(hào):3727249

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