發(fā)布時間：2022-11-06 18:46

　　產(chǎn)氣莢膜梭菌（Clostridium perfringens）是一種重要的人畜共患病原微生物,不僅可以導(dǎo)致家禽的壞死性腸炎（NE）,給養(yǎng)殖業(yè)造成巨大的經(jīng)濟損失,還能夠引起人食物中毒等消化道疾病,給人的健康帶來一定的威脅。隨著抗生素的廣泛使用,產(chǎn)氣莢膜梭菌對抗生素的耐藥性不斷增強,多重耐藥現(xiàn)象明顯,嚴(yán)重影響了抗生素的臨床治療效果。家禽是產(chǎn)氣莢膜梭菌的主要宿主,其屠宰加工過程中往往會被產(chǎn)氣莢膜梭菌污染。雖然各國對不同宿主及食品中產(chǎn)氣莢膜梭菌的流行狀況開展了較為系統(tǒng)的研究,但關(guān)于家禽養(yǎng)殖屠宰鏈中產(chǎn)氣莢膜梭菌的報道還相對匱乏,中國是世界上最大的肉鴨生產(chǎn)國,山東是養(yǎng)鴨大省,因此對山東地區(qū)鴨養(yǎng)殖及屠宰過程中產(chǎn)氣莢膜梭菌的流行情況、血清型分布、耐藥性以及遺傳演化規(guī)律進(jìn)行研究,不僅可以填補鴨源產(chǎn)氣莢膜梭菌流行情況研究的空缺,為養(yǎng)殖場合理使用抗生素提供理論依據(jù),同時對評估公共衛(wèi)生和食品安全也具有重要意義。2018年12月至2019年6月,從濰坊地區(qū)某養(yǎng)殖屠宰一體化公司的肉鴨養(yǎng)殖屠宰鏈以及泰安、聊城、濰坊地區(qū)四個鴨場的鴨養(yǎng)殖階段采集樣品共計939份,經(jīng)選擇培養(yǎng)基分離培養(yǎng)后,用PCR擴增鑒定產(chǎn)氣莢膜梭菌8種... 

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
符號說明
中文摘要
Abstract
1 前言
    1.1 產(chǎn)氣莢膜梭菌簡介
    1.2 產(chǎn)氣莢膜梭菌的血清分型
    1.3 產(chǎn)氣莢膜梭菌的毒力基因
    1.4 產(chǎn)氣莢膜梭菌的流行情況
        1.4.1 產(chǎn)氣莢膜梭菌在家禽養(yǎng)殖場中的流行情況
        1.4.2 產(chǎn)氣莢膜梭菌在禽產(chǎn)品中的流行情況
    1.5 禽源產(chǎn)氣莢膜梭菌耐藥研究現(xiàn)狀
    1.6 多位點序列分型
    1.7 研究的目的和意義
2 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 樣品
        2.1.2 菌株
        2.1.3 培養(yǎng)基
        2.1.4 主要試劑及溶液配制
        2.1.5 抗生素
        2.1.6 主要儀器
    2.2 方法
        2.2.1 樣品處理
        2.2.2 產(chǎn)氣莢膜梭菌的分離與鑒定
        2.2.3 菌種保存及DNA提取
        2.2.4 血清型鑒定
        2.2.5 毒力基因檢測
        2.2.6 藥敏試驗
        2.2.7 多位點序列分型(MLST)
            2.2.7.1 管家基因引物合成
            2.2.7.2 管家基因的PCR擴增及測序
            2.2.7.3 MLST分型及系統(tǒng)發(fā)育分析
        2.2.8 統(tǒng)計分析和辛普森多樣性指數(shù)
3 結(jié)果
    3.1 產(chǎn)氣莢膜梭菌的鑒定結(jié)果
        3.1.1 菌落形態(tài)
        3.1.2 鏡檢結(jié)果
        3.1.3 產(chǎn)氣莢膜梭菌PCR鑒定結(jié)果
    3.2 產(chǎn)氣莢膜梭菌的分離結(jié)果
        3.2.1 鴨養(yǎng)殖場中產(chǎn)氣莢膜梭菌的陽性率
        3.2.2 肉鴨屠宰環(huán)節(jié)中產(chǎn)氣莢膜梭菌的陽性率
    3.3 血清型分型結(jié)果
    3.4 毒力基因檢測結(jié)果
        3.4.1 產(chǎn)氣莢膜梭菌毒力基因PCR擴增結(jié)果
        3.4.2 產(chǎn)氣莢膜梭菌毒力基因流行情況
    3.5 產(chǎn)氣莢膜梭菌藥敏試驗結(jié)果
        3.5.1 產(chǎn)氣莢膜梭菌耐藥率統(tǒng)計
            3.5.1.1 養(yǎng)殖場分離株的耐藥率
            3.5.1.2 屠宰場分離株的耐藥率
        3.5.2 產(chǎn)氣莢膜梭菌多重耐藥情況
    3.6 多位點序列分型(MLST)
        3.6.1 管家基因PCR擴增結(jié)果
        3.6.2 MLST序列型(ST)
        3.6.3 MLST最小生成樹
            3.6.3.1 鴨養(yǎng)殖場分離株的最小生成樹
            3.6.3.2 從養(yǎng)殖到屠宰生產(chǎn)鏈中分離株的最小生成樹
    3.7 產(chǎn)氣莢膜梭菌的系統(tǒng)進(jìn)化結(jié)果
        3.7.1 鴨養(yǎng)殖場分離株的系統(tǒng)發(fā)育樹
        3.7.2 從養(yǎng)殖到屠宰生產(chǎn)鏈中分離株的系統(tǒng)發(fā)育樹
4 討論
    4.1 產(chǎn)氣莢膜梭菌流行情況分析
        4.1.1 養(yǎng)殖場中產(chǎn)氣莢膜梭菌的流行情況分析
        4.1.2 屠宰場中產(chǎn)氣莢膜梭菌的流行情況分析
    4.2 產(chǎn)氣莢膜梭菌毒力基因分析
    4.3 產(chǎn)氣莢膜梭菌耐藥情況分析
    4.4 產(chǎn)氣莢膜梭菌MLST分型
        4.4.1 養(yǎng)殖場中產(chǎn)氣莢膜梭菌的MLST分析
        4.4.2 肉鴨從養(yǎng)殖到屠宰過程中產(chǎn)氣莢膜梭菌的MLST分析
    4.5 產(chǎn)氣莢膜梭菌系統(tǒng)發(fā)育分析
5 結(jié)論
6 創(chuàng)新點
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]北京市某職業(yè)學(xué)校一起食源性疾病暴發(fā)的調(diào)查[J]. 鄭蘭紫,馮月明,周國營,王化勇.  中國公共衛(wèi)生管理. 2018(01)
[2]澳門地區(qū)雞源產(chǎn)氣莢膜梭菌的污染情況及基因分型[J]. 陸宗浩,黃慧怡,梁曉君,吳志君,李婉芬.  中國人獸共患病學(xué)報. 2018(03)
[3]鄭州市熟肉制品中產(chǎn)氣莢膜梭菌污染狀況調(diào)查[J]. 王小慧,魏法山,趙莉君,牛會敏,李苗云,柳艷霞,趙改名.  中國食品衛(wèi)生雜志. 2017(02)
[4]冷鮮雞產(chǎn)氣莢膜梭菌及其毒素的潛在危害分析[J]. 馬壯,彭新宇,葉得河,高彪,袁明貴,尹燁華,徐志宏.  廣東農(nóng)業(yè)科學(xué). 2016(08)
[5]一起由快餐盒飯引發(fā)的產(chǎn)氣莢膜梭菌食物中毒[J]. 劉秀峰,陳東宛,呂金昌,高彭,李永進(jìn).  中國衛(wèi)生檢驗雜志. 2016(11)
[6]魏氏梭菌外毒素的研究進(jìn)展[J]. 許崇利.  河南師范大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2016(01)
[7]陜西省部分地區(qū)雞源A型產(chǎn)氣莢膜梭菌分離株的藥敏試驗[J]. 姜艷芬,紀(jì)文靜,許晗.  動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2015(10)
[8]不同地區(qū)雞源產(chǎn)氣莢膜梭菌的毒素型鑒定和藥敏試驗[J]. 胡賀,覃宗華,王艷華,龔振興,劉保紅,殷昊,彭險峰,馬雪婷,李祥瑞,蔡建平.  畜牧與獸醫(yī). 2015(10)
[9]SPF雞糞菌移植與發(fā)酵床飼養(yǎng)模式下肉雞生產(chǎn)性能和抗藥性研究[J]. 李運喜,駱延波,宋敏訓(xùn),馮敏燕,林樹乾,劉軍偉,郭文龍,劉玉慶,劉煥奇.  山東農(nóng)業(yè)科學(xué). 2015(05)
[10]雞產(chǎn)氣莢膜梭菌的分離鑒定及藥敏試驗[J]. 艾地云,邵華斌,張騰飛,詹麗超,羅玲,張蓉蓉,汪宏才,王紅琳,羅青平,溫國元.  動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2014(06)

碩士論文
[1]山東省泰安市零售鴨產(chǎn)品中產(chǎn)氣莢膜梭菌的分離鑒定、基因分型及耐藥性研究[D]. 劉煜.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2019
[2]山東省泰安市不同來源的雞產(chǎn)氣莢膜梭菌分離鑒定、耐藥性及基因分型研究[D]. 張匯寧.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2019
[3]廣州市冷鮮雞產(chǎn)氣莢膜梭菌的污染分析及netB菌株的致病性研究[D]. 馬壯.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[4]規(guī)�；u場健康雞群產(chǎn)氣莢膜梭菌的分離、鑒定及遺傳多樣性研究[D]. 鄭曉麗.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009



本文編號：3704028