日糧纖維/淀粉對(duì)生長(zhǎng)肉兔生長(zhǎng)、免疫、腸道菌群的影響及腸道蛋白質(zhì)組學(xué)初探
發(fā)布時(shí)間:2022-11-12 09:53
家兔消化道疾病是制約家兔養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的一個(gè)重要因素,由于抗生素的大量使用會(huì)造成細(xì)菌耐藥性和肉制品安全等問(wèn)題,而通過(guò)日糧調(diào)控來(lái)預(yù)防消化道腹瀉被普遍認(rèn)可。根據(jù)家兔的生理特點(diǎn),日糧纖維在家兔飼料組分中占重要地位,飼糧淀粉是主要能量來(lái)源,保證家兔健康而又有充分的經(jīng)濟(jì)回報(bào)是廣大養(yǎng)殖戶所追求的。因此,日糧中合理的纖維/淀粉在家兔生產(chǎn)中具有重要意義。 本研究選用平均體重相近的斷奶新西蘭肉兔200只,根據(jù)日糧NDF/淀粉為2.3,1.9,1.4,1.0,隨機(jī)分成4組,每組50只,正式期40天(42-82日齡)。圍繞試兔生產(chǎn)指標(biāo)、盲腸發(fā)酵、腸道黏膜發(fā)育、特異性及非特異性免疫、腸道微生物多樣性及豐度等方面評(píng)價(jià)了日糧纖維/淀粉對(duì)試兔機(jī)體內(nèi)環(huán)境的影響,并利用蛋白質(zhì)組學(xué)研究初步探討了健康與腹瀉組試兔腸道蛋白表達(dá)差異,綜上所述得出以下系列結(jié)果: 1.調(diào)控NDF/淀粉對(duì)試兔生產(chǎn)、盲腸發(fā)酵、腸道黏膜發(fā)育的影響 各處理組試兔82日齡時(shí),每組選10只屠宰,測(cè)定各項(xiàng)相關(guān)指標(biāo)。結(jié)果表明:飼糧NDF/淀粉對(duì)試兔平均日增重、料重比影響顯著(P<0.05),隨著NDF/淀粉的降低,平均日增重(ADG)先升高后...
【文章頁(yè)數(shù)】:156 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
符號(hào)說(shuō)明
中文摘要
Abstract
1 前言
1.1 日糧纖維和淀粉的定義及測(cè)定方法
1.1.1 日糧纖維的定義
1.1.2 日糧纖維分類(lèi)
1.1.3 日糧纖維的測(cè)定方法
1.1.4 日糧淀粉的定義
1.1.5 淀粉的測(cè)定
1.2 家兔日糧纖維的研究進(jìn)展
1.2.1 家兔對(duì)纖維的消化機(jī)制
1.2.2 家兔對(duì)纖維的消化能力
1.2.3 纖維對(duì)家兔的營(yíng)養(yǎng)和健康狀況的影響
1.3 家兔日糧淀粉的研究進(jìn)展
1.3.1 家兔對(duì)日糧淀粉的消化機(jī)制
1.3.2 淀粉對(duì)家兔健康的影響
1.4 日糧纖維和淀粉水平對(duì)生長(zhǎng)肉兔生產(chǎn)性能的影響
1.5 日糧纖維和淀粉水平對(duì)腸道組織形態(tài)學(xué)的影響
1.6 家兔營(yíng)養(yǎng)水平對(duì)免疫指標(biāo)的影響
1.6.1 家兔腸道相關(guān)淋巴組織
1.6.2 家兔腸道淋巴細(xì)胞
1.6.3 日糧對(duì)免疫系統(tǒng)的影響
1.7 營(yíng)養(yǎng)與腸道菌群
1.7.1 家兔腸道菌群的多樣性
1.7.2 腸道微生物群檢測(cè)方法研究進(jìn)展
1.7.3 腸道微生物時(shí)間動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)研究進(jìn)展
1.7.4 腸道菌群對(duì)腸道消化和飼料轉(zhuǎn)化率的作用研究進(jìn)展
1.7.5 腸道微生物的定植和物種的生態(tài)交替研究進(jìn)展
1.7.6 營(yíng)養(yǎng)因素對(duì)腸道菌群的影響
1.7.7 微生物對(duì)腸道黏膜成熟的影響研究進(jìn)展
1.7.8 對(duì)初次免疫應(yīng)答抗體的多樣性的影響研究進(jìn)展
1.8 蛋白質(zhì)組學(xué)
1.8.1 蛋白質(zhì)組學(xué)的概念
1.8.2 二維電泳技術(shù)的基本原理
1.8.3 營(yíng)養(yǎng)蛋白質(zhì)組研究
2 材料與方法
2.1 材料
2.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
2.1.2 試驗(yàn)日糧
2.1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
2.1.4 飼養(yǎng)管理
2.1.5 主要試劑
2.1.6 主要儀器
2.1.7 試劑配制
2.2 方法
2.2.1 生產(chǎn)性能指標(biāo)與腹瀉指數(shù)
2.2.2 消化道發(fā)育指標(biāo)
2.2.3 免疫組化方法的建立
2.2.4 利用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)血液中CD4~+和CD8~+免疫細(xì)胞方法的建立
2.2.5 用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)檢測(cè)SIgA效價(jià)的方法建立
2.2.6 用ELISA方法檢測(cè)血清抗體的效價(jià)
2.2.7 引物合成
2.2.8 盲腸內(nèi)容物DNA提取
2.2.9 提取盲腸內(nèi)容物總DNA的完整性及純度檢測(cè)
2.2.10 高通量測(cè)序方法
2.2.11 DGGE方法的建立
2.2.12 腹瀉與健康試兔剖檢病理變化
2.2.13 腹瀉與健康試兔的蚓突黏膜掃描電鏡觀察
2.2.14 腹瀉與健康試兔的盲腸組織蛋白提取、純化、定量
2.2.15 二維電泳操作步驟
2.2.16 蛋白質(zhì)譜檢測(cè)
2.2.17 SDS-PAGE操作步驟
2.2.18 Werstern-blot試驗(yàn)步驟
2.3 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)
2.3.1 生產(chǎn)指標(biāo)、消化道發(fā)育、盲腸內(nèi)環(huán)境指標(biāo)統(tǒng)計(jì)分析
2.3.2 免疫應(yīng)答數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)
2.3.3 腸道菌群組成數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
2.3.4 二維電泳凝膠圖譜分析
2.3.5 蛋白質(zhì)譜分析
3 結(jié)果與分析
3.1 不同NDF/淀粉的日糧對(duì)生產(chǎn)性能的影響
3.2 不同NDF/淀粉的日糧對(duì)試兔腹瀉率的影響
3.3 不同NDF/淀粉的日糧對(duì)試兔胃腸道發(fā)育指標(biāo)的影響
3.4 不同NDF/淀粉的日糧對(duì)試兔盲腸內(nèi)環(huán)境的影響
3.5 不同NDF/淀粉的日糧對(duì)試兔十二指腸絨毛高度和隱窩深度的影響
3.6 蚓突與圓小囊組織中 M 細(xì)胞數(shù)量及形態(tài)的變化規(guī)律的研究
3.6.1 M細(xì)胞的數(shù)量變化
3.6.2 M細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化
3.7 試兔血清中IgG、CD4~+/CD8~+和腸道SIgA水平變化規(guī)律的研究
3.8 試兔盲腸內(nèi)容物DNA樣品的提取
3.9 細(xì)菌16SrRNA基因特異性片段PCR擴(kuò)增
3.10 高通量測(cè)序
3.10.1 各DNA文庫(kù)間試兔盲腸菌群組成
3.10.2 細(xì)菌多樣性分析
3.11 盲腸內(nèi)容物細(xì)菌PCR-DGGE指紋及其結(jié)果
3.12 健康與腹瀉試兔蛋白質(zhì)組學(xué)分析
3.12.1 試兔與健康兔的腸道組織學(xué)變化
3.12.2 掃描電鏡結(jié)果
3.12.3 二維電泳圖譜分析結(jié)果
3.12.4 image master7.0軟件分析結(jié)果
3.12.5 蛋白質(zhì)譜分析
3.12.6 免疫蛋白印跡實(shí)驗(yàn)結(jié)果
4 討論
4.1 飼糧中不同NDF/淀粉對(duì)生長(zhǎng)肉兔生產(chǎn)性能及腹瀉率的影響
4.2 飼糧中不同NDF/淀粉對(duì)生長(zhǎng)肉兔胃腸道發(fā)育的影響
4.3 飼糧中不同NDF/淀粉對(duì)試兔盲腸內(nèi)環(huán)境的影響
4.4 飼糧中不同NDF/淀粉對(duì)試兔十二指腸絨毛高度和隱窩深度的影響
4.5 日糧纖維/淀粉對(duì)黏膜免疫的影響
4.6 日糧纖維/淀粉對(duì)體液免疫的影響
4.7 不同纖維/淀粉日糧調(diào)控下,在門(mén)的分類(lèi)水平上試兔盲腸微生物的變化
4.8 不同日糧調(diào)控下在種屬水平上菌群的變化
4.9 健康試兔與腹瀉兔蛋白表達(dá)差異
4.9.1 吸收、消化、轉(zhuǎn)運(yùn)
4.9.2 細(xì)胞結(jié)構(gòu)與肌肉運(yùn)動(dòng)
4.9.3 炎癥反應(yīng)
4.9.4 參與葡萄糖與能量代謝
4.9.5 礦物質(zhì)和維生素代謝
4.9.6 應(yīng)激反應(yīng)
4.9.7 氧化還原
5 結(jié)論
6 參考文獻(xiàn)
7 附錄
8 致謝
9 攻讀博士期間發(fā)表論文情況
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]高通量測(cè)序技術(shù)及其應(yīng)用[J]. 王興春,楊致榮,王敏,李瑋,李生才. 中國(guó)生物工程雜志. 2012(01)
[2]白蛋白的臨床應(yīng)用及在營(yíng)養(yǎng)治療中的意義[J]. 羅茜,曹偉新. 中國(guó)臨床營(yíng)養(yǎng)雜志. 2007(05)
[3]飼糧中中性洗滌纖維的研究進(jìn)展[J]. 吳秋玨,徐廷生. 飼料工業(yè). 2006(07)
[4]2~3月齡肉兔日糧消化能水平對(duì)消化代謝和產(chǎn)肉性能影響的研究[J]. 祝素珍,李福昌. 動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào). 2004(04)
[5]肌酸激酶結(jié)構(gòu)與功能研究進(jìn)展[J]. 周秀菊,劉黨生,蔣宇揚(yáng). 沈陽(yáng)藥科大學(xué)學(xué)報(bào). 2002(05)
[6]家兔大腸桿菌所致腹瀉兔機(jī)體理化參數(shù)變化及病理特性研究[J]. 鮑國(guó)連,佟承剛,韋強(qiáng),陶爭(zhēng)榮,季權(quán)安. 中國(guó)養(yǎng)兔. 2001(01)
[7]家兔對(duì)不同品質(zhì)粗纖維利用能力的研究[J]. 秦應(yīng)和,王俐,柯尊偉,杜玉川. 飼料研究. 2000(02)
[8]家兔腹瀉病主要病原及防治對(duì)策(上)[J]. 董亞芳. 中國(guó)養(yǎng)兔雜志. 1998(02)
[9]兩種不同來(lái)源顆粒料對(duì)幼兔生長(zhǎng)影響的比較[J]. 高靜華. 上海畜牧獸醫(yī)通訊. 1995(01)
[10]日糧粗纖維水平對(duì)兔飼料轉(zhuǎn)化率的影響[J]. 金嶺梅. 甘肅畜牧獸醫(yī). 1994(06)
本文編號(hào):3706152
【文章頁(yè)數(shù)】:156 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
符號(hào)說(shuō)明
中文摘要
Abstract
1 前言
1.1 日糧纖維和淀粉的定義及測(cè)定方法
1.1.1 日糧纖維的定義
1.1.2 日糧纖維分類(lèi)
1.1.3 日糧纖維的測(cè)定方法
1.1.4 日糧淀粉的定義
1.1.5 淀粉的測(cè)定
1.2 家兔日糧纖維的研究進(jìn)展
1.2.1 家兔對(duì)纖維的消化機(jī)制
1.2.2 家兔對(duì)纖維的消化能力
1.2.3 纖維對(duì)家兔的營(yíng)養(yǎng)和健康狀況的影響
1.3 家兔日糧淀粉的研究進(jìn)展
1.3.1 家兔對(duì)日糧淀粉的消化機(jī)制
1.3.2 淀粉對(duì)家兔健康的影響
1.4 日糧纖維和淀粉水平對(duì)生長(zhǎng)肉兔生產(chǎn)性能的影響
1.5 日糧纖維和淀粉水平對(duì)腸道組織形態(tài)學(xué)的影響
1.6 家兔營(yíng)養(yǎng)水平對(duì)免疫指標(biāo)的影響
1.6.1 家兔腸道相關(guān)淋巴組織
1.6.2 家兔腸道淋巴細(xì)胞
1.6.3 日糧對(duì)免疫系統(tǒng)的影響
1.7 營(yíng)養(yǎng)與腸道菌群
1.7.1 家兔腸道菌群的多樣性
1.7.2 腸道微生物群檢測(cè)方法研究進(jìn)展
1.7.3 腸道微生物時(shí)間動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)研究進(jìn)展
1.7.4 腸道菌群對(duì)腸道消化和飼料轉(zhuǎn)化率的作用研究進(jìn)展
1.7.5 腸道微生物的定植和物種的生態(tài)交替研究進(jìn)展
1.7.6 營(yíng)養(yǎng)因素對(duì)腸道菌群的影響
1.7.7 微生物對(duì)腸道黏膜成熟的影響研究進(jìn)展
1.7.8 對(duì)初次免疫應(yīng)答抗體的多樣性的影響研究進(jìn)展
1.8 蛋白質(zhì)組學(xué)
1.8.1 蛋白質(zhì)組學(xué)的概念
1.8.2 二維電泳技術(shù)的基本原理
1.8.3 營(yíng)養(yǎng)蛋白質(zhì)組研究
2 材料與方法
2.1 材料
2.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物
2.1.2 試驗(yàn)日糧
2.1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
2.1.4 飼養(yǎng)管理
2.1.5 主要試劑
2.1.6 主要儀器
2.1.7 試劑配制
2.2 方法
2.2.1 生產(chǎn)性能指標(biāo)與腹瀉指數(shù)
2.2.2 消化道發(fā)育指標(biāo)
2.2.3 免疫組化方法的建立
2.2.4 利用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)血液中CD4~+和CD8~+免疫細(xì)胞方法的建立
2.2.5 用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)檢測(cè)SIgA效價(jià)的方法建立
2.2.6 用ELISA方法檢測(cè)血清抗體的效價(jià)
2.2.7 引物合成
2.2.8 盲腸內(nèi)容物DNA提取
2.2.9 提取盲腸內(nèi)容物總DNA的完整性及純度檢測(cè)
2.2.10 高通量測(cè)序方法
2.2.11 DGGE方法的建立
2.2.12 腹瀉與健康試兔剖檢病理變化
2.2.13 腹瀉與健康試兔的蚓突黏膜掃描電鏡觀察
2.2.14 腹瀉與健康試兔的盲腸組織蛋白提取、純化、定量
2.2.15 二維電泳操作步驟
2.2.16 蛋白質(zhì)譜檢測(cè)
2.2.17 SDS-PAGE操作步驟
2.2.18 Werstern-blot試驗(yàn)步驟
2.3 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)
2.3.1 生產(chǎn)指標(biāo)、消化道發(fā)育、盲腸內(nèi)環(huán)境指標(biāo)統(tǒng)計(jì)分析
2.3.2 免疫應(yīng)答數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)
2.3.3 腸道菌群組成數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
2.3.4 二維電泳凝膠圖譜分析
2.3.5 蛋白質(zhì)譜分析
3 結(jié)果與分析
3.1 不同NDF/淀粉的日糧對(duì)生產(chǎn)性能的影響
3.2 不同NDF/淀粉的日糧對(duì)試兔腹瀉率的影響
3.3 不同NDF/淀粉的日糧對(duì)試兔胃腸道發(fā)育指標(biāo)的影響
3.4 不同NDF/淀粉的日糧對(duì)試兔盲腸內(nèi)環(huán)境的影響
3.5 不同NDF/淀粉的日糧對(duì)試兔十二指腸絨毛高度和隱窩深度的影響
3.6 蚓突與圓小囊組織中 M 細(xì)胞數(shù)量及形態(tài)的變化規(guī)律的研究
3.6.1 M細(xì)胞的數(shù)量變化
3.6.2 M細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化
3.7 試兔血清中IgG、CD4~+/CD8~+和腸道SIgA水平變化規(guī)律的研究
3.8 試兔盲腸內(nèi)容物DNA樣品的提取
3.9 細(xì)菌16SrRNA基因特異性片段PCR擴(kuò)增
3.10 高通量測(cè)序
3.10.1 各DNA文庫(kù)間試兔盲腸菌群組成
3.10.2 細(xì)菌多樣性分析
3.11 盲腸內(nèi)容物細(xì)菌PCR-DGGE指紋及其結(jié)果
3.12 健康與腹瀉試兔蛋白質(zhì)組學(xué)分析
3.12.1 試兔與健康兔的腸道組織學(xué)變化
3.12.2 掃描電鏡結(jié)果
3.12.3 二維電泳圖譜分析結(jié)果
3.12.4 image master7.0軟件分析結(jié)果
3.12.5 蛋白質(zhì)譜分析
3.12.6 免疫蛋白印跡實(shí)驗(yàn)結(jié)果
4 討論
4.1 飼糧中不同NDF/淀粉對(duì)生長(zhǎng)肉兔生產(chǎn)性能及腹瀉率的影響
4.2 飼糧中不同NDF/淀粉對(duì)生長(zhǎng)肉兔胃腸道發(fā)育的影響
4.3 飼糧中不同NDF/淀粉對(duì)試兔盲腸內(nèi)環(huán)境的影響
4.4 飼糧中不同NDF/淀粉對(duì)試兔十二指腸絨毛高度和隱窩深度的影響
4.5 日糧纖維/淀粉對(duì)黏膜免疫的影響
4.6 日糧纖維/淀粉對(duì)體液免疫的影響
4.7 不同纖維/淀粉日糧調(diào)控下,在門(mén)的分類(lèi)水平上試兔盲腸微生物的變化
4.8 不同日糧調(diào)控下在種屬水平上菌群的變化
4.9 健康試兔與腹瀉兔蛋白表達(dá)差異
4.9.1 吸收、消化、轉(zhuǎn)運(yùn)
4.9.2 細(xì)胞結(jié)構(gòu)與肌肉運(yùn)動(dòng)
4.9.3 炎癥反應(yīng)
4.9.4 參與葡萄糖與能量代謝
4.9.5 礦物質(zhì)和維生素代謝
4.9.6 應(yīng)激反應(yīng)
4.9.7 氧化還原
5 結(jié)論
6 參考文獻(xiàn)
7 附錄
8 致謝
9 攻讀博士期間發(fā)表論文情況
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]高通量測(cè)序技術(shù)及其應(yīng)用[J]. 王興春,楊致榮,王敏,李瑋,李生才. 中國(guó)生物工程雜志. 2012(01)
[2]白蛋白的臨床應(yīng)用及在營(yíng)養(yǎng)治療中的意義[J]. 羅茜,曹偉新. 中國(guó)臨床營(yíng)養(yǎng)雜志. 2007(05)
[3]飼糧中中性洗滌纖維的研究進(jìn)展[J]. 吳秋玨,徐廷生. 飼料工業(yè). 2006(07)
[4]2~3月齡肉兔日糧消化能水平對(duì)消化代謝和產(chǎn)肉性能影響的研究[J]. 祝素珍,李福昌. 動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào). 2004(04)
[5]肌酸激酶結(jié)構(gòu)與功能研究進(jìn)展[J]. 周秀菊,劉黨生,蔣宇揚(yáng). 沈陽(yáng)藥科大學(xué)學(xué)報(bào). 2002(05)
[6]家兔大腸桿菌所致腹瀉兔機(jī)體理化參數(shù)變化及病理特性研究[J]. 鮑國(guó)連,佟承剛,韋強(qiáng),陶爭(zhēng)榮,季權(quán)安. 中國(guó)養(yǎng)兔. 2001(01)
[7]家兔對(duì)不同品質(zhì)粗纖維利用能力的研究[J]. 秦應(yīng)和,王俐,柯尊偉,杜玉川. 飼料研究. 2000(02)
[8]家兔腹瀉病主要病原及防治對(duì)策(上)[J]. 董亞芳. 中國(guó)養(yǎng)兔雜志. 1998(02)
[9]兩種不同來(lái)源顆粒料對(duì)幼兔生長(zhǎng)影響的比較[J]. 高靜華. 上海畜牧獸醫(yī)通訊. 1995(01)
[10]日糧粗纖維水平對(duì)兔飼料轉(zhuǎn)化率的影響[J]. 金嶺梅. 甘肅畜牧獸醫(yī). 1994(06)
本文編號(hào):3706152
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