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鴨病毒性肝炎病毒PCR-ELISA檢測方法建立及VP1-IL-2融合基因的原核表達

發(fā)布時間:2022-10-03 16:57
  近幾年,由于鴨病毒性肝炎(DVH)傳播快、致病性強、血清型變異多,嚴重制約了養(yǎng)鴨業(yè)的發(fā)展。目前,檢測該病最常用方法為聚合酶鏈反應(PCR)和酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。但這些方法存在著操作繁瑣,耗時,敏感性低,準確性差等不足。因此建立一種能夠應用于檢測的DVH樣本快速、簡便、標準化的檢測技術迫在眉睫。 本世紀初就有人提出PCR-ELISA方法的研究。該方法結合了PCR和ELISA,并引入特異性探針,在有效的簡化了操作步驟的同時對樣品進行定性、定量分析,大大提高了檢測結果的敏感性與特異性。PCR-ELISA技術在病毒分型,致病菌檢測,克隆鑒定及分子生物學研究等方面有其獨特的優(yōu)勢,如能將其應用于檢測DVH,具有一定的研究意義及推廣價值。 世界范圍內均有不同程度鴨病毒性肝炎疾病存在,目前本病還沒有特效治療藥物。隨著DHV的不斷變異以及DHV分子生物學與基因工程技術的迅猛發(fā)展,從安全性、高效性等方面來考慮,研究推廣基因工程疫苗將會有很好的前景。白細胞介素-2是眾所周知的具有免疫治療、免疫增強、免疫預防作用的細胞因子,迄今已有大量的實驗報道,將IL-2應用于治療動物性疾病的報到中... 

【文章頁數】:70 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
目錄
前言
第一篇 文獻綜述
    第一章 鴨病毒性肝炎的研究進展
        1.1 診斷方法
        1.2 疫苗防控
    第二章 PCR-ELISA 技術的研究進展
        2.1 病毒檢測
        2.2 致病菌檢測
        2.3 寄生蟲檢測
    第三章 白細胞介素-2 的研究進展
        3.1 IL-2 作為免疫佐劑
        3.2 IL-2 在疾病防治中的應用
研究的目的與意義
第二篇 研究內容
    第一章 鴨病毒性肝炎病毒培養(yǎng)及鑒定
        1.1 材料
        1.2 方法
        1.3 結果
        1.4 討論
        1.5 小結
    第二章 DHV PCR-ELISA 檢測方法的建立
        2.1 材料
        2.2 方法
        2.3 結果
        2.4 討論
        2.5 小結
    第三章 VP1-IL-2 融合基因的原核表達
        3.1 材料
        3.2 方法
        3.3 結果
        3.4 討論
        3.5 小結
結論
參考文獻
作者簡介
致謝


【參考文獻】:
期刊論文
[1]鴨病毒性肝炎的診斷與防治[J]. 孫麗霞,曹勇芳.  畜牧獸醫(yī)雜志. 2013(04)
[2]Evaluation of PCR-ELISA as a tool for monitoring transmission of Wuchereria bancrofti in District of Gampaha,Sri Lanka[J]. Asha Dilrukshi Wijegunawardana,Nilmini Silva Gunawardane,Chanditha Hapuarachchi,Aresha Manamperi,Kithsiri Gunawardena,Wimaladharma Abeyewickrama.  Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine. 2013(05)
[3]鴨病毒性肝炎診斷的研究進展[J]. 劉艷萍,高云航,徐鳳宇,馬紅霞.  中國畜牧獸醫(yī). 2013(02)
[4]豬鏈球菌2型PCR-ELISA檢測方法的建立與優(yōu)化[J]. 方勤美,朱繼昌,池洪樹,林天龍.  福建農業(yè)學報. 2012(12)
[5]空腸彎曲桿菌PCR-ELISA檢測方法的建立[J]. 唐夢君,周生,張小燕,唐修君,蒲俊華,高玉時.  吉林農業(yè)大學學報. 2013(03)
[6]鴨病毒性肝炎的防治[J]. 陳曉明.  畜牧獸醫(yī)科技信息. 2012(02)
[7]禽流感病毒RT-PCR ELISA診斷方法的建立[J]. 楊少華,胡北俠,許傳田,顏士敢,張琳,黃艷艷,張秀美.  中國農學通報. 2012(02)
[8]豬白細胞介素2/6嵌合基因的融合表達及活性[J]. 閆若潛,馬文濤,吳志明,王東方,李桂喜,劉梅芬,張盼盼,黃清.  中國獸醫(yī)學報. 2012(01)
[9]PCR-EIA技術的研究進展及應用[J]. 張奇舒,修冰水,張賀秋,謝寶貴.  生物技術通訊. 2011(06)
[10]Ⅰ型鴨肝炎病毒間接ELISA方法的建立[J]. 孫鳳萍,高駿,胡建華,王勝昌,高誠.  上海農業(yè)學報. 2011(04)

博士論文
[1]鴨病毒性肝炎弱毒疫苗(A66株)的研制[D]. 張小飛.南京農業(yè)大學 2010
[2]單核細胞增多性李斯特菌PCR和PCR-ELISA檢測方法的建立[D]. 譚炳乾.華中農業(yè)大學 2008
[3]鴨白細胞介素2配體與受體alpha的研究[D]. 王金勇.浙江大學 2006

碩士論文
[1]Ⅰ型鴨肝炎病毒RNA聚合酶(RdRp)的基因克隆、表達及其亞細胞定位分析[D]. 王超.甘肅農業(yè)大學 2012
[2]花生DGAT2基因的原核表達與亞細胞定位研究[D]. 李蘭.山東師范大學 2012
[3]牛傳染性鼻氣管炎病毒gD基因原核表達及間接ELISA檢測方法的建立[D]. 陳婷.西北農林科技大學 2012
[4]鴨疫里默氏桿菌OmpA與鴨IL-2融合基因的克隆與原核表達[D]. 劉佳麗.吉林農業(yè)大學 2011
[5]鴨肝炎病毒的分離鑒定及ELISA檢測抗原、抗體方法的建立[D]. 韓永俊.華中農業(yè)大學 2007



本文編號:3684459

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