為同時(shí)快速篩查豬傳染性胃腸炎病毒（Transmissible gastroenteritis virus, TGEV）、豬流行性腹瀉病毒（Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）以及豬圓環(huán)病毒2型（Porcine circovirus type 2, PCV2）3種可致豬腹瀉的豬病病原,本研究基于微芯片技術(shù),針對(duì)3種病毒特異性基因分別建立微量實(shí)時(shí)熒光（RT-）PCR檢測(cè)體系,并將其組合在微芯片上。結(jié)果顯示,該方法可特異性檢出以上3種病毒核酸,但不能檢出本實(shí)驗(yàn)室保存的其他5種豬病病毒核酸,而且相互之間無(wú)交叉反應(yīng);靈敏度試驗(yàn)顯示TGEV和PEDV檢測(cè)靈敏度均可達(dá)到1TCID₅₀/0.1 mL,對(duì)于含PCV2全基因組質(zhì)粒,檢測(cè)極限為41 fg/μL。對(duì)237份送檢樣品的檢測(cè)結(jié)果顯示,PEDV和PCV2檢出率分別為0.8%和7.2%,但未檢出TGEV,與常規(guī)管式熒光（RT-）PCR檢測(cè)結(jié)果一致。該項(xiàng)技術(shù)可大大降低篩查的試劑成本,因?yàn)槊總�(gè)反應(yīng)池只需要1.2μL的（RT-）PCR試劑混合物,而且比傳統(tǒng)的實(shí)時(shí)（RT-）PCR系統(tǒng)的熱平衡和熱均勻... 

【文章頁(yè)數(shù)】：7 頁(yè)

【文章目錄】：
1 實(shí)驗(yàn)材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1.1 病毒核酸及被檢樣品
        1.1.2 主要試劑
        1.1.3 主要設(shè)備
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2.1 引物的設(shè)計(jì)合成
        1.2.2 微芯片上樣檢測(cè)
        1.2.3 靈敏度試驗(yàn)
        1.2.4 特異性試驗(yàn)
        1.2.5 送檢樣品的檢測(cè)
2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    2.1 反應(yīng)體系優(yōu)化結(jié)果
    2.2 靈敏度試驗(yàn)結(jié)果
    2.3 特異性試驗(yàn)結(jié)果
    2.4 對(duì)送檢樣品的檢測(cè)結(jié)果
3 討論
4 結(jié)論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]豬傳染性胃腸炎病毒與豬呼吸道冠狀病毒熒光RT-PCR鑒別檢測(cè)方法建立與應(yīng)用[J]. 王慧珊,高志強(qiáng),王金寶,張鶴曉,喬彩霞,吳亞瓊,邢佑尚,朱淑芬.  中國(guó)動(dòng)物檢疫. 2011(10)



本文編號(hào)：3698108