藍(lán)舌病病毒反向遺傳操作系統(tǒng)的建立
發(fā)布時(shí)間:2022-12-03 20:07
為建立藍(lán)舌病病毒(BTV)的反向遺傳操作系統(tǒng),本研究構(gòu)建了分別表達(dá)血清1型BTV SZ97/1株VP1、VP3、VP4、VP6、VP7、NS1和NS2蛋白的7個(gè)真核表達(dá)質(zhì)粒,同時(shí)又構(gòu)建了含有SZ97/1株BTV的全部10個(gè)基因節(jié)段的T7聚合酶體外轉(zhuǎn)錄重組質(zhì)粒。并利用T7 RNA聚合酶對(duì)酶切線性化的10個(gè)體外轉(zhuǎn)錄質(zhì)粒進(jìn)行體外轉(zhuǎn)錄,制備BTV全部10個(gè)基因的體外轉(zhuǎn)錄RNA。將已構(gòu)建的7個(gè)真核表達(dá)質(zhì)粒和體外轉(zhuǎn)錄獲得的RNA產(chǎn)物依次共轉(zhuǎn)染BHK-21細(xì)胞,拯救出含有分子標(biāo)記的BTV。本研究首次在我國(guó)建立了BTV的反向遺傳操作系統(tǒng),為我國(guó)深入開(kāi)展該病毒致病機(jī)理、傳播機(jī)制、基因組功能的研究以及新型疫苗的研發(fā)奠定了基礎(chǔ)。
【文章頁(yè)數(shù)】:5 頁(yè)
【文章目錄】:
1 材料和方法
2 結(jié)果
3 討論
本文編號(hào):3706887
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1 材料和方法
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