為了探究多不飽和脂肪酸對小尾寒羊前體脂肪細(xì)胞增殖的影響,試驗采用Ⅰ型膠原酶消化法分離小尾寒羊尾部和皮下前體脂肪細(xì)胞進(jìn)行原代和傳代培養(yǎng),并對其進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察,繪制生長曲線;誘導(dǎo)培養(yǎng)后,利用油紅O染色法對其進(jìn)行鑒定,觀察其儲脂特性;添加不同濃度（100,150,200,250,300,350μmol/L）α-亞麻酸（alpha-linolenic acid,ALA）和亞油酸（linoleic acid,LA）,作用不同時間（1,3,5,7,9 d）后采用MTT法檢測細(xì)胞增殖情況。結(jié)果表明:小尾寒羊尾部和皮下前體脂肪細(xì)胞均呈長梭形或不規(guī)則三角形,生長曲線均呈"S"形,尾部前體脂肪細(xì)胞倍增時間為22.04 h,顯著短于皮下前體脂肪細(xì)胞（29.56 h）;尾部前體脂肪細(xì)胞最大增殖密度為5.89×10~5個/mL,顯著大于皮下前體脂肪細(xì)胞（2.97×10~5個/mL）;不同部位前體脂肪細(xì)胞比生長速率無顯著差異（P＞0.05）。經(jīng)誘導(dǎo)分化5 d后,細(xì)胞內(nèi)均有可視脂滴,油紅O染色呈紅色。添加濃度為150μmol/L ALA或LA作用于前體脂肪細(xì)胞1 d,均能極顯著促進(jìn)細(xì)胞增殖;作用時間延長至3～9 d... 

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
1 材料
    1.1 試驗動物
    1.2 主要試劑
    1.3 主要儀器
    1.4 溶液的配制
2 方法
    2.1 前體脂肪細(xì)胞分離培養(yǎng)
    2.2 前體脂肪細(xì)胞生長動力學(xué)分析
    2.3 前體脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化及油紅O染色
    2.4 ALA和LA對前體脂肪細(xì)胞增殖的影響
    2.5 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析
3 結(jié)果與分析
    3.1 前體脂肪細(xì)胞分離培養(yǎng)
    3.2 前體脂肪細(xì)胞生長動力學(xué)分析
    3.3 前體脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化及油紅O染色
        3.3.1 尾部前體脂肪細(xì)胞
        3.3.2 皮下前體脂肪細(xì)胞
    3.4 ALA和LA對前體脂肪細(xì)胞增殖的影響
4 討論與結(jié)論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]草魚前體脂肪細(xì)胞原代、傳代培養(yǎng)及鑒定[J]. 曹鍇,李影,蔡志華.  重慶師范大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2010(06)
[2]絨山羊肌內(nèi)前體脂肪細(xì)胞的基因表達(dá)分析[J]. 杜琛,付紹印,韓志玲,孟麗云,愛倫高娃,高麗霞,成立新,張文廣,李金泉.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報. 2013(10)
[3]綿羊前體脂肪細(xì)胞的分離培養(yǎng)及誘導(dǎo)分化[J]. 崔京京,富俊才,孫巖,陳東.  中國畜牧雜志. 2012(01)
[4]多不飽和脂肪酸對小鼠3T3-L1前脂肪細(xì)胞增殖和分化的影響[J]. 陳蓉,郭莉霞,殷鐘意,劉柏華,鄭旭煦.  現(xiàn)代食品科技. 2014(07)
[5]綿羊肌內(nèi)脂肪前體細(xì)胞的體外培養(yǎng)及分選[J]. 耿曉暉,富俊才,韓凱,陳東.  中國農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2014(05)
[6]TLR4基因在小尾寒羊乳房炎乳腺組織中的表達(dá)[J]. 陳富強(qiáng),張小麗,李發(fā)弟,楊勃,唐然,張晨,張欣,宋曉育,馬小軍.  農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報. 2016(03)
[7]從江香豬肌內(nèi)和皮下脂肪前體細(xì)胞分化過程中相關(guān)基因的表達(dá)[J]. 孫成娟,許厚強(qiáng),趙佳福,陳偉,周迪,張青青.  農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報. 2017(12)
[8]瘦素對雞原代前體脂肪細(xì)胞增殖分化的影響[J]. 覃飛,張羽,劉嘉,朱慶,王彥,尹華東,李地艷,趙小玲.  四川農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2016(04)
[9]Highly active antiretroviral therapy dysregulates proliferation and differentiation of human pre-adipocytes[J]. Eyone Jones,Pavel Mazirka,Margaret A McNurlan,Frank Darras,Marie C Gelato,Giuseppe Caso.  World Journal of Virology. 2017(03)
[10]梅山豬前體脂肪細(xì)胞的分離培養(yǎng)及分化相關(guān)基因的表達(dá)規(guī)律研究[J]. 鄭月英,魏勝娟,董書圣,張萌萌,顏培實.  畜牧與獸醫(yī). 2017(06)

碩士論文
[1]武威市小尾寒羊養(yǎng)殖存在問題及發(fā)展前景[D]. 朱煒.蘭州大學(xué) 2017
[2]Marc-145懸浮培養(yǎng)細(xì)胞系的建立及培養(yǎng)研究[D]. 馬花.西北民族大學(xué) 2017
[3]脂肪酸對C2C12和L6細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)分化影響的研究[D]. 林琳.西華大學(xué) 2011
[4]CLA、LA、PA對大鼠前體脂肪細(xì)胞增殖與分化的影響[D]. 李影.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2003



本文編號：3703560