膠體金免疫層析法快速定量檢測(cè)動(dòng)物組織中喹乙醇的研究
發(fā)布時(shí)間:2022-11-06 19:06
喹乙醇(Olaquindox)是化學(xué)合成的喹噁啉類廣譜抗茵藥物,作為飼料添加劑可顯著促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng),并可預(yù)防和治療細(xì)菌感染性疾病。但研究發(fā)現(xiàn),喹乙醇具有中等以上的蓄積毒性,使用不當(dāng)會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物畸變,癌變甚至死亡,且殘留在動(dòng)物組織中的喹乙醇對(duì)人體健康也有很大的威脅。目前,動(dòng)物組織中喹乙醇?xì)埩魴z測(cè)方法主要是色譜法和酶聯(lián)免疫法(ELISA),但這些方法對(duì)操作人員要求較高,耗費(fèi)時(shí)間較長(zhǎng),不易普及。隨著膠體金免疫層析技術(shù)(gold immune chromatographic assay,GICA)快速診斷試紙條(簡(jiǎn)稱膠體金試紙條)的發(fā)展,其因具有檢測(cè)簡(jiǎn)便快捷、無(wú)需檢測(cè)儀器,且成本低、無(wú)污染等優(yōu)點(diǎn),已逐漸被應(yīng)用于食品農(nóng)獸藥殘留的監(jiān)測(cè)中。本試驗(yàn)旨在應(yīng)用膠體金免疫層析技術(shù)建立動(dòng)物組織中喹乙醇?xì)埩舻目焖俣繖z測(cè)方法。1.喹乙醇多克隆抗體的制備和鑒定。為制備喹乙醇多克隆抗體,采用琥珀酸酐法合成半抗原喹乙醇半琥珀酸酯(OLA-HS),通過(guò)活化酯法將半抗原與載體蛋白(BSA和OVA)偶聯(lián)制備喹乙醇免疫原(OLA-HS-BSA)和包被原(OLA-HS-OVA),利用紫外分光光度法測(cè)定其濃度并掃描鑒定;利用制備的免...
【文章頁(yè)數(shù)】:75 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
縮略詞中英文對(duì)照
前言
上篇 文獻(xiàn)綜述
1 喹乙醇的藥理學(xué)研究概況及生產(chǎn)應(yīng)用
1.1 喹乙醇的理化性質(zhì)
1.2 喹乙醇的作用與生產(chǎn)用途
1.3 喹乙醇的吸收代謝和毒性
1.4 喹乙醇的使用規(guī)范和分布?xì)埩?br> 2 喹乙醇?xì)埩魴z測(cè)的研究進(jìn)展
2.1 理化分析方法
2.2 免疫學(xué)分析方法
3 膠體金免疫層析技術(shù)
3.1 膠體金免疫層析技術(shù)的使用概況
3.2 膠體金免疫層析原理及試紙條結(jié)構(gòu)
3.3 膠體金的制備和鑒定
3.4 膠體金標(biāo)記的抗體
3.5 膠體金免疫層析技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)
3.6 膠體金免疫層析技術(shù)在動(dòng)物源食品檢測(cè)方面的應(yīng)用
3.7 膠體金免疫技術(shù)發(fā)展方向
4 研究目的和意義
參考文獻(xiàn)
下篇 試驗(yàn)研究
第一章 喹乙醇多克隆抗體的制備與鑒定
1 材料與方法
1.1 試驗(yàn)材料
1.2 試驗(yàn)方法
2 結(jié)果與分析
2.1 紫外掃描OLA-BSA,OLA-OVA的圖譜并計(jì)算分子結(jié)合比
2.2 包被抗原與抗血清最佳工作濃度的確定
2.3 五次免疫后小鼠血清效價(jià)的趨勢(shì)
2.4 抗血清純化后抗體效價(jià)的測(cè)定
2.5 抗體敏感性測(cè)定
2.6 抗體特異性測(cè)定
3 討論
3.1 載體蛋白的選擇
3.2 分子偶聯(lián)比對(duì)抗原的影響
3.3 喹乙醇多抗血清的制備
4 小結(jié)
參考文獻(xiàn)
第二章 膠體金試紙條的制備與初步應(yīng)用
1 材料與方法
1.1 試驗(yàn)材料
1.2 試驗(yàn)方法
1.3 試紙條的質(zhì)量性能檢測(cè)
2 結(jié)果與分析
2.1 膠體金的紫外掃描圖譜
2.2 膠體金標(biāo)記蛋白K_2CO_3最佳含量的確定結(jié)果
2.3 膠體金標(biāo)記抗體蛋白含量的確定
2.4 二抗、包被濃度的確定
2.5 紙條質(zhì)量性能檢測(cè)
3 討論
4 小結(jié)
參考文獻(xiàn)
第三章 膠體金試紙條的定量檢測(cè)與市場(chǎng)調(diào)查
1 材料與方法
1.1 試驗(yàn)材料
1.2 試驗(yàn)方法
2 結(jié)果與分析
2.1 樣品的前處理結(jié)果
2.2 試紙條定量檢測(cè)
2.3 試紙條的檢測(cè)應(yīng)用與比較
3 討論
4 小結(jié)
參考文獻(xiàn)
全文結(jié)論
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表論文情況
本文編號(hào):3704055
【文章頁(yè)數(shù)】:75 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
縮略詞中英文對(duì)照
前言
上篇 文獻(xiàn)綜述
1 喹乙醇的藥理學(xué)研究概況及生產(chǎn)應(yīng)用
1.1 喹乙醇的理化性質(zhì)
1.2 喹乙醇的作用與生產(chǎn)用途
1.3 喹乙醇的吸收代謝和毒性
1.4 喹乙醇的使用規(guī)范和分布?xì)埩?br> 2 喹乙醇?xì)埩魴z測(cè)的研究進(jìn)展
2.1 理化分析方法
2.2 免疫學(xué)分析方法
3 膠體金免疫層析技術(shù)
3.1 膠體金免疫層析技術(shù)的使用概況
3.2 膠體金免疫層析原理及試紙條結(jié)構(gòu)
3.3 膠體金的制備和鑒定
3.4 膠體金標(biāo)記的抗體
3.5 膠體金免疫層析技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)
3.6 膠體金免疫層析技術(shù)在動(dòng)物源食品檢測(cè)方面的應(yīng)用
3.7 膠體金免疫技術(shù)發(fā)展方向
4 研究目的和意義
參考文獻(xiàn)
下篇 試驗(yàn)研究
第一章 喹乙醇多克隆抗體的制備與鑒定
1 材料與方法
1.1 試驗(yàn)材料
1.2 試驗(yàn)方法
2 結(jié)果與分析
2.1 紫外掃描OLA-BSA,OLA-OVA的圖譜并計(jì)算分子結(jié)合比
2.2 包被抗原與抗血清最佳工作濃度的確定
2.3 五次免疫后小鼠血清效價(jià)的趨勢(shì)
2.4 抗血清純化后抗體效價(jià)的測(cè)定
2.5 抗體敏感性測(cè)定
2.6 抗體特異性測(cè)定
3 討論
3.1 載體蛋白的選擇
3.2 分子偶聯(lián)比對(duì)抗原的影響
3.3 喹乙醇多抗血清的制備
4 小結(jié)
參考文獻(xiàn)
第二章 膠體金試紙條的制備與初步應(yīng)用
1 材料與方法
1.1 試驗(yàn)材料
1.2 試驗(yàn)方法
1.3 試紙條的質(zhì)量性能檢測(cè)
2 結(jié)果與分析
2.1 膠體金的紫外掃描圖譜
2.2 膠體金標(biāo)記蛋白K_2CO_3最佳含量的確定結(jié)果
2.3 膠體金標(biāo)記抗體蛋白含量的確定
2.4 二抗、包被濃度的確定
2.5 紙條質(zhì)量性能檢測(cè)
3 討論
4 小結(jié)
參考文獻(xiàn)
第三章 膠體金試紙條的定量檢測(cè)與市場(chǎng)調(diào)查
1 材料與方法
1.1 試驗(yàn)材料
1.2 試驗(yàn)方法
2 結(jié)果與分析
2.1 樣品的前處理結(jié)果
2.2 試紙條定量檢測(cè)
2.3 試紙條的檢測(cè)應(yīng)用與比較
3 討論
4 小結(jié)
參考文獻(xiàn)
全文結(jié)論
致謝
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本文編號(hào):3704055
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